渗透胁迫下CaM合成与胞质Ca2+关系初步研究

通过外源添加Ca^2 ,EGT和Verapamil(异博啶），初步研究了渗透胁迫下CaM合成与Ca^2 的关系。渗透胁迫下，0mmol/L,20mmol/L,Ca^2 ,EGTA和Verapamil处理均提高小麦幼苗根叶CaM含量。结果表明：渗透胁迫下，胞质Ca^2 浓度升高和降低均促进CaM的合成，Ca^2 参与了CaM的合成。     

小麦叶片原生质体微管骨架的免疫荧光标记及其影响因素

以小麦叶肉细胞原生质体为材料，利用免疫荧光标记并辅以共聚焦激光扫描显微镜检术（Confocal la-ser scanning microscopy,CLSM)观察，对含有叶绿体较多的小麦叶肉细胞微管骨架的标记方法及其影响因素进行了探索。结果表明，来自未完全展开叶片的原生质体中，微管的数量多且骨架的排列方式较复杂，而从完全展开的叶片获得的原生质体中，微管数量很少，实验中发现，外加Ca^2 离子浓度的增加，使微管的稳定性降低，并确定了导致微管解聚的Ca^2 浓度。     

柑橘非对称体细胞杂种的胞质基因组分析

采用CAPS（cleaved amplified polymorphic sequence）分子标记对通过非对称原生质体融合获得的2个组合体细胞杂种植株进行了胞质遗传分析。结果表明,在伏令夏甜橙（Citrus sinensis）＋默科特橘橙（C.reticulata×C.sinensis）组合中,分析的2棵植株胞质DNA都来自伏令夏甜橙（供体）;在丹西红橘（C.retic-ulata）＋佩琦橘柚（C.reticulata×C.paradisi）组合中,分析的3棵植株胞质DNA都来自来源于佩琦橘柚（受体）。     

绿豆（Phaseolus radiatus L.）花粉粒的形成与发育

绿豆小孢子母细胞来自初生追孢细胞。小孢子母细胞减数分裂过程中的胞质分裂属于同时型。四分体呈四面体排列。成熟花粉粒为2细胞型,在花药内葫发,花药开裂时散出。小孢子母细胞之间,有明显的胞间联丝。小胞子母细胞减数分裂Ⅰ前期的凝线期至减数分裂Ⅰ的中期,普遍观察到小孢子母细胞间染色质胞间转移现象。四分体时期,绒毡层细胞的内切向壁及径向壁解体,部分绒毡层细胞的原生质体向药室内突入。由单核花粉粒到2细胞花粉粒形成初期,均可见到部分绒毡层细胞的原生质体进入药室,形成周原质团,渗入花粉粒之间,但在此过程中,始终有一部分绒毡层细胞保持在原位解体消失。     

钙在植物生理代谢中的作用

钙不仅是一种大量元素，而且也是一种转导许多生理过程的胞内信号分子。Ca^2 对植物细胞的结构和生理功能有重要作用，能维持细胞壁、细胞膜及膜结合蛋白的稳定性，参与胞内稳态和生长发育的调节过程，在细胞内起第二信使的作用。Ca^2 调节植物对环境胁迫的反应，在胁迫条件下，胞内Ca^2 常常显著增加，这种增加可以启动基因表达，激活一系列生化反应，使植物能够适应环境胁迫。     

不结球白菜OguCMS下胚轴原生质体的核失活研究

为了利用非对称细胞融合改良不结球白菜 (Ｂｒａｓｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｓｓｐ .ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ)ＯｇｕＣＭＳ (萝卜胞质雄性不育 )系统的苗期低温黄化和蜜腺发育不良缺陷 ,本试验在ＯｇｕＣＭＳ原生质体培养再生植株[1～ 2 ] 的基础上 ,对不结球白菜ＯｇｕＣＭＳ下胚轴原生质体核失活技术进行了研究。1　材料与方法1 1　材料以南京农业大学园艺学院白菜课题组经多代回交转育的不结球白菜ＯｇｕＣＭＳ‘91Ｈ秋 1 0 0’ (ＢＣ7)为试材 ,无菌播种后暗培养 ,取 5ｄ苗龄的下胚轴游离原生质体。1 2　下胚轴原生质体的制备ＯｇｕＣ…     

