猪潜巴结内嗜伊红性颗粒细胞的几种酶电镜细胞化学研究

报道了猪淋巴结内一种特殊的嗜伊红性颗粒细胞（暂定名）的超微结构和几种酶的电镜细胞化学特征，该细胞主要分于猪淋巴结的髓质和皮质－髓质交界区，呈圆形或椭圆形，核也呈圆形或椭圆形，细胞质中含有较多特殊颗粒，其它类型的细胞器较少，特殊颗粒有单层膜包裹，内容物电子致密度高，Ｍｇ＾２＾＋－腺苷三磷酸酶（Ｍｇ＾２＾＋－ＡＴＰａｓｅ），酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ），非特异性脂酶（ＮＳＥ），５’－ＡＭＰａｓｅ）细胞化     

渗透胁迫下小麦根质膜Ca^2＋—ATPase活性及动力学

在渗透势为－０．５和１．０ＭＰａ的ＰＥＧ溶液胁迫下，小麦抗旱品种陕合６号根质膜（ＰＭ）Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性分别增加５９％和２５％，水分敏感品种郑引１号该酶活性是先略降５％而后增加４３％。８ｍｍｏｌ／ＬＥＧＴＡ能明显抑制ＰＭＣａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性，陕合６号抑制率为４３－７７％，郑引１号为４６－５６％，其中两品种在ＰＥＧ胁迫以后，ＥＧＴＡ的抑制剂减小。经对Ｃａ＾２＋－ＡＴＰdisplay status     

渗透胁迫下小麦根质膜Ca2+-ATPase活性及动力学

在渗透势为－０．５和－１．０ＭＰａ的ＰＥＧ溶液胁迫下，小麦抗旱品种陕合６号根质膜（ＰＭ）Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性分别增加５９％和２５％，水分敏感品种郑引１号该酶活性是先略降５％而后增加４３％。８ｍｍｏｌ／ＬＥＧＴＡ能明显抑制ＰＭＣａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性，陕合６号抑制率为４３％～７７％，郑引１号为４６％～５６％，其中两品种在ＰＥＧ胁迫以后，ＥＧＴＡ的抑制率减小。经对Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ的动力学分析表明：随着胁迫强度的增加，陕合６号Ｋｍ值分别下降４６％和２２％，Ｖｍａｘ虽略有增加，但变化不大。郑引１号Ｋｍ值分别下降７５％和８２％，Ｖｍａｘ约降低到对照的１／３．     

盐胁迫下大麦叶片的活性氧伤害与液泡膜H^＋—ATPase活性的关系

盐胁迫下大麦叶片中Ｋ＾＋含量下降,Ｎａ＾＋含量上升,Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋比下降,叶绿素含量下降,超氧阴离子和过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）含量上升,液泡膜Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性下降。叶绿素含量下降与丙二醛（ＭＤＡ）,Ｈ２Ｏ２,Ｏ＾－２含量及电导率的上升呈极显著负相关,液泡膜Ｈ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性下降与Ｈ２Ｏ２,Ｏ＾－２含量的上升亦呈极显著负相关。     

冰冻对菠菜离体线粒体膜功能性蛋白质的影响

以菠菜离体线粒体为材料，研究其膜结合的功能性蛋白质磷酸运转器、Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和酸性磷酸酶对冰冻的反应，以及冰冻对线粒体蛋白质活性疏基含量的影响，结果表明：冰冻对线粒体的磷酸运转器起钝化作用，使其Ｋｍ值增大．冰冻促进线粒体酸性磷酸酶的解离，且无机盐或者无机盐加冰冻所产生的促进作用更为显著．冰冻降低Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ的活性，且快速解冻时酶活性的降低更加明显．冰冻还减少线粒体蛋白质活性巯基的含量．线粒体蛋白质活性巯基含量与其磷酸运转器和Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ二者的活性都呈正相关关系．低温锻炼能增强线粒体磷酸运转器和Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ对冰冻的适应能力，增加酸性磷酸酶与膜结合的稳定性．     

