大肠埃希菌Ⅰ类整合子与多重耐药的相关性分析

采用从粪便中分离并鉴定出的40株鸡源大肠埃希氏菌,用K-B法测定大肠杆菌多重耐药性,通过PCR法扩增Ⅰ类整合子,电泳检测扩增产物。结果表明,40株大肠杆菌对10类18种抗菌药物的耐药率,最高为S,C,SMX,SXT 100%,最低为PB,CTX 0%,多重耐药率(耐3种以上药物)为100%。Ⅰ类整合子阳性菌株35株,阳性率87.5%。Ⅰ类整合子对大肠杆菌多重耐药性的产生和传播起着重要作用,应加强基因水平耐药监测。     

磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及特性鉴定

采用重氮化法合成磺胺二甲嘧啶(SM_2)-人血清白蛋白(HSA)免疫抗原和SM_2~-卵清白蛋白(OVA)包被抗原。经紫外光谱扫描法确认SM_2与载体蛋白偶联成功；经计算SM_2与HSA、OVA的结合比分别为9：1和15：1。利用杂交瘤技术和有限稀释法经过5次亚克隆,得到三株特异性稳定分泌SM_2抗体的杂交瘤细胞,经鉴定该单克隆抗体免疫球蛋白亚类为IgG_1,为入链,分子量为162Ku,染色体数目90条左右,亲和常数为6．1×10~(12)M~(-1)。与其他四种磺胺药和两种载体蛋白HSA、OVA均无交叉反应。     

磺胺二甲基嘧啶残留检测ELISA方法的研究

本实验对磺胺二甲嘧啶残留检测ELISA反应的各种条件进行了筛选优化,建立了直接竞争ELISA检测方法,该法最小检出量为1.97ng/mL,检测范围5ng/mL～200ng/mL,样品添加回收率为73.20%～91.16%,批内变异系数<5.5%,批间变异系数<9%。与美国进口Max Signal试剂盒相比较,灵敏度为100%,特异性为96.0%,两者的符合率为98.3%。     

E-coli整合酶检测方法研究

通过检测整合酶确定多重耐药大肠杆菌是否含有整合子。试验采用梯度PCR方法确定扩增整合酶最佳温度,以该温度扩增247株菌整合酶,并对PCR产物鉴定测序,确定整合酶类型。结果表明,247株菌中有158株菌扩增出了Ⅰ型整合酶,13株菌扩增出了Ⅱ型整合酶,总共有171株菌扩增出了整合酶基因。表明可通过PCR扩增整合酶的方法监测多重耐药大肠杆菌携带整合子的情况。     

单诺沙星脂质体对人工感染鸡毒支原体鸡治疗试验

单诺沙星脂质体是用于治疗鸡毒支原体病的肺靶向长效制剂。本试验通过滴鼻、点眼及气囊注射方式对10日龄健康海兰蛋雏鸡进行人工感染鸡毒支原体,采用随机分组法分成6组,即脂质体高、中、低剂量组;原粉对照组;感染对照组(感染不给药)和健康对照组(不感染不给药),每组40只。采用混饮给药方式对发病鸡进行治疗试验。结果表明,当饮水中药物浓度为100、50、25 mg/L时,连用5 d,对感染鸡有明显疗效。与感染对照组比较,单诺沙星脂质体可显著降低感染鸡群的血清抗体反应阳性率,减轻气囊损伤程度,并提高治愈率、有效率及增重率(P0.01);其中100、50 mg/L剂量组治愈率(分别为85.7%,82.1%)与原粉对照组(65.0%)比较,差异显著(P0.05),临床推荐按50 mg/L剂量混饮给药,连用5 d。     

抗仔猪腹泻中药口服液的质量标准研究

采用薄层色谱法对抗仔猪腹泻口服液中的黄连、黄芩、甘草药材进行定性鉴别,并应用高效液相色谱法对其中成分盐酸小蘖碱进行含量测定。结果显示,薄层色谱法均能对黄连、黄芩、甘草进行定性分析;盐酸小檗碱进样浓度在0.0032～0.016mg.mL-1范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.2%(n=5),RSD为0.9%。结果表明,本试验所建立的方法准确、重现性好,可作为抗仔猪腹泻中药口服液的质量控制方法。     

常/见/病/原/菌/耐/药/机/制/的/分/类

常见病原菌耐药性的传播，使许多常规抗生素在治疗相关性疾病时失效，常引发人们过量用药的错误治疗行为，加重了病原菌耐药性的传播，对人们的健康构成了严重的威胁，为了提高对常见病原菌耐药机制的了解，本文将常见病原菌耐药机制分类，为临床上更好地发挥抗生素的疗效提供依据。     

基因盒-整合子系统介导的细菌多重耐药性

细菌多重耐药性的传播和扩散变得越来越严重，给临床治疗带来诸多困难，使得抗菌药物在兽医临床上的应用引起很大的争议。细菌可通过多种方式逃避抗菌药物的治疗，最主要的是从外源获得耐药基因，基因盒-整合子系统是近年来的研究热点，细菌通过整合子系统捕获外来的耐药基因，并在位于整合子上游的启动子的作用下得到表达，使细菌具有耐药及多重耐药性。本文主要对基因盒-整合子系统的耐药机制进行探讨。     

人工抗原的合成及单克隆抗体的纯化

制备单克隆抗体，建立优化ELISA方法检测兽药残留过程中，人工抗原的合成是较重要的步骤。对人工抗原合成时半抗原和载体的选择，化学反应的类型及应注意的事项进行了阐述，以期促进兽药残留分析的发展。