大肠杆菌粗制溶菌物对鸡的慢性致病作用

从鸡大肠埃希氏菌制备出含内毒素的粗制溶菌物。将此溶菌物给几群肉用仔鸡从１７日龄到２５周龄期间每周１次静脉注射，临床表现和病理变化表明，大肠杆菌溶菌物对鸡的生长和产蛋性能的影响基小（ｐ〈０．０５）。重要病变见于肝，主要为局灶性淀粉样变和血停滞，其它器官的病变以局部血液循环障碍为特征。     

肠道无菌鸡实验性白痢病

在保持恒定温、湿度的无菌隔离器内，用鸡伤寒－白痢沙门氏菌标准株Ｃ＿（７９－１３）实验感染肠道无菌鸡４８羽，常规鸡１２羽作为对照，观察雏鸡感染后的病变及细菌回收。结果表明：出壳２４ｈ内感染的雏鸡，其存活时间与环境因子和染菌剂量有关，在相同的条件下，常规鸡比肠道无菌鸡的存活时间显著延长（ｐ＜（０．０５）；肠道无菌鸡取败血症经过时，其胃肠道病变比较特殊，肝、肺亦有特征病变；从各组织、器官中均能回收到本菌的纯培养。实验证明，雏鸡肠道正常菌群在防御肠道病原菌定植上有重要作用。     

鸡法氏囊病野毒的分离,细胞毒的培养及鉴定

从发生法氏囊病（ＩＢＤ）的免疫肉鸡群的法氏囊病料中分离到１株病毒。该病毒致使非免疫鸡胚病变、死亡和鸡胚成纤维细胞病变。将其５代内细胞培养毒回归非免疫鸡胚和适龄鸡，复制出类似于野毒引起的鸡胚病变和典型ＩＢＤ病例，鸡的死亡率为１／３￣２／３。其５代细胞毒的灭活制剂，使非免疫鸡在接种后２１天或３２天１００％出现ＩＢＤ琼扩阳性。     

经处理的工业废水对鲢鳙鱼非特异性免疫的影响

本实验以鲢鳙鱼为材料,选用污水排放站的污水为污染源,经厌氧发酵后,以不同浓度对鱼体浸泡处理,通过对鱼体免疫器官重量变化,溶菌物溶菌活性及吞噬细胞吞噬功能等非特异性免疫指标进行测定,结果表明：１．通过对免疫器官重量变化的测定可见：随污水浓度的增加,免疫器官重量越来越小;２．通过对溶菌物质测定可见：随污水浓度的增加,对粘液和血清的影响愈大;３．通过对白细胞吞噬能力的测定可见：随污水浓度的增加,白细胞吞噬能力呈下降趋势。     

鸡波氏杆菌的毒力试验

本文介绍了鸡波氏杆菌对鸡胚、雏鸡、小白鼠、幼兔的毒力试验。结果表明，鸡波氏杆菌可致鸡胚、雏鸡、幼兔、小白鼠发病、病程为急性经过，呈出血性败血症病变，从病程和病变可看出，鸡胚、幼雏、家兔的日龄与抵抗力成正相关、1月龄以上的鸡有较强抵抗力，呈隐性带菌，通过成年兔，豚鼠的汞氏皮内反应表明鸡波氏 力可产生毒性很强的坏死毒素。     

腺胃病变型鸡传染性支气管炎毒株H95的研究

从某疫区的鸡腺胃病鸡群中分离到Ｈ９０毒株，在ＳＰＦ鸡胚稳定传至１５代，具有规律性死亡和典型胚胎病变特征，ＥＩＤ５０＝５×１０＾－５．５／ｍｌ。。用病料和鸡胚尿囊液毒分别感染试验鸡，均引起与自然病例相同的典型病理变化。病粒和Ｈ９５鸡胚尿囊毒提纯的病毒液经负染后电镜观察，均具有典型冠状病毒形态。     

艾美耳球虫弱毒虫株的返祖性

将柔嫩艾美耳球虫鸡胚及药物适应株（Ｐ２５、Ｐ３０）和巨型艾美耳球虫早熟选育株（Ｐ２２、Ｐ２８），分别连续回鸡６代，测定试验鸡的肠道病变及肠道内容物的卵囊密度。结果显示，试验鸡的肠道平均病变程度（１．０以下）明显低于对照组，而肠道内容物的卵囊密度则基本相似，表明弱毒虫株无返祖现象。     

