红芸豆根腐病拮抗内生细菌的筛选和鉴定

为获得对红芸豆根腐病菌具有良好拮抗效果的菌株，研究采用组织分离法，从苍耳中分离内生细菌，以红芸豆根腐病菌尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)为靶标菌，通过平板对峙法、形态特征观察和分子生物学方法进行拮抗细菌的筛选和鉴定，采用共培养法研究拮抗细菌对尖镰孢菌的抑制作用，并测定拮抗细菌抑菌谱及其对红芸豆种子萌发的影响。结果表明，从苍耳根、茎、叶中共分离得到36株内生细菌，从中筛选到对尖镰孢菌具有明显抑制作用的菌株xj-1-2。结合形态学和gyrB基因序列分析，结果将菌株xj-1-2鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis);xj-1-2能导致尖镰孢菌菌丝分枝增多，产孢量减少；在4、6、8 h时对孢子萌发抑制率分别为100%、79.45%、73.54%。该菌株具有广谱抑菌活性，对厚垣镰孢菌、三线镰孢菌、芬芳镰孢菌等8种病原真菌均具有不同程度的拮抗作用。分别用浓度为1×10⁷、1×10⁸、1×10⁹ cfu/mL的xj-1-2菌悬液和发酵液处理红芸豆种子后，发芽率和芽长与对照相比均无显著差异，说明x...     

山西晋中地区植物病原镰刀菌(Fusarium)种类鉴定

通过对采自山西晋中地区57种不同罹病植物上的镰刀菌进行分离筛选,采用保湿分离和单孢子分离共得到46株镰刀菌菌株,其中34株有大小型分生孢子,12株只有小型分生孢子。运用传统镰刀菌分类鉴定方法对这34株有大小型生孢子的菌株鉴定,结果表明,它们分属于12个种和2个变种,其中8株尖孢镰刀菌、5株茄病镰刀菌、4株半裸镰刀菌、3株尖孢镰刀菌芬芳变种、3株串珠镰刀菌、2株茄病镰刀菌蓝色变种、2株锐顶镰刀菌、1株禾谷镰刀菌、1株接骨木镰刀菌、1株镰状镰刀菌、1株束梗镰刀菌、1株黄色镰刀菌、1株木贼镰刀菌和1株砖红镰刀菌。     

灰树花交配型鉴定分析

[目的]鉴定灰树花交配型,为灰树花杂交育种提供理论依据.[方法]灰树花孢子萌发后挑取单孢进行镜检,收集孢子单核体;采用原生质体单核化获得原生质体单核体并通过互配确定标准测交菌株T1和T2;采用标准测交菌株与孢子单核体配对及孢子单核体互配后,进行孢子单核体交配型分类,并利用核迁移试验和OWE-SOJ技术鉴定孢子单核体交配型.[结果]分离鉴定获得7 1株灰树花孢子单核体菌株,原生质体单核化获得17株原生质体单核体菌株,其中标准测交菌株Tt(A1B1)10株、T2(A2B2)7株;鉴定71株孢子单核体分别为T1、T2、T3和T4型,其中T1型28株、T2型35株、T3型4株、T4型4株;核迁移试验鉴定T1、T2、T3和T4的交配型分别为A1B1、A2B2、A2B1和A1B2,OWE-SOJ鉴定结果分别为A1B1、A2B2、A1B2和A2B1.[结论]灰树花属于四极性交配型系统,其交配型分析应以核迁移试验为准,OWE-SOJ技术不适用于灰树花的交配型分析.     

不产子实体蛹虫草单孢子分离株的获得及RAPD分析

对优势蛹虫草原始菌株WWM04进行单孢子分离,共获得9个单孢子分离株,采用米饭培养基培养确证并且获得6个完全不产子实体的单孢子分离株。利用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记方法对菌落差异的4个菌落特征典型的不产子实体单孢子分离株(SSP2、SSP7、SSP19和SSP21)、原始菌株以及由原始菌株12次转接后退化的菌株进行遗传多样性分析。结果表明,引物S37、S61对6个菌株的扩增谱带具有非常明显的特异性,该结果为蛹虫草退化分子标记奠定基础,并且在一定程度上也印证了蛹虫草异核现象和准性生殖理论。     