抗寒锻炼对黑麦叶离体原生质体的膨胀势和渗透失活的影响

从未经抗寒锻炼的黑麦叶片中分离并悬浮于山梨醇溶液中的原生质体可忍受的表面积增加值(TSAI_(50))为1020μm~2,不因收缩程度而改变。原生质体的膨胀势达不到它们原来的大小就发生溶胞作用。锻炼过的原生质体TSAI_(50)值明显增加,收缩后的原生质体的膨胀势可恢复或接近于它们原来的最大表面积。 抗寒锻炼也使原生质体对高渗协迫的忍受大大增加。在0℃的高渗山梨醇或NaCl CaCl_2溶液中,未经锻炼的原生质体的半致死浓度为3Osm,经锻炼的原生质体分别为10和7Osm。 冻融过程中,未经锻炼的原生质体在半致死温度范围内,伤害的主要形式是膨胀引起的溶胞作用,在致死温度以下,主要是脱水引起渗透失活。经锻炼的原生质体在致死温度时的伤害,主要是渗透失活。     

利用原生质体融合技术转移作物CMS性状的研究进展

高等植物中细胞质雄性不育（Cytoplasmic male sterility，CMS）由线粒体基因组控制，原生质体融合技术可以实现胞质基因组的重组，产生新的核质互作。因此，利用原生质体融合技术能够创造拥有潜在农艺性状的新CMS种质资源。从胞质杂种的产生方式、原生质体融合转移CMS性状的研究现状及CMS性状的转移在作物育种上的应用3个方面对原生质体融合技术转移作物CMS性状的研究进行了综述，对利用该技术培育无核或少核柑橘新品种进行了展望。     

野燕麦原生质体制备和融合的研究

[目的]研究野燕麦原生质体的制备与融合方法.[方法]用机械法制备野燕麦的原生质体,并用PEG结合高Ca2＋-高pH溶液的融合法对原生质体的融合进行研究.[结果]野燕麦叶片在35％蔗糖溶液中质壁分离15 min能够制备数量较多的原生质体;PEG结合Ca2-高pH融合法能有效地使野燕麦原生质体融合.[结论]该技术为植物叶片细胞原生质体的制备与融合奠定了基础.     

属间体细胞杂交创建甘蓝型油菜细胞质雄性不育系及其鉴定

 利用原生质体融合技,获得了甘蓝型油菜品种中双4号与新疆野生油菜野油18的对称性体细胞杂种。杂种当代建成的6株植株中有2株雄性不育株。用中双4号做轮回亲本与不育株回交,不育株率随回交代数增加而升高,至BC3代大部分株系的不育株率接近100%,到BC4代不育性稳定,群体中无育性分离现象。用波里马CMS的恢复系和保持系与其测交,6个甘蓝型油菜品系均可保持该不育系的不育性,表明该雄性不育胞质与Pol不育胞质不同。     

玉米生长条件对玉米原生质体转化的影响研究

植物原生质体瞬时转化体系是一种高效、快捷的基因表达分析工具。为研究玉米生长条件对玉米原生质体活力和转化效率的影响,以玉米自交系Q319幼苗为研究对象,利用正交试验L9(34)探讨了玉米的生长条件（光照强度、光照周期、生长温度和龄期）对玉米叶肉细胞原生质体转化的影响。实验结果显示上述四个因素都能够影响玉米叶肉细胞原生质体活力与转化效率,而光照强度的影响最大;进一步研究发现光照强度与玉米叶肉细胞原生质体的活力及转化效率呈负相关关系,玉米黄化苗原生质体转化效果最好,其原生质体活力及转化效率分别达到了100%和85%。另外,龄期为13 d的玉米黄化苗原生质体转化效率最高,龄期过小或过大,黄化苗的原生质体转化效率都会下降。     

溶藻细菌F8与藻毒素降解菌T1的原生质体融合研究

为制备出兼具溶藻及降解藻毒素(MC-LR)的双效工程菌,研究不同的亲本原生质体灭活方式、不同PEG浓度、pH以及作用的温度对原生质体融合的影响,探讨溶藻细菌F8与藻毒素降解菌T1菌株的原生质体融合的适宜条件。结果表明,对F8菌株的原生质体采用45℃热灭活、T1菌株的原生质体紫外灭活,采用pH为8.0的30%的PEG溶液,融合温度为30℃,原生质体融合率可达28.17%。     