不同光质对小麦幼苗谷氨酸合成酶及钙调系统酶活性的影响

加钙培养的小麦黄化苗和绿苗,经过红光（Ｒ）、远药光（ＦＲ）处理有效地提高谷氨酸合成酶（ＧＯＧＡＴ）的活性。不同光质对麦苗硝态氮代谢关键酶活性的影响与细胞内钙调系统及其作用靶酶－Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｈ－ＡＴＰａｓｅ活性有密切的联系。Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｈ－ＡＴＰａｓｅ的作用能改变细胞内Ｈ、Ｃａ＾２＋的浓度,从而调节细胞的内环境,进而对植物的代谢过程起调节作用     

葡聚糖与蔗糖密度梯度离心制备膜微囊方法的比较

分别以不连续蔗糖［２２０／３６０／４５０（ｇ／Ｌ）］和葡聚糖（ｄｅｘｔｒａｎＴ７０）［６０／１２０（ｇ／Ｌ）］两种介质密度梯度，制备并比较了大麦幼根细胞质膜和液泡膜微囊。结果表明，两种介质梯度制备的质膜微囊纯度较高，无线粒体膜和液泡膜污染；液泡膜微囊虽基本上去除了线粒体膜，但均混有少量质膜碎片。用蔗糖梯度制备的质膜微囊较葡聚糖梯度制备的质膜微囊有较高的翻转比率；对液泡膜微囊，前者的原位比例也较后者略高。另外，液泡膜Ｈ＋－ＰＰａｓｅ活性测定反应体系中应加入钼酸钠抑制剂，反应终止液和显色液可与Ｈ＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ相同。因此，在制备质膜和液泡膜进行Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ或Ｈ＋－ＰＰａｓｅ生化特性的研究时，可用蔗糖代替葡聚糖。     

日本鲟肌动球蛋白热变性和冷冻变性

研究了日本鲟肌动球蛋白经变性和冷冻后ＡＴＰａｓｅ活性、总巯基数和不饱和巯基数及蛋白质浓度的变化。结果表明,热变性后肌动球蛋白Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性下降,且Ｃａ＾２＋－－ＡＴＰａｅｓ活性有明显转折。低温热变性对总巯基数影响较小,温度增高时,巯基数逐渐下降,而不饱和巯基数在３０℃之前,呈动态变化,之后又逐渐减少。热变性后,肌动球蛋白浓度也降低。冷冻变性后,肌动球蛋白ＡＴ     

日本鲟肌动球蛋白热变性和冷冻变性

研究了日本鲟肌动球蛋白经变性和冷冻后ＡＴＰａｓｅ活性、总巯基数和不饱和巯基数及蛋白质浓度的变化。结果表明,热变性后肌动球蛋白Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性下降,且Ｃａ＾２＋－－ＡＴＰａｅｓ活性有明显转折。低温热变性对总巯基数影响较小,温度增高时,巯基数逐渐下降,而不饱和巯基数在３０℃之前,呈动态变化,之后又逐渐减少。热变性后,肌动球蛋白浓度也降低。冷冻变性后,肌动球蛋白ＡＴ     

香蕉越冬期ATPase和保护酶的活性及膜脂过氧化

在越冬期，随着气温的降低香蕉叶片腺苷三磷酸酶（ＡＴＰａｓｅ）活性明显提高，３月份后气温上升，活性开始下降．越冬期间超氧物岐化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性呈下降趋势，膜脂过氧化产物ＭＤＡ含量呈上升趋势，其中台湾蕉ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ活性下降幅度比柴蕉大．ＡＴＰａｓｅ水解活性和ＭＤＡ含量明显高于柴蕉，经ＰＰ３３３处理的台湾蕉，ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ活性分别比对照提高６６．７７％、８６．４４％和２３７．７６％，ＡＴＰａｓｅ活性下降２４．１５％，ＭＤＡ含量下降２１．６７％，在一定程度上提高了香蕉的抗寒性     