蛹虫草无性单孢菌株的分离及其配对选育

分别以菌株JW14-1和CW15为材料,分离出只具有交配型Ⅰ基因的无性单孢子和只具有交配型Ⅱ基因的无性单孢子,将这2种无性单胞菌株进行配对,通过测定虫草素含量对配对后的变异株进行选育,获得2株虫草素含量显著增加的优良变异菌株;进一步利用RT-PCR技术检测虫草素合成相关基因的表达情况。结果表明:虫草素含量高的菌株6号配对株中腺苷酸琥珀酸合成酶基因的表达水平最低,而5′-nucleotidase基因和嘌呤核苷磷酸化酶基因的表达水平则最高。该研究为蛹虫草的定向选育提供了新的思路。     

紫外线诱变白灵菇K5担孢子研究

采用紫外照射法对白灵菇K5的担孢子进行诱变处理。结果表明:在紫外灯功率为15 W,照射距离为20 cm,诱变时间为7 min条件下,白灵菇K5致死率可达到74.29%。同时,通过初筛获得白灵菇K5生长状况良好的单孢菌株5株,确定其为下一步白灵菇诱变育种工作菌株。     

麻疫霉对甲霜灵抗性的遗传研究

在实验室条件下研究了苎麻疫霉（ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｂｏｅｈｍｅｒｉａｅＳａｗａｄａ）对甲霜灵抗性的特点和遗传规律。结果表明：苎麻疫霉易对甲霜灵产生抗性，抗性水平可达野生型亲本的１８００倍以上，但抗性遗传不稳定；抗甲霜灵（Ｍｒｔ）突变株ＥＣ３１的Ｍｒｔ性状在游动孢子后代中发生连续分离，其余突变株的Ｍｒｔ性状经一代单游动孢子分离后完全丧失；Ｍｒｔ单游动孢子株在不含甲霜灵的利马豆培养基（ＬＢＡ）平板上培养１０～１４ｄ后对甲霜灵的抗性下降或丧失，其游动孢子后代中Ｍｒｔ个体比例相应减少；而在含甲霜灵的ＬＢＡ上，Ｍｒｔ单孢株的Ｍｒｔ性状可以保持一个月以上，且随着与甲霜灵接触时间的增加，其游动孢子后代中Ｍｒｔ个体比例有上升趋势。     

球孢白僵菌对浙江双栉蝠蛾幼虫的致病力研究

应用8株球孢白僵菌[Beauveria bassiana(Bals.) Vuill]菌株分别对浙江双栉蝠蛾幼虫进行致病力测定,结果表明:以浓度(1.0±0.5)×106孢子/mL的孢子悬液接种12d后,B3菌株对该虫有较强的致病力,其校正死亡率、僵虫率分别为(90.71±2.16)％和(87.07±0.95)％,致死中时(LT50)最短(6.20 d),且具较高的僵虫虫体含孢量(5.75×1010孢子/虫),该菌株对幼虫致死效应较强的时间在第6至第8d.接菌后在第5天和第6天,B3菌株对该虫的LC50分别为1.35×108孢子/mL和1.23×106孢子/mL.B3菌株有较大的开发应用价值,B187菌株也有一定的应用潜力.     

苎麻疫霉对甲霜灵抗性的遗传研究

在实验室条件下研究了苎麻疫霉对甲为抗性的特点和遗传规律。结果表明：苎麻疫霉易对甲霜灵产生抗性，抗性水平可达野生型亲本的１８００倍以上，但抗性遗传不稳定；抗甲霜灵突变株ＥＣ－３－１的Ｍ性状在游动孢子后供中发生连续分离，其余突变株的Ｍ性状经一代单游动孢子分离后完全丧失；Ｍ单游动孢子株在不含甲霜灵的利马豆培养基平板上培养１０－１４ｄ后对甲霜灵的抗性下降或丧失，其游动孢子后代中Ｍ个体比例相应关少；而在含甲     

水稻恶苗病化学防治药剂的筛选

用不同药剂(单剂和混剂)对水稻恶苗病菌菌丝生长和孢子萌发进行了毒力测定试验,结果表明:单剂中,施宝克、使百克和浸种灵的抑制作用明显,抑制菌丝生长的EC50分别为0.147 3、1.464 5和9.244 5 μg/m l.抑制孢子萌发的EC50分别为0.984 2、3.757 4和0.804 1 μg/ml.混剂中,施宝克+百菌清和使百克+多菌灵的抑制作用明显,抑制菌丝生长的EC50分别为0.047 8和0.036 3 μg/ml,共毒系数分别为615和7 893, 抑制孢子萌发最好的为施宝克+百菌清和使百克+浸种灵,EC50分别为0.059 7和0.089 4 μg/ml,共毒系数分别为3 253和1 482.     

