抑制‘白花油茶’叶片外植体褐化和诱导愈伤组织的研究

以‘白花油茶’Camellia oleosa Rehd叶片作为材料研究愈伤组织诱导过程中降低外植体的褐化现象和提高诱导率的方法。对‘白花油茶’嫩枝弱光培养,用维生素C漂洗外植体,培养基中加入维生素C和活性炭来抑制外植体的褐化现象,对基本培养基种类、激素浓度、琼脂浓度和糖类进行单因素实验和不同组合试验,以外植体的存活率、愈伤组织诱导率及其生长状况为指标,优化了‘白花油茶’叶片愈伤组织诱导的条件。结果表明,水中弱光培养枝条1~2 d,0.3 g·L~(-1)的维生素C溶液漂洗外植体2~3 min,培养基中添加1.0 g·L~(-1)活性炭和0.3 g·L~(-1)维生素C等都可以显著减少外植体的褐化,从而提高外植体的存活率。优化的培养基成分为基本培养基WPM,包含1.0 mg·L~(-1) 6-BA和1.5 mg·L~(-1) 2,4-D,15.0 g·L~(-1)蔗糖和15.0 g·L~(-1)葡萄糖,6.5 g·L~(-1)琼脂,1.0 g·L~(-1)活性炭和0.3 g·L~(-1)维生素C等能够提高外植体的愈伤组织的诱导率,减少‘白花油茶’外植体褐化现象,适当的培养条件能够快速有效地诱导出有活性的愈伤组织,为再生‘白花油茶’植株打下了基础。     

一种快速高效的油茶叶片DNA提取方法

油茶叶片含有较多的多糖和多酚等次生代谢产物是提取DNA的重要障碍。本研究以油茶叶片为材料研究高质量的DNA提取方法。建立了一种改良的CTAB法,运用2×CTAB缓冲液来裂解细胞,在裂解细胞后的溶液中加入终浓度为2 mol/L Li Cl,用氯仿异戊醇抽提溶液,用等体积的异丙醇沉淀DNA,用预热的70%乙醇洗涤DNA沉淀。运用紫外分析和琼脂糖凝胶电泳分析测定了DNA的产率和质量,并与经典SDS法、经典CTAB法、高盐低p H法进行了对比。结果表明,改良的CTAB法提取的DNA产率比经典SDS的少,与经典CTAB法和高盐低pH法的相似,达到39.0μg/g,且纯度高,无RNA的污染。改良的CTAB法提取的叶片DNA可用于油茶后续的PCR分析研究。     

野燕麦原生质体制备和融合的研究

[目的]研究野燕麦原生质体的制备与融合方法.[方法]用机械法制备野燕麦的原生质体,并用PEG结合高Ca2＋-高pH溶液的融合法对原生质体的融合进行研究.[结果]野燕麦叶片在35％蔗糖溶液中质壁分离15 min能够制备数量较多的原生质体;PEG结合Ca2-高pH融合法能有效地使野燕麦原生质体融合.[结论]该技术为植物叶片细胞原生质体的制备与融合奠定了基础.     

何首乌叶原生质体制备与融合研究

[目的]研究何首乌叶片原生质体的制备和融合方法。[方法]用机械法制备何首乌叶片的原生质体,用PEG结合高Ca2+-高p H诱导融合法来诱导其原生质体,研究原生质体的融合现象。[结果]何首乌叶片在25℃和35%的蔗糖溶液中处理30 min能够制备出较多的完整原生质体。用20%PEG融合液处理原生质体20min能够有效地诱导何首乌原生质体的融合,2个细胞的融合效率为11.7%,表明用机械法制备的原生质体也是有活性的。[结论]该技术为何首乌原生质体培育奠定了基础。     

钟山县水果总产量首次突破5万吨大关

钟山县为全面提高果品质量和竞争力，继续扎实推进“名优果工程”建没，不断发展名优品种种植和加强对水果种植户的技术指导，有效地推动了全县水果生产的发展。2006年，全县实现水果总产量5．2万吨，比上年增长8．2％，多年来首次突破了5万吨大关。     

正交法优化普通油茶花粉萌发的培养成分

[目的]研究普通油茶离体花粉的培养条件.[方法]以蔗糖、维生素C、H3BO4、MgSO4、培养液pH为影响油茶花粉萌发的因素,进行单因素试验和正交试验,研究这些成分对油茶花粉萌发的影响.[结果]油茶花粉萌发的最佳培养液成分为蔗糖150 g/L,维生素C0.02 g/L,H3BO40.15 g/L,MgSO40.07 g/L,培养基pH 6;影响油茶花粉萌发主要的因素是蔗糖,其次是H3BO4.[结论]该研究结果为油茶的有性杂交打下了基础.     

叶面肥对油茶幼苗生长和生理特征影响的研究

以1 a生出圃的油茶幼苗为材料研究不同浓度无机盐配比的叶面肥对油茶幼苗生长发育的影响,以便获得有利于油茶幼苗生长的叶面肥。在N、P、K肥的基础上,对硼酸、硫酸锌、钼酸钠进行L 9(34)正交试验设计来配制叶面肥,喷施油茶幼苗叶片一段时间后测定幼苗的生长及其生理生化指标,对测定结果进行了极差分析和方差分析,并对优化的叶面肥进行了验证试验分析。结果表明,优化的叶面肥是以N、P、K为基础的0.2%硼酸+0.05%硫酸锌+0.01%钼酸钠的混合溶液。这种优化的叶面肥能够提高油茶幼苗的叶片数、叶芽比值、叶片的厚度、栅栏组织与海绵组织的厚度比值、叶片上表皮和下表皮的厚度比值,能够提高叶片的叶绿素、可溶性总糖、蛋白质和多酚的含量,能够提高油茶叶片的PPO、CAT、POD、SOD等氧化酶的活性,培育出了生长健壮的油茶幼苗。该叶面肥在生产实践上可为油茶苗木的繁茂生长提供参考。     

正交法优选乌蔹莓过氧化物酶活性的测定条件

[目的]优选乌蔹莓过氧化物酶活性的测定条件.[方法]以酶活力为考察指标,通过正交试验,研究酶体积、底物体积、反应体系的酸碱度和反应温度等不同条件对乌蔹莓过氧化物酶活性的影响.[结果]影响乌蔹莓过氧化物酶活性测定的因素大小顺序依次是：底物体积＞温度＞酶体积＞ pH.乌蔹莓过氧化物酶活性测定的最佳条件为：0.5 ml浓度2％的H2O2,温度为35℃,酶体积为0.1ml,pH值为5.5.[结论]底物体积和温度是影响过氧化物酶活性的主要因素.