油桐ACPase基因克隆及生物信息学分析

【目的】克隆油桐酸性磷酸酶(ACPase)基因的全长序列,为进一步分析油桐ACPase的功能奠定基础。【方法】根据油桐转录组酸性磷酸酶蛋白全长序列设计引物,利用RT-PCR从油桐种子中克隆ACPase基因,对其cDNA序列、核苷酸序列的相似性、理化性质、疏水性、跨膜结构、二级结构及三级结构进行分析预测,同时进行多序列比对并构建系统树。【结果】克隆获得油桐ACPase基因,其开放阅读框为1152 bp,编码383个氨基酸残基,相对分子质量为40.94 kDa,理论pI为5.30,属可溶性不稳定蛋白。同源性和进化树的预测分析结果显示,油桐ACPase与毛果杨的ACPase蛋白同源性达84%。油桐ACPase存在磷酸酶基因家族的保守区域,ACPase编码蛋白的大部分氨基酸属于亲水性氨基酸。其蛋白二级结构主要由不规则卷曲、α-螺旋和β-折叠构成。ACPase蛋白包含1个跨膜螺旋区域,其相应氨基酸位置在136~156;包含1个疑似跨膜域,其相应氨基酸位置在255~275;每个跨膜结构域为由20个氨基酸残基组成的螺旋,同时跨膜蛋白的N端和C端位于细胞膜胞质的一侧。【结论】油桐ACPase基因的表达可能与其体内磷营养的分解利用等过程有关。     

超高压对单核细胞增生李斯特氏菌细胞膜损伤 及其氧化磷酸化的影响

 【目的】研究超高压作用对单核细胞增生李斯特氏菌(LM 54004)细胞膜、氧化磷酸化和F0F1-ATP酶的影响。【方法】用原子吸收法测定LM 54004经超高压作用后细胞内金属离子(K+、Mg2+)的泄漏;以亲脂性阳离子四苯基溴化膦 ([3H]-TPP+) 作为放射性探针标记LM 54004细胞膜,测定经超高压作用后细胞膜电位的变化;用羧基荧光素琥珀酰亚胺酯 (cFSE)为荧光探针测定经超高压作用后细胞内pH的变化;用比色法测定超高压对LM 54004 F0F1-ATP酶活性的影响。【结果】150—300 MPa作用10 min,随着压力的增大LM 54004菌落数显著降低,细胞内K+和Mg2+没有泄漏到细胞外,膜电势、跨膜H+浓度梯度和质子动力势大小基本保持不变,F1F0-ATP酶活性降低显著;300 MPa作用10 min,尽管LM 54004菌落数低于检测限,F0F1-ATP酶活性降到0,但细胞膜完整无损,其质子动力势仍然达到最大值。【结论】超高压作用下LM 54004的灭活与F0F1-ATP酶活性的降低之间相关性较好。LM 54004的细胞膜上参与呼吸链有关的酶和电子载体较F0F1-ATP酶耐压,F0F1-ATP酶对超高压敏感,超高压作用下F0F1-ATP酶的失活是超高压灭活的重要原因。     

Chemoattractant-regulated mobilization of a novel intracellular compartment in human neutrophils

A novel mobilizable intracellular compartment was identified in human neutrophils by latent alkaline phosphatase activity. This compartment is mobilized to the plasma membrane much more readily than any identified granule subset and has kinetics of up-regulation in the membrane similar to those reported for a variety of receptor proteins. Triton X-100 permeabilization of both intact human neutrophils and subcellular fractions obtained by density-gradient centrifugation revealed that 70 percent of the alkaline phosphatase is located in an intracellular compartment distinct from primary, secondary, and gelatinase granules and from the plasma membrane. This compartment fully translocates to the plasma membrane after stimulation with nanomolar concentrations of the chemotactic peptide N-formylmethionylleucylphenylalanine.     

不同浓度鸡粪嫌气发酵液对万寿菊生长和代谢的影响

每天用不同浓度的鸡粪嫌气发酵液（ＡＤＣＭＥ）处理种在温室中的万寿菊植株。结果,用１．６８％～３．３６％ＡＤＣＭＥ处理的植株地上部鲜重最高,开花最多,但用０．５６％浓度处理的根鲜重最高。收获时取植株中部叶片和根作为样品进行生理生化分析,发现叶片和根中细胞膜相对透性和Ｐｉ含量,过氧化物酶、Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性以及根中蛋白质、ｐＨ和多酚氧化酶活性在一定范围内随着ＡＤＣＭＥ处理浓度的提高而提高。地上部鲜重较高、开花较多的处理,植株叶片中的叶绿素、类胡萝卜素和Ｐｉ含量,根中的多酚氧化酶活性以及根、叶中过氧化物酶、Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性也较高。出现盐中毒症状的处理,植株根中的细胞膜相对透性和过氧化酶活性以及叶片中的Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性显著高于其它处     

