红花苷对白血病细胞的抑制增殖和诱导分化作用

[目的]研究红花苷对K562白血病细胞的抑制增殖和诱导分化作用。[方法]以培养的K562白血病细胞为试验对象,通过XTT试验、集落形成试验、血红蛋白联苯胺染色试验以及形态学试验,考察红花苷对白血病细胞抑制增殖和诱导分化作用。[结果]红花苷剂量依赖性地抑制了K562白血病细胞的活性及集落形成(P0.05),形态学观察及联苯胺染色试验也证实了红花苷剂量依赖性地诱导K562白血病细胞向产生血红蛋白的终末细胞分化。[结论]红花苷对K562白血病细胞具有明显的抑制增殖和诱导分化作用。     

土贝母中皂苷成分的分离及对K562细胞的作用

探讨土贝母皂苷类成分分离方法及对K562肿瘤细胞的体外诱导分化作用机制.采用LLC细胞毒检测为活性指导,通过系统分离,光谱分析确定结构,得到活性较高的土贝母皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ;选择结构上有差异的土贝母皂苷Ⅰ和Ⅲ为作用药物,观察其对K562细胞增殖及分化的影响.用流式细胞仪分析用药后细胞周期改变情况.结果表明,土贝母皂苷Ⅰ、Ⅲ与对照组比较,作用细胞5 d后,细胞增殖受到明显抑制,细胞形态出现中幼、晚幼粒细胞和幼红系的形态特征,对细胞内糖原、过氧化物酶和非特异性酯酶检测均为阳性,细胞周期多数被阻滞在S期以前,说明土贝母皂苷Ⅰ、Ⅲ可以促进肿瘤细胞分化,同时抑制其增殖.     

土贝母中皂苷成分的分离及对K562细胞的作用

探讨土贝母皂苷类成分分离方法及对K562肿瘤细胞的体外诱导分化作用机制.采用LLC细胞毒检测为活性指导,通过系统分离,光谱分析确定结构,得到活性较高的土贝母皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ;选择结构上有差异的土贝母皂苷Ⅰ和Ⅲ为作用药物,观察其对K562细胞增殖及分化的影响.用流式细胞仪分析用药后细胞周期改变情况.结果表明,土贝母皂苷Ⅰ、Ⅲ与对照组比较,作用细胞5 d后,细胞增殖受到明显抑制,细胞形态出现中幼、晚幼粒细胞和幼红系的形态特征,对细胞内糖原、过氧化物酶和非特异性酯酶检测均为阳性,细胞周期多数被阻滞在S期以前,说明土贝母皂苷Ⅰ、Ⅲ可以促进肿瘤细胞分化,同时抑制其增殖.     

羟基喜树碱对人白血病K562细胞增殖和凋亡的影响

[目的]研究羟基喜树碱对人白血病K562细胞增殖与凋亡的影响。[方法]通过光学显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法,探讨不同浓度羟基喜树碱作用不同时间后,K562细胞凋亡的情况。[结果]羟基喜树碱能够诱导K562细胞凋亡,作用48h的最佳浓度为8.0μg/ml。羟基喜树碱可影响K562细胞增殖周期中的S期,即DNA合成期,细胞在此期停滞,诱导其发生凋亡。[结论]为将羟基喜树碱应用于临床治疗白血病提供前期试验依据。     

Zeylenone对急性淋巴细胞白血病细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨Zeylenone体外抗急性淋巴细胞白血病(Acute Lymphoblastic Leukemia,ALL)效应及作用的可能机制。方法应用MTT法比较Zeylenone对肿瘤细胞、正常细胞增殖的影响;AO/EB染色观察其对ALL细胞(Reh、RS4;11)凋亡形态学的改变;流式细胞仪检测药物对细胞凋亡及细胞周期的影响。结果 Zeylenone对多种细胞呈现增殖抑制作用,且对ALL细胞株呈现更高的敏感性,而对外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)抑制作用较小,抑制Reh、RS4;11细胞增殖呈时间依赖性和剂量依赖性;Zeylenone能够诱导ALL细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期。结论 Zeylenone体外具有抗ALL细胞增殖的作用,其作用与诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期相关。     

辛伐他汀对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM增殖的抑制作用

目的研究辛伐他汀(SIM)对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM体外增殖的抑制作用。方法MTT法检测SIM对HO-8910PM细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析SIM对细胞周期的影响;Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学改变。结果SIM抑制HO-8910PM细胞的增殖,细胞被阻滞在G0/G1期;荧光染色法显示经SIM作用后细胞出现变形,染色质浓缩,产生凋亡小体。结论SIM在体外能有效地抑制癌细胞的增殖,其作用可能是通过诱导其凋亡产生的。     