局部应用IL-12对小鼠S180实体瘤的抗瘤效应及机制初探

目的研究白细胞介素-12（Interleukin 12,IL-12）对小鼠S180实体瘤的抗肿瘤作用并初步探讨其机制.方法将小鼠左后肢皮下接种S180细胞荷瘤后的BaLB/c小鼠随机分为生理盐水组和IL-12组,分别给予生理盐水和IL-12.接种第28天,眼球取血,流式细胞仪分析外周血T细胞亚群的变化;解剖取瘤称重,计...     

分叉小猛水蚤的外部形态和发育特征研究

研究了分叉小猛水蚤Tisbefurcata的外部形态和发育特征。结果表明：分叉小猛水蚤为雌雄异体,前体部并不显著宽于后体部,头节与第一胸节愈合,额部突出,身体的活动关节在第四和第五胸节之间。第一触角呈单肢型,分为八节,第二触角为双肢型;第一至第四胸足均为双肢型,内肢为两节,外肢为三节,每对胸足之间具一个几丁质板,第五胸足为一节,附4根刚毛。雌性腹部第一、二节愈合成生殖节,生殖节上有两个卵囊。分叉小猛水蚤卵径为20～25μm。在温度为（21±1）℃、盐度为32±1、pH为7．8的条件下,胚胎发育时间共需28—30h。无节幼体Ⅰ～Ⅵ期的累计发育时间分别为（3±1．5）、（11±1．2）、（30±1．2）、（45±1．0）、（62±1．0）、（75±1．2）h,平均体长分别为0．080、0．106、0．144、0．196、0．225、0．268mm;桡足幼体I～V期的累计发育时间分别为（100±2．0）、（128±1．5）、（153±1．0）、（178±1．2）、（204±1．5）h,平均体长分别为0．311、0．468、0．539、0．726、1．036mm;一龄桡足幼体成体的雌雄发育时间均为（232±1．5）h,平均体长分别为1．086mm和1．125mm。     

高产蛋鸭配套系的选育

从福建龙岩蛋鸭原种场选择7个蛋鸭品种（品系）S,、S2、S3、J、P、F、K,组建5组不同的三系杂交配套组合：Jδ×（Fδ×S1δ）、Pδ×（Fδ×S3辛）、Fδ×（Pδ×S2δ）、Fδ×（KδXS2δ）、Fδ×（PδXS3δ）．5个配套系商品代经500日饲养试验测定,筛选出生产性能最优的2个配套系为青壳蛋系Jδ×（FδXS1δ）、白壳蛋系Fδ×（PδχS3δ）．青壳蛋系的产蛋率达50％时,平均日龄（118±2．45）d,平均体重（1595．6±22．5）g,500日龄的产蛋数、总蛋重、蛋重、料蛋比分别为（330．6±4．29）枚、（22．694-0．21）kg、（72．50±0．20）g、（2．864±0．03）：1;自壳蛋系的产蛋率达50％时,平均日龄（114．7±1．25）d,平均体重（1526．6±12．31）g,500日龄的产蛋数、总蛋重、蛋重、料蛋比分别为（335．29土1．8）枚、（23．224±0．17）kg、（71．364±O．05）g、（2．77±0．01）：1．可见,2个配套系的生产性能均达国内领先水平,具有推广应用价值．     

不同营养水平对虹鳟肌肉组织学的影响

[目的]探究不同营养水平对虹鳟肌肉组织学的影响。[方法]设计4种不同蛋白质水平(4种蛋白质水平分别为40.15%、38.92%、37.69%和36.45%)的基础日粮,通过显微镜对组织切片的观察,研究不同营养水平对虹鳟肌肉组织学的影响。[结果]随着基础日粮中蛋白质水平的增加,虹鳟肌肉肌纤维密度减小、肌纤维直径增大。其中,高蛋白质水平组(粗蛋白含量40.15%)肌纤维密度最小,4周时为(426.59±6.41)n/mm2,8周时为(395.43±13.26)n/mm2,肌纤维直径最大,4周时达到(50.92±3.17)μm,8周时达到(54.82±6.22)μm;低蛋白质水平组(粗蛋白含量36.45%)肌纤维密度最大,而肌纤维直径最小,4周时分别为(617.76±7.02)n/mm2、(44.67±0.86)μm;8周时分别为(543.67±2.65)n/mm2、(48.31±3.41)μm。[结论]为虹鳟的理论研究和生产实践提供了依据。     

