三种植物精油抑菌效果的研究

[目的]研究不同浓度的新疆薰衣草、玫瑰和葡萄籽精油对7种供试菌种的抑菌效果.[方法]采用滤纸片扩散法.[结果]不同浓度的薰衣草、玫瑰和葡萄籽精油对7种供试菌种具有一定的抑菌活性.3;的薰衣草和玫瑰精油对供试菌抑菌效果最好,其中3;薰衣草精油对7种供试菌种抑菌5种菌的活性强度为:金黄色葡萄球菌＞枯草芽孢杆菌＞白色葡萄球菌＞植物乳杆菌＞大肠杆菌＞粪肠球菌＞戊糖片球菌,3;玫瑰精油为:粪肠球菌＞戊糖片球菌>金黄色葡萄球菌＞白色葡萄球菌＞植物乳杆菌＞大肠杆菌＞枯草芽孢杆菌.葡萄籽精油的抑菌效果相对其它两种精油较弱.[结论]薰衣草和玫瑰精油对上述细菌具有较强的抑菌效果,可作为天然抑菌剂.     

薰衣草精油对几种植物病原菌的抑菌作用

【目的】研究薰衣草精油在抑菌方面的功能,对植物病原真菌的抑菌作用,为天然抗菌剂的开发提供依据。【方法】以薰衣草精油作为天然抑菌剂,采用菌丝生长速率法,测定其对6种植物病原真菌的抑菌作用。【结果】在体积分数5.0μL/mL下薰衣草精油处理5 d,对棉花立枯丝核菌、小麦黑胚病菌、番茄早疫病菌具有100%的抑制作用。最低抑菌浓度(MIC)测定显示,薰衣草精油对6种供试菌抑制作用从强到弱分别是棉花立枯丝核菌、小麦黑胚病菌、番茄早疫病菌、水稻稻瘟病菌、棉花黄萎病菌、棉花枯萎病菌。【结论】薰衣草精油对植物病原真菌具有良好的抑制作用,在农药应用中有较好的应用潜力。     

缬草、龙脑精油的抑菌活性

以共水蒸馏法提取的缬草精油和龙脑精油为研究对象,采用二倍稀释法测定2种精油的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),根据单独抑菌实验结果,选用抑制作用较强的3种细菌进行2种精油的联合抑菌实验。结果表明:对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌,缬草精油和龙脑精油均具有明显抑制作用;对沙门氏菌,龙脑精油抑制作用明显,缬草精油抑制作用不明显;对青霉和黑曲霉, 2种精油抑制作用均不明显; 2种精油复配对抑制金黄色葡萄球菌没有增效作用,对抑制枯草芽孢杆菌、大肠杆菌有协同作用,说明不同浓度配比的2种精油对不同细菌有不同抑制效果,协同作用对细菌具有选择性。     

地衣芽孢杆菌NJWGYH 833051的抑菌作用

通过地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)对不同病原菌平板抑制试验以及在植物上的定殖试验,初步研究其抑菌作用。结果表明,地衣芽孢杆菌对番茄叶霉病菌有较好的抑制作用。     

芽孢杆菌的抑菌活性与其产脂肽类抗生素的相关性

【目的】明确55株芽孢杆菌（Bacillus spp.）菌株对3个植物病原真菌（小麦纹枯病菌Rhizoctonia cerealis、小麦赤霉病菌Fusarium graminearum、西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f. sp. niveum）抑菌活性及与其产生的脂肽类抗生素种类的定性定量关系。【方法】采用平板对峙培养分别测定55株芽孢杆菌活体菌及其脂肽类抗生素粗提物对3个真菌的抑菌活性;根据脂肽类抗生素合成相关基因序列srfA、ituA和fenA对55株芽孢杆菌进行PCR扩增;采用质谱及液相色谱分析55株芽孢杆菌脂肽类抗生素的种类、数量。【结果】55株芽孢杆菌菌株及其脂肽类抗生素粗提物对3个病原真菌均具有一定的抑菌活性,其中16.5%菌株脂肽类粗提物的抑菌活性比活体菌的强,55.8%菌株粗提物的抑菌活性比活体菌的弱,27.7%菌株粗提物的抑菌活性基本没有变化。55株芽孢杆菌基因组PCR扩增结果表明,89.1%菌株含有srfA,87.3%菌株含有ituA,只有56.4%菌株中含有fenA。55株芽孢杆菌粗提物质谱检测结果表明,53株菌株检测到surfactins,48株检测到iturins,只有菌株Bs916（Bacillus subtilis 916）检测到fengycins,粗提物中没有检测到3种抗生素的菌株其抑菌活性较弱或者没有。同时发现,在检测到iturins的48株菌株中,48株均检测到bacillomycin D,2株检测到bacillomycin L,12株检测到bacillomycin F、iturin A或mycosubtilin。对55株芽孢杆菌粗提物的液相色谱检测结果表明,53株菌株检测到surfactins;51株检测到iturins;只有菌株Bs-916检测到fengycins;有2株菌株未检测到上述3种抗生素。根据iturins的色谱峰出峰时间及峰型分为4大类,命名为1、2、3和4型,4种类型的iturins对病原菌的抑菌活性强度顺序为1型＞2型＞3型＞4型。在3株菌株JCC-1、JCC-9和JCC-18中检测到2个未知的脂肽类化合物（命名为Unknowns：Unknown1、2）的质谱峰。【结论】芽孢杆菌脂肽类抗生素是抑制植物病原真菌的主要成分,并具有多样性;iturins结构的变化及其分泌量与抑制植物病原真菌活性有一定的相关性。芽孢杆菌还产生一些未知的脂肽类化合物。     