线粒体途径参与FTY720诱导白血病细胞凋亡的研究

为研究FTY720诱导K562细胞凋亡与线粒体途径的关系。体外培养人白血病K562细胞,用不同浓度FTY720处理细胞24 h,台盼蓝染色法检测K562细胞存活率;流式细胞术分析细胞凋亡和线粒体功能。免疫印迹技术检测线粒体相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。收集FTY720处理48 h细胞,流式细胞技术检测细胞周期。结果表明:随FTY720浓度的增加,K562细胞的存活率下降,细胞凋亡增加,线粒体膜电位下降,促凋亡蛋白Bax表达明显增加。细胞周期分析发现,Sub G1期细胞增加,而S期和G2M期细胞减少。表明线粒体途径参与FTY720诱导K562细胞凋亡。     

西罗莫司酯化物对肾癌细胞系786-0的抑制作用及其机制初探

目的:研究西罗莫司酯化物(Temsirolimus)对肾癌细胞786-0增殖与凋亡的影响,并探讨分子作用机制.方法:采用显微镜形态学观察和MTT法检测细胞增殖抑制;流式细胞仪分析用药48h后肾癌细胞周期变化和细胞凋亡率;Western免疫印迹法检测P70S6K,4EBP-1蛋白水平表达变化.结果:西罗莫司酯化物作用786-0细胞的IC50=3.31μmol/L;给药48h后,细胞明显阻滞于G0/G1期,G2/M期细胞比例减少,细胞凋亡率增加;肾癌786-0细胞中P70S6K和4EBP-1蛋白的磷酸化水平明显下降.结论:西罗莫司酯化物能显著抑制肾癌细胞786-0的细胞增殖作用,阻滞细胞周期于G0/G1期且诱导细胞凋亡,其机制可能与P70S6K和4EBP-1磷酸化相关.     

姬松茸多糖诱导HepG2 细胞凋亡的线粒体通路研究

为探讨姬松茸多糖诱导HepG2细胞凋亡过程中线粒体膜电位和细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的变化.以人肝癌细胞系HepG2细胞为对象,使用流式细胞仪检测姬松茸多糖对HepG2细胞凋亡及线粒体膜电位的影响,激光共聚焦显微镜检测HepG2细胞[Ca2+]i的变化.结果表明姬松茸多糖能显著诱导HePG2细胞凋亡,并不同程度降低HepG2细胞线粒体跨膜电位,升高细胞[Ca2+]i,造成钙稳态失衡.姬松茸多糖诱导HepG2细胞凋亡的机制与降低线粒体膜电位,造成细胞内Ca2+超载有关.     

羟基磷灰石纳米粒子运载Stat3 shRNA对鼠胶质瘤C6细胞的促凋亡效应

目的探讨羟基磷灰石纳米粒子运载Star3 shRNA对鼠胶质瘤C6细胞的促凋亡作用,并探讨相关机制．方法羟基磷灰石纳米粒子包被的Stat3 shRNA转染到c6胶质瘤细胞内,MTT法检测细胞增殖情况,应用流式细胞术及吖啶橙染色观察细胞周期分布及凋亡情况,TUNEL染色观察细胞的凋亡及增殖情况．结果羟基磷灰石纳米粒子运载Star3 shRNA转染C6细胞后,呈时间依赖性抑制C6细胞生长和增殖．通过流式细胞术检测证实：该质粒可使细胞阻滞在细胞周期的GO／G1期,细胞凋亡率明显增加（P＜0．05）,与对照组比较差异有统计学意义;吖啶橙及TUNEL染色发现其明显促进细胞凋亡（P＜0．05）,与对照组比较差异有统计学意义;结论羟基磷灰石纳米粒子运载Stat3 shRNA体外可明显抑制胶质瘤C6细胞增殖,并促进其凋亡,是治疗胶质瘤较理想的方法．     

日本凹顶藻的活性物质对姬松茸病原菌的抑制作用研究

通过对日本凹顶藻以不同溶剂的粗提、乙醇提取物的极性分离、不同极性的薄层层析和多糖的提取,进行抗菌试验的研究,发现95%乙醇和V甲醇:甲苯为3∶1的提取的活性物质具有较强的抗姬松茸的病原细菌活性,乙酸乙酯相对病原细菌的抑菌强于乙醇的粗提物,而水相基本无抑菌效果,乙酸乙酯相的两个带(Rf0.57、Rf0.63)浓度为0.1g/ml具有较强抗姬松茸病原细菌的活性,对假单孢杆菌抑菌圈达到19.3mm,水相层析带的抑菌活性较弱,多糖的粗提物配成0.25g/g的水溶液对姬松茸病原真菌有较好的抑菌效果对黑曲霉、桔青霉和绿色木霉的抑菌圈分别达到10.8mm、7.9mm、5.3mm。     

姬松茸盆景培养的初步研究

对在家庭环境下姬松茸盆景的培养进行了初步研究,结果表明:北方城市5～9月份的家庭环境适合于箱式姬松茸盆景的培养,湿度和空气调节需要按照姬松茸子实体发育的特点来进行。供试的2个姬松茸菌株在以芦笋老茎和玉米秸秆为主料的3种配方的培养料上的产量和生物学效率均达到5 kg/m2和40%以上,而且具有转潮期更短,出菇潮数更多的特点,所以姬松茸盆景作为一种新型的栽培方式完全可行。     

