纳米技术在生物医学中的研究进展

20世纪80年代开始研究的纳米技术在90年代获得了突破性进展，它给许多行业带来巨大变化，它对生物医学的渗透与影响是显而易见的。利用纳米技术可将生物降解性和生物相容性的聚合物与药物一起制成纳米药物，作为靶向药物制剂，直接导入病灶部位的器官、组织甚至细胞，达到提高药物疗效，降低毒性的作用；将纳米材料作为药物载体，可增加某些药物的胃肠吸收，提高其生物利用度；将纳米材料作为载体，可用于基因的输送和治疗。文章就纳米技术在生物医学中的研究进展做一综述。     

鸡传染性支气管炎病毒变异株DB4的分离鉴定

从东北养鸡场分离到DB4鸡传染性支气管炎病毒毒株,对其进行了动物回归、生物学特性、电镜观察与S1基因的序列分析等研究。结果表明：DB4能够凝集鸡的红细胞,形态为典型的冠状病毒粒子,鸡胚半数感染量为10^-6.7 EID50,动物回归感染死亡鸡肾脏病变明显,表现肾脏肿大、花斑肾,DB4毒株S1基因由1620个核苷酸组成,推导的多肽由540个氨基酸残基组成,氨基酸切割识别位点序列为HRRRR,序列分析发现：DB4与国内疫苗株YM_W93和标准株M41氨基酸同源性分别为77．2％和77．3％,确定该分离毒株为致肾脏病变的变异型IBV。     

伪狂犬病毒重组gG抗原片段的原核表达及其间接酶联免疫吸附测定方法的建立

[目的]建立方便可行的伪狂犬病毒血清抗体的酶联免疫吸附测定方法,并可特异性鉴别伪狂犬病毒TK-/gG基因缺失疫苗免疫株和野毒株.[方法]利用原核表达系统表达伪狂犬病毒gG抗原片段,蛋白纯化后包被,优化反应条件,建立一种用于检测伪狂犬病毒gG抗体的间接酶联免疫吸附测定方法.[结果]通过不同血清样品的检测试验,该酶联免疫吸附测定方法可以鉴别伪狂犬病毒TK-/gG-基因缺失疫苗免疫猪和感染野毒的血清学阳性猪.[结论]成功建立了检测伪狂犬病毒gG抗体的酶联免疫吸附测定方法,并可特异鉴别伪狂犬病毒TK-/gG-基因缺失疫苗免疫株和野毒株,此方法敏感性强,特异性高,操作简便,适合于临床大量检测.     

粪肠球菌产伏尔加霉素E5的生物学特性研究

为了确定分离自健康猪胃肠道粪肠球菌产生的细菌素伏尔加霉素E5(enterocin E5)的生物学特性,本研究检测了该细菌素对热、酸碱、酶类的耐受性及其抗菌谱,enterocin E5经过121℃高压处理10min对指示菌抑菌活性没有影响;细菌素于pH 2～12作用后,对大肠埃希菌仍有抑菌活性,最强的pH抑菌活性范围为pH 4～6;enterocin E5对胰蛋白酶和蛋白酶K处理敏感,过氧化氢酶、脂肪酶和淀粉酶对其抑菌活性没有影响;enterocin E5对21株动物源病原微生物具有抑制作用,革兰阴性病原菌包括大肠埃希菌、鸡白痢沙门菌、鸡伤寒沙门菌、多杀性巴氏杆菌等,特别对产生多重抗药性的3株鸡伤寒沙门菌具有明显的抑菌活性。抑制革兰阳性金黄色葡萄球菌、马腺疫链球菌、猪链球菌,对炭疽芽胞杆菌弱毒株和蜡样芽胞杆菌产生显著的抑菌活性。结果表明,enterocin E5对酸碱是比较稳定的,具有很宽泛的pH耐受范围,属于热稳定IIa亚型细菌素,能够作为一种抗菌物质防控动物源细菌病。     