减蛋综合征AQ毒株的分离与鉴定

通过鸭胚接种，从发生产蛋下降、产畸形蛋的鸡群中分离到一株病毒ＡＱ毒株。该病毒能在鸭胚和鸭胚成纤维细胞上生长，并能引起明显的胚体病变和细胞病变，对鸡红细胞的凝集作用能被ＥＤＳ７６标准阳性血清所抑制；病毒对氯仿不敏感、耐酸（ｐＨ３．０）、对热（５０℃３０ｍｉｎ）稳定，核酸型为ＤＮＡ，电镜观察见直径约７０～７５ｎｍ的圆形病毒颗粒。初步鉴定ＡＱ株是鸡减蛋综合征病毒。     

鸡传染性支气管炎病毒变异株DB4的分离鉴定

从东北养鸡场分离到DB4鸡传染性支气管炎病毒毒株,对其进行了动物回归、生物学特性、电镜观察与S1基因的序列分析等研究。结果表明：DB4能够凝集鸡的红细胞,形态为典型的冠状病毒粒子,鸡胚半数感染量为10^-6.7 EID50,动物回归感染死亡鸡肾脏病变明显,表现肾脏肿大、花斑肾,DB4毒株S1基因由1620个核苷酸组成,推导的多肽由540个氨基酸残基组成,氨基酸切割识别位点序列为HRRRR,序列分析发现：DB4与国内疫苗株YM_W93和标准株M41氨基酸同源性分别为77．2％和77．3％,确定该分离毒株为致肾脏病变的变异型IBV。     

鸽新城疫病毒的分离鉴定

用SPF鸡胚从疑似鸽新域疫病鸽群中分离到1株病毒，该病毒株能凝集鸡红细胞，这种凝集作用能被抗新域疫病毒阳性血清抑制。血凝素热稳定指数为1min，具有快速血凝素的解脱率，病毒对氯仿、乙醚、胰蛋白酶、盐酸(pH5.0)敏感，0.1％甲醛溶液能完全灭活病毒。分离株经肌肉注射能使鸽发病和死亡，出现与自然发病鸽一致的症状和病变。对该分离株作进一步生物学特性鉴定，鸡胚平均死亡时间(MDT)为74．6h，1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)为1．53。结果表明本分离株为强毒型鸽新域疫病毒。     

E-coli整合酶检测方法研究

通过检测整合酶确定多重耐药大肠杆菌是否含有整合子。试验采用梯度PCR方法确定扩增整合酶最佳温度,以该温度扩增247株菌整合酶,并对PCR产物鉴定测序,确定整合酶类型。结果表明,247株菌中有158株菌扩增出了Ⅰ型整合酶,13株菌扩增出了Ⅱ型整合酶,总共有171株菌扩增出了整合酶基因。表明可通过PCR扩增整合酶的方法监测多重耐药大肠杆菌携带整合子的情况。     

新疆塔城地区不同来源大肠杆菌的耐药性调查

掌握新疆塔城地区不同来源大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药情况,可以为今后塔城地区建立细菌耐药数据库提供信息。采集新疆塔城地区某养殖场饮用水样（12份）、饲料样（49份）、牛粪样（56份）和养殖户家羊粪样（20份）,分离大肠杆菌。采用琼脂稀释法对分离的大肠杆菌进行耐药性检测,通过卡方检验比较不同来源大肠杆菌耐药性的差异。结果表明：饮用水源菌对恩诺沙星、环丙沙星、阿莫西林/克拉维酸和氨苄西林耐药率达100%;饲料源菌对阿莫西林/克拉维酸和氨苄西林的耐药率分别为61.2%和51.0%;牛源菌对阿莫西林/克拉维酸和环丙沙星的耐药率均为14.3%;羊源菌对阿莫西林/克拉维酸和环丙沙星的耐药率分别为40.0%和35.0%。饮水源大肠杆菌对恩诺沙星、环丙沙星、阿莫西林/克拉维酸和氨苄西林的耐药率显著高于牛源菌、羊源菌和饲料源菌（P<0.05）。此外,不同来源大肠杆菌对头孢噻呋、阿米卡星、庆大霉素、安普霉素和氟苯尼考均敏感。多药耐药结果显示：饲料源菌以0耐（38.8%）和4耐（38.8%）为主;牛源菌以0耐（786%）为主;羊源菌以0耐（50.0%）为主;饮水源菌以4耐（100%）为主。上述结果表明不同来源大肠杆菌对被检抗菌药物的耐药情况差异显著,共性之处为不同来源大肠杆菌对被检药物的中介率均较高,暗示如不改变用药方案,近期耐药菌株数有迅速增长的风险。     