姬松茸保鲜影响因素分析及参数优化

以提高姬松茸的保鲜品质为目的 ,采用不同处理进行保鲜对比试验。采用正交实验方法 ,分析了不同处理对姬松茸的褐变程度及膳食纤维素的影响。结果表明 ,姬松茸经处理后进行保鲜 ,可有效减缓贮存过程中的褐变程度和品质变化。在相同条件下 ,以 0 2 5 %NaHSO3水溶液渗析 30min ,捞出沥水后再放入 0 15 %VC与 0 5 %柠檬酸混合的水溶液中渗析 10min进行处理 ,保鲜效果最好。此外 ,还对该处理的状态参数进行了分析和优化     

马铃薯汁浓度和pH值对姬松茸菌丝体生长的影响

用饱和D－最优设计方法，探讨了马铃薯汁浓度、pH值对姬松茸菌丝体生长的影响，得到如下初步的统计推断：在PDA培养基的基础上，最优方案是马铃薯汁浓度为190.8g/L，pH值为6.201，其中主因子效应马铃薯汁浓度的影响大于pH值。     

姬松茸液体发酵各组分多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

采用MTT法依次用热水、冷碱、热碱浸提姬松茸菌丝体,研究得到的3种水溶性多糖及胞外多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.结果表明:4种多糖在不同质量浓度下可单独或协同Con A刺激淋巴细胞增殖;以0.5-0.25μg.mL-1冷碱提取的水溶性多糖,可促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖(P>0.05).     

姬松茸深层发酵生产菌丝体和胞外多糖的初步研究

[目的]研究姬松茸的深层发酵技术,筛选了适宜姬松茸液体深层培养的碳源和氮源培养基。[方法]对姬松茸的液体深层培养基进行了研究,筛选出适宜姬松茸发酵的最适碳源和氮源,并研究了不同浓度的最佳碳源和氮源对姬松茸菌丝体和胞外多糖的影响。[结果]姬松茸菌株生长和胞外多糖生产的最佳碳源为葡萄糖,最适浓度为30 g/L;最佳氮源为蛋白胨和酵母膏的组合,最适的组合浓度为7 g/L蛋白胨+7 g/L酵母膏。在此条件下,姬松茸菌体干重和胞外多糖产量均达到最大值,分别为8.7 g/L和281 mg/L。[结论]该研究为姬松茸的进一步规模化培养提供了参考。     

磁场对姬松茸J1特性的影响

两种还原剂不同浓度和磁性材料十种组合方式进行栽培姬松茸J1的结果表明,在单一的50mg/kg的硫合剂的作用上栽培姬松茸J1在氨基酸的含量、产量、镉含量分别比对照提高16%～22.2%、提高6.7%、降低23.2%～27.4%,通过磁性物质和硫合剂50mg/kg共同作用比单一使用硫合剂50mg/kg的作用姬松茸子实体镉的含量下降21%,在氨基酸含量没有明显的变化,而产量呈略微下降的趋势,通过F检验镉含量下降达到极显著的水平,选择恰当的还原剂在磁性环境中不仅能提高其生长量和氨基酸,而且还能促使姬松茸子实体镉含量降低目的。     

响应面法优化巴西蘑菇液体培养基的研究

为了优化巴西蘑菇(Agaricus blazei Murrill)的液体发酵培养,在单因素试验基础上,以杏鲍菇(Pleurotus Eryngii)菌渣提取液(A)、酵母浸膏(B)和玉米粉(C)用量作为影响因子,巴西蘑菇的菌丝体干重(Y)为响应值,采用3因素3水平的Box-Behnken试验设计及响应面分析法对巴西蘑菇液体培养基各参数及其交互作用进行了研究。结果表明:因素A、B、C及AC的交互作用对巴西蘑菇菌丝体干重影响均达到了极显著水平,液体发酵培养基最优组分为:杏鲍菇菌渣153.5 g/L,酵母浸膏9.7 g/L,玉米粉30.5 g/L,其菌丝体生物量最大为1.785 g/100 m L,与试验模型预测值(1.796 g/100 m L)的相对误差值仅为0.62%。     

蘑菇属17个菌株的酯酶同工酶分析

利用酯酶同工酶对野生双孢蘑菇和褐色、白色双孢蘑菇栽培种,大肥菇,美味蘑菇和姬松茸等蘑菇属17个菌株进行了酶谱带表型和相似性聚类分析,结果表明野生双孢蘑菇与双孢蘑菇之间亲缘关系较近,相似系数为0.667,而与大肥菇和姬松茸之间亲缘关系较远,相似系数分别为0.00,0.333;野生双孢蘑菇组织分离菌株、多孢分离菌株和单孢分离菌株遗传变异幅度较小,亲缘关系较近,表明野生双孢蘑菇的遗传背景较单一;同时分析了大肥菇与美味蘑菇,褐色蘑菇彼此之间,以及白色双孢蘑菇菌株彼此之间的亲缘关系。