鲤鱼消化道粘液物质及碱性磷酸酶的组织化学研究

本文用组织化学方法对鲤鱼食道、肠粘液物质及碱性磷酸酶进行了研究。食道、肠杯状细胞均含中性粘液和延粘液，肠部分杯状细胞还含有硫酸粘液。含硫酸粘液的杯状细胞随前、中、后肠逐渐增多，其中硫酸粘液的含量在后肠杯状细胞中最高。前、中、后肠吸收细胞核上方胞质和纹状缘含有发达的碱性磷酸酶。肠上皮中有嗜酸性颗粒细胞，其颗粒含有中性粘液和碱性磷酸酶。     

鹅胸腺肥大细胞的超微结构特征

应用透射电镜观察表明,鹅胸腺实质内存在大量的肥大细胞,它们主要分布于胸腺髓质;胞体圆形或椭圆形,表面有少许突起,胞核圆形,椭圆形或新月形,核仁明显;胞质内含有丰富的细胞器和大量的膜包分泌颗粒,颗粒多呈圆形,大小不一。根据其超微结构特征,可将颗粒分为４型：Ａ型颗粒内含细颗粒状物质;Ｂ型颗粒内含粗颗粒状物质;Ｃ型颗粒内含同心性念珠链状物质;Ｄ型颗粒为均质状高电子密度。颗粒内部均未见结晶状,涡卷状或板层     

3种金属离子对好氧颗粒污泥形成及污染控制影响

【目的】探讨不同金属离子对颗粒污泥形成及去除氮磷的影响。【方法】采用摇床震荡法,以污水处理厂氧化沟中新鲜污泥为接种污泥,通过添加10mg/L同浓度的Zn2+、Mg2+、Ca2+3种金属离子诱导好氧颗粒污泥形成,研究其形态特征、MLSS、SVI变化、N素、P素及TOC的处理效果。【结果】结果表明,金属离子诱导的好氧颗粒污泥粒径较大均在0.5～1.5mm之间、结构紧密,具有清晰的边界。添加了Zn2+、Mg2+、Ca2+的污泥实现完全颗粒化时间分别是32d、32d、28d。后期处理中,Zn2+、Mg2+诱导形成的颗粒污泥NH4+-N去除率在70%左右,而Ca2+诱导的颗粒污泥去除率仅有32%。Zn2+、Mg2+、Ca2+诱导的颗粒污泥TP去除率分别为66.18%、64.95%、45.93%,PO43--P去除率是59.41%、55.84%、41.55%。TOC处理效果明显,在85%～92%之间,其中Zn2+诱导的TOC去除率达91.85%。【结论】添加适量金属元素促进颗粒污泥的形成,且Ca2+的添加更有利于活性污泥颗粒化进程时间的缩短;而Zn2+、Mg2+的添加有助于提高颗粒污泥NH4+-N、PO43--P、TP、TOC的降解效率。     