吉林梅花鹿发情期卵泡发育波研究

本研究通过直肠B超技术监测了经过2种同期发情处理（CIDR＋PG＋PMSG和1G）的9头吉林梅花鹿发情周期卵泡动态发育情况。实验得出：梅花鹿的卵泡发育均呈波形发育,1个发情周期由1—3个卵泡波组成。3个1波周期,3个2波周期,2个3波周期。1波周期的长度是5．3d±0．6d,2波周期的长度是12．3d±4．0d,3波周期的长度是25．5d±2．1d。未发情的216号梅花鹿在整个观察期中出现2个卵泡发育波,而未发情的1号鹿卵泡发育没有出现明显的波。1波周期梅花鹿的最大卵泡平均直径（5．4mm±0．5mm）,比2波周期中第1个（5．1mm±0．6mm）和第2个内波的最大卵泡平均直径（4．8mm±0．5mm）和3波周期中第2个内波的最大卵泡平均直径（5．2mm±0．4mm）都大（P〉0．05）,比3波周期中第1个和第3个内波的最大卵泡平均直径（分别是5．6mm±0．3mm和5．7mm±1．1mm）小（P〉0．05）。2波和3波周期中的所有内波的最大卵泡平均直径差异显著（P〈0．05）,2波周期中的最大卵泡比3波周期中的直径小。2波周期的内波间隔（6．0d±1．4d）比3波周期的所有内波间隔（9．8d±1．5d和5．7d±1．rid）明显短（P〉0．05）。1波周期生长持续期是4．5d±0．7d,2波周期生长持续期（4．7d±1．5d和4．0d±1．7d）和3波周期中卵泡的生长持续期（4．5d±2．1d、6．5d±2．1d和2．5d±0．7d）差异不显著（P〉0．05）。2波周期中第1波（0.5mm／d±0．3mm／d）和第2波的生长速率（0．5mm／d±0．2mm／d）没有显著差异（P〉0．05）。排卵波和闭锁内波的卵泡生长持续期也没有显著差异（P〉0．05）。     

不同饵料及投喂方式对中间球海胆生长及性腺发育的影响

为研究不同饵料模式及投喂方式对中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)生长及性腺发育的影响。采用不同饵料模式（M1：海带、M2：海带+贻贝、M3：南瓜、M4：胡萝卜）和不同投喂方式（RM1：饲喂南瓜75 天后饲喂海带75 天;RM2：饲喂胡萝卜75 天后饲喂海带75 天）两种实验方案,以M1模式为对照组,对中间球海胆生长指标及性腺性状进行测量并分析,实验周期150 天。结果显示：不同饵料模式下,M1(57.84±3.25) mm、(72.58±11.07)g 和M2(56.60±2.66) mm、(69.62±8.94)g 模式的海胆壳径及活体重差异不显著(P>0.05),二者极显著(P<0.01)高于M3(53.10±2.28) mm、(57.31±8.18) g 和M4(50.12±1.70) mm、(50.45±4.27) g 模式;M2模式下雌、雄海胆的性腺指数(31.22±3.31)%、(30.92±2.76)%均极显著(P<0.01)高于其他3 种饵料模式;M2模式下雄海胆的亮橙黄色差ΔE1和亮黄色差ΔE2均显著(P<0.05)优于对照组（M1模式）,雌海胆ΔE1、ΔE2则与对照组差异不显著(P>0.05),表明：添加动物性蛋白（M2模式）对促进海胆性腺指数、性腺品质的提升效果显著(P<0.05),但对其生长影响不显著(P>0.05)。不同投喂方式下,RM1(55.46±2.19) mm模式的海胆壳径显著低于对照组(57.84±3.25) mm (P<0.05),活体重(68.63±7.39) g 与对照组(72.58±11.07) g 差异不显著(P>0.05),RM1 和RM2 模式下海胆在75~150 天的壳径增长率(12.55±0.22)%、(12.68±1.78)%和增重率(29.60±4.20)%、(30.53±2.09)%均显著高于对照组(9.79±0.97)%、(19.86±4.86)%(P<0.05);海胆性腺指数在不同性别不同模式间均差异不显著(P>0.05);RM1和RM2模式下海胆的亮橙黄色差ΔE1和亮黄色差ΔE2均差异不显著(P>0.05),二者显著(P<0.05)优于对照组且在性别间表现一致,表明：饲喂南瓜75 天后饲喂海带75 天的投喂方式不会显著(P>0.05)影响海胆活体重的增加,且对海胆性腺指数及性腺品质的提升有一定的促进作用。本研究以期找到提高海胆生长及性腺品质的饵料投喂模式,为海胆工厂化养殖环节中替代饵料及投喂方式的选择提供参考。     

