香水百合中总黄酮提取及抗氧化性

通过正交试验法对香水百合中总黄酮的提取工艺进行优化,利用分光光度法测定其提取率。以维生素C为阳性对照,分别测定其抗氧化能力、对DPPH自由基及ABTS自由基的清除能力及还原力。结果表明,香水百合的最佳提取工艺为提取温度60℃、提取时间1.5 h、料液比1 g∶30 m L、乙醇浓度70%,在最佳提取条件下,香水百合中总黄酮的提取率可达11.23%。香水百合总黄酮具有一定的抗氧化性,其FRAP值为261.01 g/m L;在一定质量浓度范围内对DPPH自由基、ABTS自由基的清除率有良好线性关系,半数抑制浓度(IC50)分别为29.54、17.32 g/m L。在一定浓度范围内,香水百合的还原力呈线性增加趋势。由结果可知,香水百合具有一定的抗氧化性,但其抗氧化能力弱于维生素C。     

玫瑰花蒂多酚的超声辅助提取工艺优化及其抗氧化活性评价

【目的】确定玫瑰花蒂多酚的超声辅助提取最佳工艺并评价其抗氧化活性.【方法】通过单因素试验考察料液比、乙醇体积分数、超声时间和提取次数4个因素对多酚提取率的影响,采用响应面法分析优化其提取工艺,采用DPPH和ABTS自由基清除活性测定方法评价对该工艺制备所得玫瑰花蒂多酚的抗氧化活性.【结果】玫瑰花蒂多酚的超声辅助提取最佳工艺条件为料液比1∶17.5(g∶mL)、乙醇体积分数52%、超声时间60min、提取次数4次.在此条件下多酚实际提取率为8.33%,与理论值较为接近.玫瑰花蒂多酚对DPPH和ABTS自由基的半清除浓度(SC50)均低于阳性对照VC,分别为6.67g/mL和59.32g/mL.【结论】结果表明采用响应面法分析优化玫瑰花蒂多酚超声辅助提取工艺的方法可行,且玫瑰花蒂多酚具有显著的抗氧化活性.     

党参地上茎叶总黄酮提取工艺及其抗氧化活性

以党参废弃物茎叶为试验材料,在单因素试验基础上,设计Box-Behnken响应面试验,优化双酶协同超声波提取党参茎叶总黄酮的最佳提取工艺,采用清除DPPH自由基、ABTS自由基和FRAP法评价党参茎叶总黄酮的抗氧化活性.结果表明,利用双酶协同超声法提取党参茎叶总黄酮的最佳条件为:液料比40 mL:1 g,乙醇体积分数70％,双酶(纤维素酶:果胶酶=1:1)用量0.45 mg/mL,酶解时间60 min,超声时间42 min,此条件下,总黄酮提取率为6.511％.DPPH自由基、ABTS自由基和FRAP总还原力的分析结果表明,党参茎叶总黄酮具有较高的抗氧化活性,在浓度为100μg/mL时,对DPPH自由基清除率达到91.74％;在浓度达到500μg/mL时,对ABTS自由基的清除率为94.82％,非常接近维生素C;党参茎叶总黄酮的总还原力为28.22 mg/g.本研究确定出党参茎叶总黄酮具有抗氧化活性,可为党参资源的充分利用提供数据支撑.     

苦笋总黄酮提取工艺优化及其体外抗炎抗氧化活性研究

【目的】探索苦笋总黄酮最佳提取工艺条件及其体外抗氧化抗炎活性。【方法】以苦笋为原料,采用超声辅助提取法,通过单因素实验及Box-Behnken响应曲面法筛选出最佳提取工艺,并评估苦笋总黄酮提取物的体外抗氧化抗炎活性。【结果】苦笋总黄酮最佳提取工艺为：料液比1∶30 g/mL,提取温度51℃,提取时间23 min,乙醇浓度87%,提取溶液pH值为6,超声功率200 W。在此条件下苦笋总黄酮提取率为10.61%;苦笋总黄酮浓度为0.5 mg/mL时,FRAP值达到3.04 mmol/L,对DPPH自由基、羟基自由基和ABTS自由基的清除率分别为88.73%、60.22%和72.38%,其IC50值分别为0.07 mg/mL、0.39 mg/mL和0.23 mg/mL;苦笋总黄酮浓度为1.20 mg/mL时,NO产生抑制率可达到93.94%。【结论】苦笋总黄酮提取工艺切实可行,并且苦笋总黄酮提取物具有一定的抗氧化抗炎活性。     

