| 抗2,4 D单克隆抗体制备及免疫学特性鉴定 |
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| 引用本文： | 龚 芳,席 俊,李青梅,职爱民,胡骁飞,柴书军,张改平,陆启玉.抗2,4 D单克隆抗体制备及免疫学特性鉴定[J].西北农业学报,2012,21(11):24-28. |
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| 作者姓名： | 龚 芳 席 俊 李青梅 职爱民 胡骁飞 柴书军 张改平 陆启玉 |
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| 作者单位： | 河南工业大学粮油食品学院;河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室 |
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| 基金项目： | 河南工业大学引进人才专项(2010BS010) |
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| 摘 要： | 制备抗2,4-D高敏感性和高特异性的单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。采用EDC法将BSA、OVA和2,4-D偶联制成免疫原和包被原,并经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后,用免疫原免疫Balb/c小鼠,经过4次免疫,用间接ELISA和阻断ELISA选择高效价、高敏感性的小鼠进行细胞融合;应用杂交瘤细胞技术建立分泌抗2,4-D单克隆抗体的杂交瘤细胞株;用体内诱生法制备腹水,并对其效价、敏感性、亚型和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果表明,融合后筛选出3株特异性高的杂交瘤细胞1F11、2A12、2G12,单抗亚型均为IgG1型,效价为1∶2 560～1∶5 120,对2,4-D的IC50分别为0.801、1.332、1.564μg/L,亲和常数(Ka)分别为2.174×1011、3.21×1010和4.36×1010 L/mg,与其他竞争物的交叉反应率均小于0.03%。说明成功获得高敏感性、高亲和力和高特异性的2,4-D mAb,为2,4-二氯苯氧乙酸残留免疫学快速检测方法的建立奠定基础。
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| 关 键 词： | 2 4-D 单克隆抗体 杂交瘤 特异性 |
Preparation and Immunological Characterization of Monoclonal Antibody against 2,4 D |
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| GONG Fang,XI Jun,LI Qingmei,ZHI Aimin,HU Xiaofei,CAI Shujun,ZHANG Gaiping and LU Qiyu.Preparation and Immunological Characterization of Monoclonal Antibody against 2,4 D[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2012,21(11):24-28. |
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| Authors: | GONG Fang XI Jun LI Qingmei ZHI Aimin HU Xiaofei CAI Shujun ZHANG Gaiping and LU Qiyu |
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| Institution: | 1(1.School of Food Science and Technology,Henan University of Technology,Zhengzhou 450052,China;2.Key Laboratory for Animal Immunology of the Ministry of Agriculture,Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou 450002,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | 2 4 D Monoclonal antibody Hybridoma Specificity |
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