淀粉粒径对大麦淀粉物化特性的影响

【目的】大麦籽粒是一类重要的谷物原料,在啤酒酿造、禽畜喂饲、药食保健等领域的用途十分广泛。研究表明,籽粒中的淀粉颗粒大小及淀粉组成结构决定其用途。通过研究不同品种大麦不同粒径淀粉颗粒的组成结构及物化性质,为大麦淀粉加工利用提供参考。【方法】以西引2号（Xiyin-2）、京辛1号（Jingxin-1）、苏啤6号（Supi-6）3种不同用途的大麦品种籽粒为原料,采用沉降分离法得到大、中、小3个粒径的淀粉颗粒,研究颗粒显微形态、淀粉晶体结构、直链淀粉含量、支链淀粉侧链分布以及淀粉颗粒热特性、水合性质、糊化特性和消化特性与粒径的关系。【结果】大颗粒大麦淀粉多呈盘状,中颗粒淀粉呈扁圆形或椭球形,小颗粒淀粉呈球形或多角形。在偏振光显微镜下,所有大麦淀粉颗粒具有典型的偏光十字,且偏振光亮斑随粒径增加而增强。大麦淀粉的大颗粒占比最高（87.62%—89.48%）,其次为中颗粒（8.97%—9.42%）和小颗粒（1.55%—3.29%）。大麦淀粉的表观直链淀粉含量为19.12—30.63 g/100 g,粒径对其含量的影响缺乏规律性。所有样品均为A型结晶,相对结晶度随着粒径增大而增加。大麦支链淀粉的侧链分布呈现双峰模式,主峰在DP 12处,次峰在DP 38处,大麦支链淀粉以B₁链含量最高（34.34%—44.76%）,其次是A链（25.12%—34.52%）,大麦支链淀粉的平均链长为DP 22.86—25.00。热特性分析结果表明,小颗粒大麦淀粉的糊化温度区间（∆T）最大,糊化焓（∆H）则随着粒径增加而增大。大麦淀粉的膨胀力表现出品种差异,京辛1号大麦淀粉所有粒径颗粒均具有较高的膨胀力。糊化特性分析结果表明,大颗粒淀粉的峰值黏度、崩解值、终值黏度比中颗粒和小颗粒淀粉更高。消化特性分析结果表明,大麦淀粉颗粒快消化淀粉（RDS）含量随着粒径减小而增加,而粒径对其慢消化淀粉（SDS）和抗性淀粉（RS）含量的影响缺乏规律。【结论】粒径对大麦淀粉的直链淀粉含量、支链淀粉精细结构、相对结晶度等结构特征有较大影响,从而影响大麦淀粉的热特性、糊化特性及消化特性等性能。     

毛白杨花粉败育过程中Ca^2＋-ATPase的异常变化

为研究木本植物花粉败育过程中Ca2+ ATPase的影响,本文利用氯化铈沉淀和电镜细胞化学方法,对不同育性毛白杨花药在小孢子发生发育过程中Ca2+ ATPase进行了定位。结果表明:Ca2+ ATPase在可育花药小孢子母细胞时期大量分布于小孢子母细胞质膜、液泡膜及内膜系统,花药内壁细胞内膜系统和绒毡层细胞质膜,随后Ca2+ ATPase在上述细胞中均减少甚至消失,并于小孢子时期和成熟花粉时期分别在小孢子和花药内壁细胞中再次沉积;不育花药小孢子母细胞以及此时期绒毡层细胞质膜上并无明显Ca2+ ATPase,花药表皮、药室内壁以及中层的Ca2+ ATPase都高于同一时期的可育花药,其绒毡层细胞解体不完全。由上述结果推测:毛白杨不育花药内小孢子母细胞和药壁中Ca2+ ATPase分布异常,影响细胞内钙离子的主动转运,可能导致钙离子异常累积,进而通过影响小孢子母细胞和药室内壁细胞的正常代谢、绒毡层细胞的及时降解而导致花粉败育。      

番茄质膜H+-ATPase家族基因的鉴定和表达分析

植物质膜H+-ATPase（Ec3.6.1.3）是一类普遍存在于细胞质膜上通过水解三磷酸腺苷（ATP）产生能量,将细胞质中的氢离子（H+）逆浓度泵出细胞的运输蛋白。植物中的质膜H+-ATPase由一个多基因家族所编码,其功能涉及到植物生长发育的多个生理过程。通过对全基因组检索在茄科Solanaceae植物番茄Solanum lycopersicum中共鉴定到8个编码质膜H+-ATPase的同源基因（LHA1~8）。生物信息学分析显示:这8个LHA基因具有较高的序列相似性和较为保守的外显子/内含子结构特征。实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）分析显示,LHA1~4在所有被检测的组织器官中都有表达,LHA5~7几乎只在花器官中高量表达,而LHA8在正常培养和养分（氮、磷、钾和镁）缺乏以及高盐胁迫处理条件下几乎都不表达,但能够在被菌根真菌侵染的根系中强烈表达。将一段2 669 bp的LHA8的启动子融合GUS报告基因转入到烟草Nicotiana tabacum中发现,GUS基因几乎只在被菌根真菌菌丝侵入形成丛枝的根系细胞中特异性表达。图 5 表 2 参22