响应面法优化黑莓精粉超声提取工艺及其抗氧化活性研究

【目的】研究黑莓精粉超声提取的最优工艺条件,并对其抗氧化活性进行测定.【方法】以单因素试验为基础,研究料液比、超声时间、超声功率对黑莓精粉得率和花青素含量的影响,采用响应面分析方法确定黑莓精粉的最佳提取工艺,并通过黑莓精粉对DPPH和ABTS自由基的清除能力,评价其抗氧化能力.【结果】黑莓精粉的最佳提取条件为:料液比(g/mL) 1∶27、超声时间30 min、超声功率180 W,在此条件下,精粉得率为(9.22±0.07)%,花青素含量为(11.21±0.32)mg/g,对DPPH和ABTS自由基的IC_(50)分别为(0.10±0.01)mg/mL和(0.19±0.05)mg/mL.【结论】研究结果为黑莓精粉的提取及利用提供科学依据.     

野生蕨菜中总黄酮的提取及其抗氧化活性

以野生蕨菜为原料,采用超声波辅助提取法,研究不同提取条件对野生蕨菜中总黄酮含量的影响及其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的能力。首先在单因素试验基础上考察各因素对野生蕨菜总黄酮提取率的影响,然后采用正交试验优化野生蕨菜总黄酮的提取工艺条件,同时比较其与维生素C在清除DPPH自由基方面的差异。结果表明,超声辅助提取野生蕨菜中总黄酮的最优条件:超声功率240 W,料液比1 g∶35 m L,超声时间70 min,超声温度60℃。其中的显著影响因素是超声功率、超声温度,在最优条件下超声波辅助提取野生蕨菜中总黄酮的提取率可以达到3.34%。另外,野生蕨菜黄酮类化合物对DPPH自由基的清除率比相同浓度的维生素C溶液清除率高,其IC50值为0.005 mg/m L,说明野生蕨菜总黄酮具有很好的抗氧化活性,从而为其综合开发提供了一定的理论依据。     

黑牛肝菌多糖超声提取工艺优化及抗氧化研究

以云南大理黑牛肝菌为材料,使用超声辅助萃取及水提醇沉法提取多糖,采用单因素试验及正交试验对黑牛肝菌多糖提取工艺进行优化,并对黑牛肝菌多糖进行了提取;对所得多糖进行DPPH自由基、ABTS自由基清除能力及铁氰化钾还原能力试验,对其抗氧化活性进行比较研究.结果表明,黑牛肝菌多糖最佳提取工艺为料液比1:25(g:mL)、醇沉浓度80％、超声时间70 min、超声功率90％,在此条件下多糖含量为79.41 mg/g.醇沉浓度为80％时,多糖提取物抗氧化活性最强,多糖对DPPH、ABTS自由基清除率及总还原力吸光度分别为97.92％、99.80％和0.789;醇沉浓度为50％时,所得多糖对DPPH、ABTS自由基清除率及总还原力吸光度分别为85.79％、88.23％和0.713,抗氧化活性最低;表明黑牛肝菌多糖对自由基有较好的清除效果及还原作用.     

响应面法优化蔗梢多糖超声波提取工艺

【目的】优化蔗梢多糖的提取工艺条件,为蔗梢多糖的开发利用提供技术参考。【方法】以多糖提取率和DPPH自由基清除率为指标,采用响应面法分析优化超声波提取蔗梢多糖的工艺条件。【结果】超声波提取蔗梢多糖最佳工艺为:超声功率640 W,提取温度69℃,提取时间29 min,在此条件下,其多糖提取率为4.68%,DPPH自由基清除率为74.89%。【结论】采用响应面法优化蔗梢多糖超声波提取工艺具有较高的可行性。     

黑藜麦多糖超声辅助提取工艺及其抗氧化活性、稳定性研究

通过响应面设计，利用超声辅助法优化黑藜麦多糖的提取工艺；通过DPPH自由基清除率、ABTS+清除率、总抗氧化能力和羟自由基清除率分别测定黑藜麦多糖的抗氧化活性；考察温度与pH对黑藜麦多糖抗氧化活性稳定性的影响。结果表明，黑藜麦多糖的提取工艺优化方案为提取时间30 min，提取温度60℃，料液比1∶9 g/mL，得到黑藜麦多糖的提取率为9.829 4%；通过4种方法测定多糖的抗氧化活性，表明多糖纯度越高其抗氧化性越强；黑藜麦多糖抗氧化性的稳定性受温度的影响变化显著，温度越高，加热时间越长，稳定性越低，在中性或偏酸性条件下稳定性较好。可见，黑藜麦多糖具有显著的抗氧化活性，其稳定性受温度和pH等因素的影响。     