减少恐慌,密切关注病毒变异动向

禽/人/猪流感都是由A型流感病毒引起的高度传染性的疾病。人流感对于人主要是呼吸系统的感染,而禽流感对于禽则是全身各个系统的感染,可导致禽的快速死亡。禽流感最早发生于1878年的意大利,人流感和猪流感的首次流行则是在1918年,人类流感在世界范围内多次大流行,几乎每次流行都和动物流     

鸡传染性支气管炎病毒BD01株S1基因的特性分析

用RT-PCR扩增了鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DB01株S1基因,获得了约1.7 kb的基因序列,利用DNAMan软件对DB01株S1基因的核苷酸和氨基酸序列与标准疫苗株H120、H52和M41进行比较.结果表明,其同源性均低于80%,亲缘关系比较远.在DB01的S1蛋白氨基酸序列上出现了5个新的糖基化位点,1个糖基化位点丢失,其中有3个变异位点在抗原表位上.亲水性也发生了较大变化.     

猪源降胆固醇肠球菌的分离鉴定

为了筛选益生菌并评价其对血清胆固醇的降解作用,从健康猪胃肠道分离鉴定12株肠球菌,进行体外降胆固醇,对酸和胆盐的耐受性试验,结果表明：分离菌均具有体外降解血清胆固醇的作用,降解率为16．67～48．00％,对pH3．0和0．4％的胆盐具有抵抗力,综合评价E1和E7可以作为降胆固醇的备选益生菌株。     

乙型脑炎病毒非结构蛋白的表达及与hnRNP K的相互作用

【目的】为探明JEV病毒复制与宿主蛋白的关系。【方法】首先构建非结构蛋白质粒,然后将构建成功的非结构蛋白的质粒转染至Vero细胞中,24 h在荧光显微镜下观察蛋白表达情况,再分别与pCMV-MYC-hnRNP K质粒同时转染至Vero细胞中,培养24 h,收取细胞蛋白样,进行Co-IP试验相关步骤,用Western-blot实验进行结果呈现,得出试验结果。【结果】构建的非结构蛋白质粒在Vero细胞中可以表达,通过与表达hnRNP K蛋白的质粒共转染,通过Co-IP试验经Western-blot结果分析能够得出JEV的NS1与hnRNP K之间存在相互作用,JEV的NS2a、NS3、NS5与宿主hnRNP K之间不存在相互作用。【结论】JEV的NS1蛋白与宿主蛋白hnRNP K存在相互作用,为JEV非结构蛋白的研究进一步拓宽了思路,同时为JEV病毒在宿主细胞中的生命活动周期的研究提供了基础,为深入研究JEV病毒复制提供了新方向。     

变异型PEDV北京分离株ELISA检测法的建立

[目的]为基层养殖场的批量样本检测以及猪流行性腹泻病(PED)的快速诊断提供更为有效的方法.[方法]利用原核表达系统表达了猪流行性腹泻病毒(PEDV) S1部分基因序列,建立用于检测变异型PEDV北京分离株的间接酶联免疫吸附测定方法.[结果]经试验检测表明,该ELISA检测方法敏感性较高、重复性良好、特异性显著、有良好的稳定性和较长的保存期,且临床样本检测与市场上试剂盒比较符合率较高.[结论]此方法可以作为临床免疫检测变异株PEDV的方法,为PEDV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗的开发提供了依据.     

柔嫩艾美耳球虫田间分离株药物耐药性调查

作者采集了5个不同地区发生球虫病鸡场的粪便,分离柔嫩艾美耳球虫不同地理株,为了检测它们对药物敏感性,选择常用的预防球虫病药物马杜拉霉素、莫能菌素、地克珠利,以ACI作为指标,进行了的药物敏感试验。结果表明,北京-1、潍坊和上海株对饲料中添加5 mg/kg马杜拉霉素产生了部分耐药性,而北京-2和北京-3两个虫株对其则敏感;北京-1、北京-2和潍坊株对100 mg/kg莫能菌素部分耐药,上海株完全耐药,而北京-3株对其敏感;北京-1、北京-2、潍坊株和上海株对1.0 mg/L地克珠利产生了部分耐药性,而北京-3株对它敏感。