翘嘴鳜、斑鳜及其杂交后代的胚胎和胚后发育比较

利用人工催产、人工授精的方法取得翘嘴鳜Siniperca chuatsi、斑鳜Siniperca schezeri及其正反交杂交后代的受精卵,在常温下对翘嘴鳜、斑鳜及其杂交后代的胚胎和胚后发育进行了观察与比较。结果表明：4种卵子中,斑鳜及以斑鳜为母本杂交种的卵子大于翘嘴鳜及以翘嘴鳜为母本杂交种的卵子,前者直径为（1.86±0.07）mm,后者为（1.08±0.06）mm。在外部条件相同的情况下,4种胚胎发育时序基本以母本为基准,即以翘嘴鳜为母本的杂交种胚胎发育时序与翘嘴鳜的相同,以斑鳜为母本杂交种的则与斑鳜相同。在水温28.0～30.0℃下,以翘嘴鳜为母本的两种胚胎孵化需时约34 h,而在26.5～30.0℃下,以斑鳜为母本的两种胚胎孵化需时约91 h。以斑鳜为母本的初孵仔鱼比较大,全长为（4.60±0.07）mm,以翘嘴鳜为母本的初孵仔鱼全长为（4.00±0.05）mm。     

杂色鲍野生群体与养殖群体自交和杂交子一代的育苗及工厂化养殖

利用采自越南海域的杂色鲍（Haliotis diversicolor）野生群体（Y）及取自湛江海域的九孔鲍（H diversi-color supertexta）养殖群体（z）进行群体间的杂交和群体内自繁,并对子一代F,的育苗及工厂化养殖效果进行比较。结果表明：各交配组合F,代的受精率、孵化率及幼体附着率均无显著差异（P〉0．05）;稚鲍培育期及工厂化养殖过程中,正交与反交组合F。代的壳长和成活率均显著大于自交组合组（P〈0．05）;受精360d后,正、反交组合野生鲍自繁（YY）及养殖鲍自繁（zz）F,代的壳长分别为（51．6±6．8）mm,（49．9±6．7）mm,（44．3±5．4）mm,（41．7±4．6）mm,成活率分别为（87．8±5．0）％,（89．2±4．4）％,（54．5±2．8）％,（73．1±2．4）％;野生鲍自繁（YY）F,代的壳长显著大于养殖鲍自繁（ZZ）组（P〈0．05）,但成活率显著低于养殖鲍自繁（ZZ）组。杂交组合所显示出的良好的杂种优势和对环境的适应能力表明,群体间的杂交将可能是养殖杂色鲍遗传改良的有效途径。     

大黄和公丁香对致病性哈氏弧菌及其生物膜的体外抑制作用

[目的]观察大黄（Rheum officinale）和公丁香（Flos caryophylli对哈氏弧菌（Vibrio harveyi）及其生物膜（Biofilm）的体外抑制作用.[方法]采用琼脂扩散法测定大黄和公丁香对哈氏弧菌的体外抑菌作用;采用倍比稀释法测定大黄和公丁香对哈氏弧菌最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）;采用MTT法评价2种中草药液对哈氏弧菌生物膜形成的影响.[结果]大黄对哈氏弧菌的抑菌圈直径为（15.31±0.4）mm,MIC和MBC均为7.813 mg/m1;公丁香对哈氏弧菌的抑菌圈直径为（11.53±0.6）mm,MIC和MBC分别为15.625和62.5 mg/ml;2种中草药液浓度分别在7.81和0.97 mg/ml以上时对生物膜的形成有极显著抑制作用（P＜0.01）.[结论]大黄和公丁香对哈氏弧菌及其生物膜均有明显抑制作用,其中大黄的作用比公丁香更强.     

Pokemon敲减对结肠癌Lovo细胞周期、迁移和侵袭能力的影响

目的观察Pokemon敲减对结肠癌Lovo细胞周期、迁移和侵袭能力的影响。方法转染shRNA质粒构建Pokemon敲减的稳定细胞株Lovo-KD和阴性对照细胞株Lovo-NC,用荧光定量PCR检测Pokemon基因敲减效率,流式细胞术检测细胞周期变化,Transwell实验观察细胞迁移和侵袭能力。结果与Lovo-NC细胞比较,Lovo-KD细胞Pokemon mRNA水平下降65.0%（P〈0.01）,G1期细胞比例升高[（56.7±0.8）%vs（26.7±1.6）%,P〈0.01],迁移细胞数[（8±4）vs（189±19）个/视野,P〈0.01]和侵袭细胞数[（6±3）vs（183±13）个/视野,P〈0.01]减少。结论 Pokemon基因敲减可将Lovo细胞阻滞于G1期,使细胞迁移和侵袭能力显著下降。