黑果枸杞体外模拟消化及抗氧化研究

【目的】以黑果枸杞为研究对象，对其进行体外模拟胃肠消化，探讨消化过程中黑果枸杞活性成分和抗氧化性的变化。【方法】采用紫外分光度计对黑果枸杞花色苷、黄酮、多酚含量和抗氧化指标DPPH、ABTS自由基清除率进行测定。【结果】在体外模拟胃、肠消化3 h的过程中，黑果枸杞花色苷分别降低了1.971 mg/g和8.315 mg/g；体外消化2 h时多酚含量分别上升了4.431 mg/g和1.480 mg/g；胃消化使黄酮含量下降5.842 mg/g，而肠消化2 h黄酮含量达到最高值6.004 mg/g。胃、肠体外模拟消化阶段，DPPH自由基清除率分别下降了16.48%和4.99%,ABTS自由基清除率分别下降了8.64%和12.1%。【结论】花色苷、黄酮、多酚含量的变化对抗氧化性有一定作用。     

苏州近郊4种不同森林群落稳定性研究

稳定性是一个评价群落结构与功能的指标,一直是生态学研究的热点。本文依据林分地上部分指标建立稳定体系,对苏州近郊4种人工林分,应用数学生态学方法,分析冬青针阔混交林、栎树针阔叶混交林、湿地松林和木荷林的林分稳定性。结果表明,多样性并不完全能够代表稳定性;4种林分群落稳定性主要因林分密度不同而异;稳定性依次为湿地松林＞冬青湿地松林＞栎树湿地松林＞木荷林。其中湿地松林可能会发展成为针阔混交林;木荷林中在生长过程中会因竞争产生限制,可能演替形成栎树—木荷混交林;2种针阔混交林在未来演替也可能向落叶阔叶、常绿阔叶混交林发展;该地区木荷林密度过大,稳定性较弱,应采取适当的抚育措施,提高其林分稳定性。     

四川省食品动物源大肠杆菌mcr-1与ESBLs基因共转移分析

为了解四川省食品动物源大肠杆菌mcr-1耐药基因流行情况,及其与超广谱β-内酰胺酶基因(ESBLs)共存和共转移的特征,采用微量肉汤稀释法检测菌株对不同抗菌药物的敏感性;采用PCR检测菌株mcr-1,以及mcr-1阳性菌株中ESBLs基因类型;采用质粒接合转移试验分析了mcr-1与ESBLs基因共转移的耐药机制。结果显示:190株大肠杆菌的mcr-1检出率为36.84%,75.71% mcr-1阳性菌株中同时检出ESBLs基因,主要以blaTEM-1、blaCTX-M-55和blaCTX-M-14为优势基因;mcr-1阳性菌对氨曲南(ATM)、头孢噻肟(CTX)和多黏菌素E(COL)耐药率极显著高于mcr-1阴性菌(P<0.01);质粒转移率为47.14%,其中获得mcr-1和ESBLs基因共转移的接合子表现出与供体菌相同的耐药表型及耐药基因。综上,在四川省食品动物源大肠杆菌中,mcr-1与ESBLs基因共存现象广泛存在,且耐药基因易发生水平传播,对菌株多重耐药性的产生具有重要意义。     