超高压对大肠杆菌细胞膜流动性的影响

 【目的】对超高压作用后大肠杆菌细胞膜的荧光偏振度和微黏度的影响进行研究,探讨超高压对大肠杆菌细胞膜流动性的影响。【方法】以1,6-二苯基-1,3,5,-己三烯（DPH）为荧光探针标记大肠杆菌细胞膜,用荧光偏技术测定大肠杆菌细胞膜经超高压作用后荧光偏振度和微黏度的变化。【结果】建立了用DPH标记和荧光偏振法测定大肠杆菌细胞膜流动性条件;不同的处理压力和时间对大肠杆菌细胞膜的荧光偏振度和微黏度的影响不同,350～400 MPa作用15～40 min,细胞膜荧光偏振度及微黏度达到稳定水平,350 MPa作用15 min已经使细胞膜流动性显著降低(P<0.05)。【结论】随着压力的增大和保压时间的延长,大肠杆菌细胞膜荧光偏振度及微黏度增大,流动性降低,大肠杆菌死亡数增加。当压力和保压时间增加到一定程度(350 MPa, 15 min),荧光偏振度及微黏度达到相对稳定状态,大肠杆菌几乎全部死亡,说明在超高压的作用下大肠杆菌细胞膜荧光偏振度和微黏度的变化与死亡相关性好(P＜0.05),这为超高压灭活大肠杆菌提供了理论证据。     

遵义市规模养猪场大肠杆菌的耐药性检测

[目的]掌握遵义市规模养猪场大肠杆菌的耐药情况,为贵州省动物源性细菌监测提供数据。[方法]采集遵义市规模养猪场猪肛门拭子和总排污池新鲜粪便(或污水棉拭子)样品335份,分离出阳性大肠杆菌。采用微量肉汤稀释法对分离的大肠杆菌进行耐药性检测。[结果]分离并鉴定到334株阳性大肠杆菌,分离的大肠杆菌对7种抗菌药物的耐药率依次为:磺胺间甲氧嘧啶钠土霉素恩诺沙星头孢噻呋氟苯尼考环丙沙星庆大霉素,多重耐药性主要集中在4耐、5耐、6耐和7耐。[结论]遵义市规模养猪场大肠杆菌的耐药性严重及多重耐药性正在恶化,且猪场总排污池大肠杆菌对各药物的耐药性皆高于猪肛门拭子。     

大肠杆菌内毒素多克隆抗体的制备与纯化

为制备大肠杆菌内毒素多克隆抗体,应用大肠杆菌内毒素作为抗原免疫5周龄家兔,辛酸-硫酸铵法和葡聚糖凝胶层析法分离提纯抗血清,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳方法鉴定多抗纯度,紫外分光光度计测定抗体蛋白含量,ELISA法检测抗血清效价与交叉反应;大肠杆菌内毒素抗体含量和效价分别为6.95mg/ml和1:12800;成功制备出抗大肠杆菌内毒素多克隆抗体,为大肠杆菌内毒素病诊断试剂盒的研制奠定基础。     

大肠杆菌诱导对肉鸡白细胞粗提物抗菌活性的影响

为研究异物刺激对肉鸡机体抗菌物质活性的影响。测定了大肠杆菌诱导后肉鸡白细胞粗提物活性变化,分别对大肠杆菌诱导前和诱导后的健康肉鸡进行采血,血液红细胞溶胀、离心后,各取含1×107个白细胞的溶液经超声波破碎,10%(V/V)乙酸浸提、旋转蒸发,获得白细胞粗提物,采用微量琼脂扩散法测定粗提物的抗菌活性。结果表明,所得到的白细胞粗提物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均表现抑制作用,诱导后的粗提物比诱导前具有更强的抗菌活性。大肠杆菌诱导增强了肉鸡白细胞粗提物的抗菌活性。     