多功能芽孢杆菌的分离、筛选及活性测定

从小麦、禾本科杂草根际取样,分离固氮芽孢杆菌,并测定各菌株的抑菌活性及降解有机磷农药的能力,筛选多功能芽孢杆菌菌株.结果表明,分离筛选的11株固氮芽孢杆菌主要包括胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)、巨大芽孢杆菌(B.megaterium)、蜡状芽孢杆菌(B.cereus)、地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)和短小芽孢杆菌(B.pumilus);其中7株菌株对立枯丝核菌和禾谷丝核菌两种病原菌具有明显的抑菌活性;5株菌株能有效降解甲胺磷和甲基对硫磷两种有机磷农药.巨大芽孢杆菌BM3和地衣芽孢杆菌BL6具有明显的固氮、抑菌和降解有机磷农药等多种功能活性.     

一株植物乳杆菌对脂环酸芽孢杆菌的抑菌活性

【目的】筛选具有抑制脂环酸芽孢杆菌活性的乳酸菌,并对其抑菌活性进行研究,为延长果汁的保质期和提高产品的安全性提供理论基础。【方法】用琼脂扩散法,从50株分离自泡菜的乳酸菌中筛选具有抑制脂环酸芽孢杆菌活性的菌株,研究所获菌株发酵上清液(Cell-free supernatant,CFS)经不同pH(3,4,5,6,7)、温度(40,60,80,100,121℃)和酶(过氧化氢酶、链霉蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶、胰蛋白酶)处理后抑菌活性的变化;通过气相色谱-质谱分析乳酸菌代谢物中的组成成分;利用扫描电镜观察CFS处理后脂环酸芽孢杆菌的形态变化;将乳酸菌应用于苹果汁的发酵,并测定发酵过程中乳酸菌和脂环酸芽孢杆菌生长及6种有机酸含量的变化情况。【结果】筛选得到1株具有较好抑菌活性的植物乳杆菌(L10),其代谢物抑菌活性呈pH依赖性,具有温度和过氧化氢酶稳定性,但蛋白酶水解会降低其抑菌活性。植物乳杆菌L10代谢物中的成分主要是有机酸,并且含有环(亮氨酸-脯氨酸)和环(甘氨酸-脯氨酸)两种环二肽。CFS通过对脂环酸芽孢杆菌的细胞壁和细胞膜造成严重损害,导致细胞破裂,达到杀菌的目的。植物乳杆菌L10能够抑制苹果汁中脂环酸芽孢杆菌的生长,并且发酵后主要有机酸的含量发生显著变化(P0.05)。【结论】植物乳杆菌L10可以产生有机酸、细菌素等抑菌物质来杀灭脂环酸芽孢杆菌,可以应用于果汁的发酵及生物保存。     

生防菌株LDB1对不同植物病原真菌抑菌谱的比较

以实验室分离得到的枯草芽孢杆菌菌株LDB1为实验材料,通过对该菌株分别进行固体、液体培养条件下的抑菌谱比较研究,以明确该菌株对主要植物病原真菌的抑制效果。结果表明:(1)两种处理方式均对供试的8种植物病原真菌表现出较好的抑制效果;(2)除水稻纹枯病菌和苹果轮纹病菌外,LDB1菌株发酵液对其他6种病原菌的抑制作用皆比其固体状态强,Duncan多重比较分析显示,在α=0.05的水平上,两种处理方式差异显著。     