青稞转录因子HvnANT1基因的克隆与表达分析

为探究HvnANT1基因在青稞粒色形成过程中的基因表达模式,以紫粒青稞‘涅如姆扎’和白粒青稞‘昆仑10号’为试材,利用简化基因组GBS(Genotyping-by-Sequencing)对青稞紫粒进行基因定位,克隆到HvnANT1基因,对其进行生物信息学分析。结果表明:1)在7H染色体的84.30—86.00 cM获得1个MYB类转录因子,命名为HvnANT1。2)该基因长1 033 bp,其完整开放阅读框为762 bp,编码253个氨基酸。HvnANT1蛋白分子量为27.14 kU,是亲水性的不稳定碱性蛋白且不存在跨膜结构,无信号肽。该蛋白的二级结构主要是由无规卷曲、α-螺旋、延伸链和β-转角组成,具有2个SANT结构域(分别位于第13—第63个;第66—第114个氨基酸)。3)同源比对与系统进化分析表明:青稞HvnANT1蛋白与大麦、乌拉尔图小麦、高梁、玉米、二型花、小米、水稻、土瓶草、车轴草和杨梅10种植物的ANT1蛋白序列相似性分别为100.00%、88.85%、54.64%、60.95%、60.82%、58.46%、57.61%、37.76%、36.05%和36.33%;这些序列都具有2个高度保守的2个SANT结构域;与大麦的亲缘关系最近,其次是与乌拉尔图小麦,与水稻最远。4)亚细胞定位结果表明,该基因定位在细胞核内。5)实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示:与籽粒颜色形成的乳熟早期和乳熟晚期相比,软面团期的HvnANT1基因在‘涅如姆扎’中表达量极显著上调,而在‘昆仑10号’中各时期的表达量较低且差异不显著;且软面团期的‘涅如姆扎’籽粒HvnANT1基因的表达量极显著高于‘昆仑10号’(P<0.01)。花青素合成相关的结构基因HvnCHI、HvnANS和HvnDFR与该基因表达量模式相似。综上,青稞HvnANT1蛋白结构中的SANT结构域在物种进化过程中比较保守;该基因定位在细胞核内,符合转录因子特性;HvnANT1基因表达模式与结构基因HvnCHI、HvnANS和HvnDFR相似,在籽粒颜色形成的软面团期表达量极显著升高。     

干旱胁迫下不同品种小麦4种功能基因的表达模式及相关生理指标分析

采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)对干旱胁迫下脂质转移蛋白基因(TaLTP1)、膨胀素基因(TaEXPB23)、水通道蛋白基因(TaAQP7)和果聚糖6-果糖基转移酶基因(Ta6-SFT)在4种小麦叶片中的表达情况进行分析;通过测定相对水分质量分数和果聚糖质量分数来判断小麦生长发育状况。结果显示:干旱胁迫48h内,4种基因在不同抗旱性小麦叶片中的表达模式不同,干旱敏感型小麦中4种基因的相对表达量先上升后下降,恢复到正常水平;干旱耐受型小麦中4种基因的相对表达量先上升后下降,但仍维持较高表达水平;干旱耐受型小麦具有较高的相对水分质量分数和果聚糖累积量。以上结果表明,4种基因参与小麦干旱胁迫应答,4种基因的表达模式可以作为鉴定小麦抗旱的分子指标。本研究可为准确快速地鉴定小麦品种抗旱性提供重要分子依据。     

摘除眼柄与注射眼柄粗提物对凡纳滨对虾性腺发育相关基因表达的影响

利用荧光定量PCR技术,检测了眼柄粗提物对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)性腺发育相关基因(DMC1、VASA和VTG)表达的影响,探讨性腺抑制激素(GIH)在性腺发育过程中的调控机制,结果表明:DMC1和VASA只在凡纳滨对虾精巢和卵巢中表达;摘除眼柄后,精巢和卵巢中DMC1表达量均显著性降低(P0.05),而注射眼柄粗提物后精巢和卵巢中DMC1表达显著增高(P0.05);相反,摘除眼柄后,精巢和卵巢中VASA以及卵巢中VTG基因表达量显著增高,但注射眼柄粗提物后性腺中的VASA和卵巢中的VTG表达量显著降低。结果表明眼柄粗提物通过影响生殖相关基因的表达影响凡纳滨对虾的性腺发育。     

绣线菊内生真菌的分离及对植物病原菌的抑制作用

采用组织分离法,以PDA培养基为分离培养基,从绣线菊的根、茎和叶中分离获得39株内生真菌。平板对峙结果表明, 21株活性菌株对6种植物病原菌（辣椒疫霉病原菌、番茄枯萎病原菌、苹果腐烂病原菌、苹果炭疽病原菌、葡萄灰霉病原菌、小麦赤霉病原菌）有不同程度的抑制作用,其中菌株XXT10对苹果腐烂病原菌、苹果炭疽病原菌、番茄枯萎病原菌、小麦赤霉病原菌的抑制率分别达到73.2%、72.5%、39.5%和42.7%。通过测得的ITS rDNA 序列与GenBank数据库中已知序列比对后该菌为链格孢属菌。生物学特性试验表明,该菌株在28～32℃时,选择PDA培养基,分别以乳糖和蛋白胨作为碳、氮源,酸碱度中性的条件下,菌落的生长状况最佳。     