头孢喹诺与恩诺沙星对鸡大肠杆菌的联合药敏试验

为研究头孢类药物和氟喹诺酮类药物在治疗鸡大肠杆菌的相互作用,本试验采用肉汤稀释棋盘法,用头孢喹诺和恩诺沙星对鸡大肠杆菌标准株和临床分离株进行了联合药敏试验。结果表明,两药联用对鸡大肠杆菌标准菌株FIC指数为0.5,呈现协同作用;对鸡大肠杆菌临床分离株FIC指数为0.75,呈现相加作用。     

致鸡肝炎大肠杆菌与鸡舍空气致病性大肠杆菌生物学特性比较分析

研究了河北某地区致鸡肝炎大肠杆菌(Escherichia coli)和鸡舍空气致病性大肠杆菌的血清型和耐药性差异。根据细菌分离培养特性、形态学、生化试验、动物试验及玻板凝集试验结果,从病鸡肝脏中分离出了致病性大肠杆菌38株,其O型优势血清型与同地区鸡舍空气分离出的大肠杆菌血清型相似。药敏试验结果显示,O型致鸡肝炎大肠杆菌与已分离出的同地区鸡舍空气致病性大肠杆菌的耐药特征也具有相似性。这说明致鸡肝炎大肠杆菌与同地区鸡舍空气致病性大肠杆菌的某些生物学特性是相同的,大肠杆菌引起的鸡肝炎病与存在于空气中的致病性大肠杆菌有一定的关系。     

微生物发酵床对猪舍大肠杆菌病原生物防治作用的研究

 【目的】通过调查微生物发酵床养猪基质垫层大肠杆菌及其毒素基因的数量分布变化动态,分析微生物发酵床对猪舍大肠杆菌的生物防治作用。【方法】分离不同使用时间、不同层次基质垫层的大肠杆菌,利用PCR特异性扩增UdiA基因来鉴定、检测大肠杆菌,并对大肠杆菌12种毒素基因进行多重PCR检测。构建大肠杆菌种群分布的动态模型,分析微生物发酵床对大肠杆菌病原的生防效果。【结果】从不同使用时间不同层次基质垫层分离鉴定出大肠杆菌419株,并从这些菌株中检测出59株携带毒素基因,毒素基因类型为8种。其中1个月基质垫层的毒素基因阳性检出率最高,为22.47%,其次是7个月基质垫料,为16.5%,最低的是9个月基质垫料,为4.23%。大肠杆菌在微生物发酵床基质垫层种群数量时间变化规律为：随着使用时间的增加种群数量逐步减少;种群数量空间变化规律为：表层（第1层0—10 cm） 和底层（第4层60—70 cm）分布量最大,第2层（20—30 cm）分布量最少。大肠杆菌毒素基因的分布规律与之类似。从构建的大肠杆菌种群分布动态模型可以看出,基质垫层第1层（y=169.67x-1.0137）和第3层（y=313.11x-2.1885）大肠杆菌种群数量随使用时间呈指数线性方程分布;第2层（y=0.1006x3-2.3733x2+16.094x-22.454）和第4层（y=0.3159 x3+6.0913x2-35.634x+79.513）大肠杆菌种群数量随使用时间呈一元三次方程分布,基质垫层能明显抑制大肠杆菌的生长。基质垫层使用后期（第9个月）比使用初期（第1个月）大肠杆菌种群数量明显减少,降低幅度在67.45%—96.53%,说明微生物发酵床对猪舍大肠杆菌能起到显著的生物防治作用。【结论】微生物发酵床能抑制大肠杆菌特别是携带毒素基因大肠杆菌的生长,且对大肠杆菌的生防效果随使用时间的延长而增加。     

氧化锌纳米颗粒对大肠杆菌的毒性效应及机制

以大肠杆菌为研究对象,通过检测纳米氧化锌暴露下大肠杆菌的生长、胞内活性氧簇(ROS)水平以及酶活性的变化,研究了纳米氧化锌对大肠杆菌的毒性效应以及可能的毒性机制。结果表明,纳米氧化锌能够抑制大肠杆菌的细胞生长;纳米氧化锌浓度越高,对大肠杆菌的抑制作用越大,其半效应浓度(EC50)为251 mg/L。在纳米氧化锌暴露下的大肠杆菌的细胞中ROS随着暴露时间的增加而升高,而细胞内过氧化氢酶(CAT)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)均显著升高。这说明氧化损伤是纳米氧化锌的重要毒性机制,同时大肠杆菌能够通过提高酶活性对纳米ZnO暴露做出应激的反应以减轻其对细胞造成的伤害。