生防菌株LDB1对不同植物病原真菌抑菌谱的比较

以实验室分离得到的枯草芽孢杆菌菌株LDB1为实验材料,通过对该菌株分别进行固体、液体培养条件下的抑菌谱比较研究,以明确该菌株对主要植物病原真菌的抑制效果。结果表明:(1)两种处理方式均对供试的8种植物病原真菌表现出较好的抑制效果;(2)除水稻纹枯病菌和苹果轮纹病菌外,LDB1菌株发酵液对其他6种病原菌的抑制作用皆比其固体状态强,Duncan多重比较分析显示,在α=0.05的水平上,两种处理方式差异显著。     

番茄灰霉病菌内生拮抗细菌的筛选及鉴定

以从植物中分离的内生细菌为材料,筛选对番茄灰霉病菌等有拮抗作用的菌株,并对其抑菌活性、抑菌谱进行分析并明确其分类地位。以番茄灰霉病菌、番茄早疫病菌和番茄枯萎病菌等植物病原菌为指示菌,采用平板对峙法和生长速率法对所分离的12株细菌的抑菌活性进行测定,并对具有较好拮抗活性的菌株的抑菌广谱性进行分析。结果表明,所分离菌株中,GZ-5对番茄灰霉病菌的抑制效果最好,GZ-3次之,其发酵液对番茄灰霉病菌FQ-1的抑制率分别可达86.6%,83.0%,且2个菌株对黄瓜灰霉病菌、番茄枯萎病菌等9种病原菌也有较好的拮抗活性;通过对2个菌株形态学观察、生理生化测定及16S r DNA序列分析等,初步将GZ-5菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌,GZ-3菌株为地衣芽孢杆菌。     

内生枯草芽孢杆菌Em7抑菌物质的产生条件及其活性

为研究内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Em7抑菌物质产生条件及其特性,以油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)为指示菌,采用单因素和正交试验测定不同培养基成分及培养条件对菌株Em7抑菌物质产生的影响。结果显示,菌株Em7的最佳培养基配方为:麸皮20g/L,牛肉膏10g/L,MnSO41.5g/L;当培养基初始pH=7.0,接种量φ=1%,250mL摇瓶装液量为50mL时,在28℃,150r/min培养获得的培养液抑菌活性最强。此外,菌株Em7的抑菌物质能够抑制10多种重要植物病原菌的菌丝生长、孢子萌发,并致使病菌菌丝出现细胞质外渗、膨大,致使病菌孢子出现顶端膨大、不能正常形成芽管等畸形发育。     

茴香精油对不同产气荚膜梭菌的抑菌效果

为了更好抑制食品中产气荚膜梭菌生长,提高茴香精油应用的科学性,首先对不同产气荚膜梭菌的产芽孢特性进行分析,然后采用牛津杯法研究茴香精油的抑菌效果,确定最低抑菌质量浓度,并将茴香精油添加到鸡肉中,结合微生物预测模型研究不同质量浓度茴香精油对产气荚膜梭菌生长的影响。结果表明,不同菌株产芽孢能力不同,从实际肉制品中分离获得的菌株更容易在短时间内快速产生大量的芽孢。茴香精油对不同产气荚膜梭菌的最低抑菌质量浓度存在较大差异,分离菌株C1、C2和标准菌株ATCC13124、CICC22949的最低抑菌质量浓度分别为11、2. 75、22、5. 5 g·L~(-1)。茴香精油添加到鸡肉中,采用DoseResp模型描述茴香精油对不同产气荚膜梭菌的抑制作用,并对模型的可靠性进行验证。茴香精油对不同产气荚膜梭菌的抑制作用不同。随着茴香精油质量浓度增加,产气荚膜梭菌残存数量逐渐减少。不同产气荚膜梭菌抑制模型的相关系数R~2均在0. 83以上,模型验证的准确度Af在1. 014～1. 289之间,偏差度Bf在1. 005～1. 173之间,表明DoseResp模型能较好预测茴香精油对产气荚膜梭菌的抑制情况。     