基因型和聚乙二醇预处理对甘蔗胚性愈伤组织原生质体分离的影响

对福农８６／１７、桂糖１１号和粤糖５７／４２３等３个甘蔗基因型的胚性愈伤组织进行了原生质体分离，研究了聚乙二醇（ＰＥＧ）预处理对福农８６／１７胚性愈伤组织原生质体分离的影响．结果表明，桂糖１１号的原生质体活力较高，但得率较低，福农８６／１７的原生质体活力和得率都较低，粤糖５７／４２３的原生质体得率较高，但活力也较低．ＰＥＧ预处理可以提高胚性愈伤组织分离的原生质体活力．一定质量浓度和一定时间的ＰＥＧ预处理能够成倍地提高原生质体的得率，以质量浓度为０．５０ｍｇ·Ｌ－１的ＰＥＧ预处理１５ｍｉｎ，甘蔗福农８６／１７每克胚性愈伤组织可分离获得１×１０６个有活力的原生质体     

培养条件对大白菜无菌苗叶肉原生质体培养的影响

以市售栽培品种城青2号、高脚白大白菜无菌苗叶肉原生质体为材料,分别就激素、原生质体的培养密度、培养方式、多胺类物质对细胞分裂频率以及后期发育的影响进行了系统的研究.还探讨了在原生质体培养10天后加入提高了pH值的培养液来控制细胞褐化的可能性.     

荔枝转基因悬浮细胞再生松散性胚性愈伤组织的原生质体分离与初步培养

以荔枝优良品种下番枝转gus和hpt基因悬浮细胞再生的松散性胚性愈伤组织(TSFEC)为试材,进行原生质体分离研究及初步培养。结果表明:潮霉素会延长荔枝TSFEC原生质体分离的酶解时间,比一般的酶解时间多2 h,但对原生质体产量和存活率的影响不大;TSFEC培养时间对原生质体分离的影响很大,其中以培养15-20 d时的原生质体产量最大,为(10.1-10.5)×107个.g-1,此时原生质体的活力最高,存活率可以达到93.1%-93.4%;酶解方式对原生质体产量和活力影响都不大,常规的酶解方式酶解的最适宜时间为14 h。     

水稻原生质体培养及应用研究进展

本文综述了近十年水稻原生质体培养研究的进展及其在远缘杂交、细胞融合、基因转移技术等方面应用。自1985年以来水稻原生质体培养取得了突破性进展。粳稻、籼稻、爪哇稻和野生稻种的原生质体培养相继成功,从中筛选出许多适于原生质体培养的水稻品种或品系。随着培养技术的完善,水稻与其他远缘植物(如稗草、野生稻等)细胞杂交、应用电导基因或PEG 法将外来DNA 直接导入水稻原生质体中的基因转移技术都得到了应用和发展。     

芦荟原生质体的分离

[目的]为进一步的离体培养快速繁殖奠定基础,同时也为原生质体的融合(体细胞杂交)提供条件。[方法]采用酶解的方法以芦荟的叶片为材料进行原生质体分离。[结果]用芦荟的叶肉细胞可成功分离出原生质体,而且活力较高,可达90%以上。[结论]芦荟原生质体的成功分离主要取决于材料的来源、酶液的组成。另外还受酶解液的渗透压、温度和pH值影响。     

玉蕈原生质体制备条件研究

[目的]探索了玉蕈原生质体的制备与再生的适宜条件。[方法]采用斜面、平板培养基和液体培养基,研究了玉蕈菌丝体酶解时间(1~5 h)、酶解温度(25℃)和菌龄(4~7 d)以及渗稳剂种类(甘露醇、蔗糖、KCl、MgSO4)对玉蕈原生质体制备与再生的影响,优化了玉蕈原生质体制备与再生的条件。[结果]玉蕈原生质体制备与再生的适宜条件是:渗稳剂为0.6 mol/L MgSO4.7H2O,玉蕈菌丝体酶解时间2h,酶解温度25℃,菌龄5 d。在此条件下,玉蕈原生质体的产量最高,达16.7×106个/ml。[结论]该研究为利用原生质体技术进行玉蕈育种奠定了基础。     

4种基因型烟草叶肉原生质体培养的研究

以K326、云85、红大、G-28等普通烟草品种的叶片为起始材料进行原生质体培养的研究。结果表明,基因型对烟草叶肉原生质体的培养有明显影响作用,并对影响烟草叶肉原生质体的分离、培养和再生植株等环节的其它相关因素进行了研究和探索。     

影响微生物原生质体融合技术的因素

原生质体融合技术是微生物育种的有效方法之一，包括原生质体制备、原生质体融合、原生质体再生及融合子的分离等主要过程。综述了培养基成分、菌龄、酶的种类及浓度、稳定剂、PEG的分子量、浓度等因素对微生物原生质体制备、融合及再生的影响，并对近年来国内外学者在微生物原生质体融合技术及应用方面所取得的最新进展进行了概括。