通过染色体整合β-1,4-葡聚糖酶基因glu14提高绿色木霉对小麦纹枯病的防治效果

 绿色木霉LTR-2是生物防治菌株。利用来自巨大芽胞杆菌Ap25的β-1,4-葡聚糖酶基因glu14构建木霉表达载体pSilent/glu14,利用限制性内切酶介导法(REMI)转化绿色木霉LTR-2。PCR扩增及Southern杂交证实目的基因已插入木霉转化子的染色体DNA上。转化子的β-1,4-葡聚糖酶水解活性,对小麦纹枯病菌的平板抑制作用及温室防治效果较原始菌株LTR-2明显提高(P<0.01),其中转化子L-10的效果最好,平板抑制率比LTR-2提高了27.0%,温室防治效果比LTR-2提高了26.7%。本试验表明,利用REMI技术,将β-1,4-葡聚糖酶基因重组到木霉染色体DNA上,是获得高效木霉工程菌株的有效手段。     

两株木霉共培养发酵提高对小麦苗期茎基腐病的防治效果

 通过平板对峙培养法、孢子萌发法和温室盆栽法筛选高效防治小麦苗期茎基腐病的木霉共培养菌株。从17株供试菌株中,筛选出3株平板抑制率较高的木霉菌株:深绿木霉HB20111、哈茨木霉LTR-2和TW21990,并进行两两组合共培养发酵。孢子萌发试验表明,HB20111+TW21990共培养发酵滤液对假禾谷镰孢孢子萌发抑制率最高,达71.83%,较单菌株HB20111和TW21990分别提高了6.13%和19.53%(P＜0.05)。温室条件下,HB20111+TW21990共培养发酵液500×稀释浸种效果最好,对小麦苗期茎基腐病防治效果和幼苗质量增长率分别达78.81%和130.80%,较单菌株HB20111和TW21990的分别提高了17.88%、30.46%和50.05%、61.22%(P＜0.05);荧光定量检测结果表明,与单菌株相比,HB20111+TW21990共培养发酵显著降低假禾谷镰孢在小麦幼苗根围土、根际土、根系和茎基部中的拷贝数(P＜0.05),且假禾谷镰孢拷贝数与病情指数呈正相关,与幼苗鲜质量呈负相关。本研究发现HB20111+TW21990共培养发酵具有增效作用,对小麦苗期茎基腐病的防治效果显著高于单菌株。     

木霉共培养发酵对黄瓜枯萎病的防治效果

为明确深绿木霉HB20111和哈茨木霉TW21990共培养发酵对黄瓜枯萎病的防治作用,采用对峙培养法观察两菌株的亲和性,通过浸种抑菌萌发试验筛选共培养发酵的最佳条件,并在温室条件下验证其生防效果.结果表明:在PDA平板上25℃对峙培养5 d,两株木霉亲和性较好.两菌株等量接种发酵培养基,25℃、130 r/min振荡培...     

臭氧水消毒土壤与木霉菌组合防治白菜根肿病的效果

为推动白菜根肿病绿色防控,开展臭氧水消毒土壤与木霉菌组合防治白菜根肿病研究.通过温室盆栽试验,比较了不同浓度臭氧水对土壤中芸苔根肿菌的消减效果及其与木霉菌组合处理对根肿病的防效和对白菜生长的影响.结果表明:臭氧水可显著降低土壤中芸苔根肿菌的丰度,消减效果与浓度正相关,8 mg/L的臭氧水可将病土中含量为105-109c...     

木霉菌抗药性研究进展

本文概述了木霉的生防作用,筛选抗药木霉的重要性,重点介绍了木霉抗药机理及获得抗药性木霉菌的方法,最后对木霉抗药性研究进行了展望。     

棉籽蛋白和玉米浆水解氨基酸组成的测定

氨基酸在医药、食品、饲料等领域有着极为重要和广泛的用途^[1]。合理利用蛋白质资源值得我们广泛地研究与探讨。棉籽中蛋白含量高达50％,玉米浆中蛋白质和氨基酸含量也较高,均为氨基酸的重要来源。本研究通过酸解,对棉籽蛋白和玉米浆中的蛋白进行彻底水解,分析氨基酸成分的种类与含量,为饲料、发酵、肥料等方面充分利用开发这2种原料提供依据。     