薰衣草精油对樱桃番茄采后黑斑病的抑制活性

为薰衣草精油用于防治樱桃番茄采后黑斑病提供依据,研究了薰衣草精油熏蒸和直接接触对病原真菌链格孢(Alternaria alternata)的抑制活性及作用方式。结果表明,在培养基培养试验中,每皿5μl的薰衣草精油熏蒸即可完全抑制病原菌的生长;当400μl/L薰衣草精油直接接触链格孢病原菌时,可完全抑制病原菌的生长。在薰衣草精油对樱桃番茄果实采后黑斑病抑制效果试验中发现,100μl/L精油熏蒸处理果实时,处理组果实发病率比对照组降低54%,用500μl/L精油直接处理果实时,处理组果实发病率则比对照组降低60%。在薰衣草精油对病原真菌链格孢作用方式试验中,薰衣草精油作用时间短时,对链格孢病原菌生长有抑制作用,薰衣草精油作用时间长时(5 d和7 d)对链格孢病原菌有致死效应。     

石菖蒲提取物及其初步分离物的抑菌活性研究

[目的]研究石菖蒲对动物病原菌的抗菌活性。[方法]采用滤纸片法和带药培养基涂布法测定了中药植物石菖蒲茎和叶甲醇提取物对13种动物病原菌的抑菌活性;采用液-液萃取法对石菖蒲茎提取物的抑菌活性成分进行初步分离,并测定各萃取物的抑菌活性。[结果]用带药培养基涂布法测定,石菖蒲茎提取物对表皮葡萄球菌、藤黄微球菌、溶壁微球菌、蜡样芽孢杆菌、痢疾志贺氏菌、伤寒杆菌、巨大芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌9种供试菌有较好的抑菌作用,其最低抑制浓度（MIC值）分别为1.5、2.5、3.5、2.0、1.5、2.5、2.5、3.5、2.5g/L,对变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌4种病原菌在样品浓度为10g/L时无抑菌活性;石菖蒲叶提取物的抑菌活性较差,在浓度为10g/L时,对痢疾志贺氏菌和蜡样芽孢杆菌在72h有抑菌活性,对其余供试菌无抑菌活性。用滤纸片法测定,结果与用带药培养基涂布法基本一致,但抑菌圈较小。用1.0g/L的各萃取物样品处理供试病原菌72h,正丁醇萃取物对9种供试病原菌有抑菌作用,石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和水萃取物无抑菌作用。[结论]中药植物石菖蒲对多种动物病原菌具有抑菌活性,茎的抑菌活性高于叶,抑菌活性物质主要存在于正丁醇萃取物中。     

芽孢杆菌在促进番茄生长和控制青枯病上的比较优势

在离体条件下对47个芽孢杆菌分离物进行了抑制番茄青枯病菌测定,其中12个表现良好的抑菌能力,通过细菌学和Biolog分析将其中5个代表性拮抗菌分别鉴定为枯草芽孢杆菌,解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌,其中枯草芽孢杆菌菌株的抑菌能力最强,解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌菌株其次.同时在温室条件下测定这5个芽孢杆菌拮抗菌促进番茄生长和诱导番茄对青枯病的抗性效果.用芽孢杆菌处理番茄种子能够有效地控制番茄青枯病,通过测定种子萌发,植株生长高度以及鲜重和干重表明芽孢杆菌的大多数分离物能够促进植物生长,同时这5个芽孢杆菌拮抗菌比对照显著地减少了青枯病的发病率,然而, 促生和病害抑制的效果因不同的菌株而异.其中枯草芽孢杆菌拮抗菌株不仅是良好的促生剂,也是有效的抗性诱导剂,它能减少青枯病80%,充分显示了芽孢杆菌在番茄青枯病治理上的潜在重要性.     

芽孢杆菌在促进番茄生长和控制青枯病上的比较优势

在离体条件下对47个芽孢杆菌分离物进行了抑制番茄青枯病菌测定,其中12个表现良好的抑菌能力,通过细菌学和Biolog分析将其中5个代表性拮抗菌分别鉴定为枯草芽孢杆菌,解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌,其中枯草芽孢杆菌菌株的抑菌能力最强,解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌菌株其次.同时在温室条件下测定这5个芽孢杆菌拮抗菌促进番茄生长和诱导番茄对青枯病的抗性效果.用芽孢杆菌处理番茄种子能够有效地控制番茄青枯病,通过测定种子萌发,植株生长高度以及鲜重和干重表明芽孢杆菌的大多数分离物能够促进植物生长,同时这5个芽孢杆菌拮抗菌比对照显著地减少了青枯病的发病率,然而, 促生和病害抑制的效果因不同的菌株而异.其中枯草芽孢杆菌拮抗菌株不仅是良好的促生剂,也是有效的抗性诱导剂,它能减少青枯病80%,充分显示了芽孢杆菌在番茄青枯病治理上的潜在重要性.     