TmFAD2和BnFAD3双基因载体的构建及转化株脂肪酸分析

必需脂肪酸亚油酸(18∶2)和亚麻酸(18∶3)在植物中的合成过程一直备受研究者的关注。本研究利用旱金莲中合成亚油酸的油酸脱饱和酶基因TmFAD2及甘蓝型油菜中合成亚麻酸的亚油酸脱饱和酶基因BnFAD3,在pRD400骨架载体的基础上,构建同时表达TmFAD2和BnFAD3的串联双价载体pSFF。通过农杆菌介导的花序浸蘸法完成pSFF对拟南芥哥伦比亚野生型的转化,观察发现转基因植株的第1对真叶有不同程度的畸形。按照畸形程度将其划分为4个等级,气相色谱分析4个等级叶片及其后代种子中脂肪酸的组成及含量,发现随着畸形程度的增高,叶片和种子中亚麻酸C18∶3含量都呈现降低的趋势。     

小立碗藓PpLBD20基因敲除载体的构建及功能研究

LBD(Lateral organ boundaries domain)是植物中特有的基因家族.前期研究发现灰霉菌处理小立碗藓导致配子体中的PpLBD20上调表达,但PpLBD20的功能尚不明确.因此提取小立碗藓DNA,PCR扩增PpLBD20基因的上下游片段,依次插入PTN182载体,利用同源重组原理构建敲除表达载体,酶切和测序验证插入序列的正确性.通过工作浓度为20％的PGE 6000介导小立碗藓原生质体转化,筛选鉴定得到敲除PpLBD20后的突变体植株,观察到敲除后小立碗藓不形成茎叶体结构且配子体成丝状.结果为深入探究PpLBD20在小立碗藓的形态建成调控病原菌侵染的抗性作用奠定基础.     

结球甘蓝类钙调蛋白基因 CML48和 CML50在不同胁迫下的表达分析

为探究结球甘蓝类钙调蛋白（CMLs）响应不同胁迫时的功能,丰富CMLs参与钙信号网络调控,为CMLs参与植物逆境途径及其功能的研究提供依据。以结球甘蓝ZG为材料,克隆得到 CML48和 CML50基因,序列分析表明 CML48开放阅读框（ORF）为672 bp,含4个内含子,编码223 aa,分子量为25.28 ku; CML50开放阅读框ORF为1 095 bp,编码364 aa,分子量为38.06 ku,含3个内含子;均为亲水蛋白,均含有2个EF-hand结构域;系统发育树表明 CML48和 CML50均与甘蓝处于同一进化枝,与白菜、油菜的亲缘关系最近。qPCR表明 CML48和 CML50在干旱(PEG6000)、盐胁迫(NaCl)、低温(4 ℃)、高温(37 ℃)、H₂O₂、脱落酸（ABA）、水杨酸（SA）和茉莉酸甲酯（MeJA）等不同胁迫处理下,在叶和根中的表达均有上调,且 CML50的表达量均显著高于 CML48, CML48在茎尖中高度响应高温胁迫,而在根中不响应高温和H₂O₂胁迫。初步说明 CML48和 CML50在根和叶中均可响应上述8种非生物胁迫。     

新疆野生樱桃李PsoRPM2与PsoLFY互作调控植株开花的分子机制

为明确新疆野生樱桃李PsoRPM2基因引起植株的早开花现象，本研究通过形态学、转基因以及酵母双杂等试验对PsoRPM2基因进行了分析。结果显示:新疆野生樱桃李极早花、早花、中花、晚花和极晚花的比率分别为11%、24%、44%、18%和3%。早花类型的花芽分化明显快于晚花类型，早花花芽中的PsoLFY和PsoFT基因表达高于晚花，而PsoFLC基因则在晚花中表达较高。转PsoRPM2基因烟草表现为早花，并且NtLFY基因表达明显升高。在新疆野生樱桃李早花花芽中，PsoRPM2基因表达高于晚花，同一时期的PsoLFY基因表达也较高。酵母双杂试验显示，PsoRPM2与PsoLFY可以互作。综上，新疆野生樱桃李之所以早花是通过PsoRPM2与PsoLFY互作，提高花芽中PsoLFY和PsoFT基因表达，从而加快花芽分化进程，导致植株提前开花。