芽孢杆菌SH6-1的分离鉴定及其生物活性测定

菌株SH6-1分离自山东省寿光大棚黄瓜根际土中,经16S rDNA序列分析及常规生理生化测定,将其鉴定为巨大芽孢杆菌。菌株SH6-1具有较好的固氮、解磷、解钾能力,培养5d后发酵上清液的含氮量为3.573μg/mL,KCl含量为9.139μg/mL,培养2d后发酵上清液的P2O5含量为2932.5μg/mL。在温室条件下,菌株SH6-1对小麦株高及鲜重增加率分别为8.8%、33.8%,对番茄株高及鲜重增加率分别为12.2%、15.4%,对小麦纹枯病和番茄立枯病的防治效果分别达到了57.8%、61.7%。     

NaCl胁迫对澳洲牧草种子的萌发试验

对牧草的耐盐性进行早期鉴定,可为筛选具有较高耐盐性的牧草提供科学依据,从而为盐碱地的开发利用奠定理论基础。试验分别用0、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、1.0%、1.2%和1.5%的NaC1溶液处理从澳大利亚引进的波斯三叶草(Trifolium resupinatum L.)、草莓三叶草(Trifolium fragiferum L.)、大花三叶草(Trifolium michelianum L.)、白三叶草(Trioflium repens L.)、冠状岩黄芪(Hedyscrum corohariumHand-Mazz.)、滨藜(Atriplex nummularia L.)、禾草长穗偃麦草[Thinopyrum ponticum(Podp.)LiuWang.]、菊苣(Cichorium intybus L.)、紫花苜蓿(Medicago sativa L.)、蜗牛苜蓿[Medicago scutellata(L.)Mill]等10种牧草的种子,测定盐分对其种子的发芽率、发芽指数、活力指数和相对盐害率的影响。结果表明,随着NaCl溶液浓度的增大,对牧草种子萌发的抑制作用加强;但不同牧草的种子萌发受NaCl胁迫的程度不同。试验筛选出滨藜、禾草长穗偃麦草、菊苣和紫花苜蓿4种具有较高耐盐性的牧草。     

利用玉米秸秆培养木霉菌分生孢子的研究

为了研究利用资源丰富的玉米秸秆作为发酵基质生产木霉分生孢子的可行性,本文研究了秸秆基质细度、含水量、外加营养成分及搅拌等因素对木霉分生孢子产孢量的影响。结果表明,细度适中,在40~10目之间,含水量60%~70%,利于木霉产孢,分生孢子产量可达1.27×1010 cfu/g(干培养物);接种量对最终产孢量影响不大,处理间差异不明显;通过添加碳源葡萄糖,并加入少量(NH4)2SO4、CaCO3、KH2PO4和MgSO4无机盐,可显著提高木霉分生孢子的产量,分生孢子产量最高可达2.0×1010 cfu/g(干培养物);但在固体培养过程中,对基质进行搅拌,不利于木霉分生孢子的形成。由此表明,利用玉米秸秆固体发酵生产木霉分生孢子可行、高效、无污染,对于木霉菌剂的生产和推广具有重要的参考价值。     

泰安樱桃根癌病致病菌分离及生物型鉴定

由致病性土壤杆菌侵染引起的根癌病严重影响了樱桃树的生长?利用选择性培养基, 以阿糖醇和赤藓糖醇作为不同碳源, 从山东泰安食用樱桃根部瘤状组织和感病根际土壤中分离到土壤杆菌100余株, 通过胡萝卜切片法和番茄茎部针刺接种法从中筛选到31株有致瘤活性的菌株?经16S rDNA和recA基因序列分析, 结合生物型检测鉴定出96%以上的致病菌属原生物Ⅱ型(Agrobacterium rhizogenes), 只有1株致病菌为原生物Ⅰ型(A. tumefaciens)?根据Ti质粒上致病相关基因保守序列设计3对引物, 12株有致瘤活性菌株中11株PCR扩增到目的条带?经分子生物学测定和高压纸电泳检测, 所有致病菌株的质粒均为胭脂碱型?建立了致病型土壤杆菌的分子生物学快速鉴定方法, 为定向选择生防菌株提供基础?