10种植物精油对蓝莓病原菌的体外抑菌活性初筛（英文）

为了开发应用于蓝莓保鲜的天然保鲜剂,采用牛津杯法和试管二倍稀释法对10种植物精油的抑菌活性进行鉴定,研究了植物精油对2种代表性革兰氏细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)及蓝莓中3种有害真菌(链格孢霉、指状青霉、灰霉)的抑制能力。结果显示:肉桂精油、百里香精油对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)抑制效果较好,肉桂精油、马尾松精油对革兰氏阴性菌(大肠杆菌)有较好抑制;10种植物精油中有7种精油对3种真菌均有抑制作用,其中肉桂精油、丁香精油、八角精油、百里香精油等精油均有较强的抑真菌能力;其中,肉桂精油对真菌以及革兰氏阴性和阳性菌均有强烈抑制效果,最小抑菌浓度在0.039 1～0.156 0μL/m L之间;植物精油对真菌的抑菌效果优于细菌,可以用肉桂精油作为复配基油,添加其他精油应用于蓝莓的天然保鲜,以达到更好的抑菌防腐效果。     

固氮类芽孢杆菌的分离鉴定及其促生、抑菌活性的测定

固氮类芽孢杆菌是一类能产生芽孢、具有固氮能力的革兰氏阳性细菌。这类菌除固氮活性和抗逆力强外,有些菌株还具有促进植物生长、对植物病原菌有抑制作用、耐贮藏等特点,被认为是制备微生物肥料的优良菌种之一,但目前经过鉴定的菌种资源十分有限。从全国20个省不同地理环境、不同种类植物根际采集分离筛选获得500个菌株,从中鉴定出60个具有固氮结构基因(nif H)的分离株,通过对其中17个分离株的nif H和16S rRNA基因序列的比对分析,初步确定了它们的系统发育地位,17个分离株均属于固氮类芽孢杆菌,而且这17个菌株全部具有固氮酶活性,最高达到2 109.9±131.1 nmol/mg·h。进一步分析,其中5株具有IAA分泌能力,最高为49.908±3.6μg/m L,11株对4种常见植物病原菌表现出抑制作用。在17个分离株中,共发现了5株兼具固氮、分泌IAA以及抑制植物病原菌的特点,其中IAA分泌能力最低的BJ-18对番茄幼苗仍具有显著的促生作用。分离和鉴定的固氮类芽孢杆菌丰富了固氮微生物菌种资源,发现的兼具固氮、分泌IAA以及抑制植物病原菌的固氮类芽孢杆菌在农业生产中具有潜在的广泛应用前景。     

10种植物精油对蓝莓病原菌的体外抑菌活性初筛

为了开发应用于蓝莓保鲜的天然保鲜剂,采用牛津杯法和试管二倍稀释法对10种植物精油的抑菌活性进行鉴定,研究了植物精油对2种代表性革兰氏细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)及蓝莓中3种有害真菌(链格孢霉、指状青霉、灰霉)的抑制能力。结果显示:肉桂精油、百里香精油对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)抑制效果较好,肉桂精油、马尾松精油对革兰氏阴性菌(大肠杆菌)有较好抑制;10种植物精油中有7种精油对3种真菌均有抑制作用,其中肉桂精油、丁香精油、八角精油、百里香精油等精油均有较强的抑真菌能力;其中,肉桂精油对真菌以及革兰氏阴性和阳性菌均有强烈抑制效果,最小抑菌浓度在0.039 1~0.156 0μL/mL之间;植物精油对真菌的抑菌效果优于细菌,可以用肉桂精油作为复配基油,添加其他精油应用于蓝莓的天然保鲜,以达到更好的抑菌防腐效果。     

肉桂精油的抑菌作用

为了探讨肉桂精油的抑菌效果,本试验以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、黑曲霉(Aspergillusniger)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和大肠杆菌(Escherichia coli)4个菌种为研究对象,采用抑菌圈法和双倍稀释法对肉桂精油的最小抑菌浓度和抑菌性能进行了试验研究.结果表明:肉桂精油对4个菌种均具有较强的抑菌效果,对金黄色葡萄球菌、黑曲霉、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为200,200,200,400 μL/mL.同一浓度的肉桂精油对4个菌种的抑菌圈直径大小为金黄色葡萄球菌(30.51 ～45.02 mm)＞黑曲霉(22.52～43.07 mm)＞枯草芽孢杆菌(19.52 ～ 25.51 mm)＞大肠杆菌(10.52 ～ 25.86 mm).