2种基因型大白菜高效子叶离体不定芽再生研究

以2个优质大白菜材料德高早熟长江5号(DG)和双耐(SN)的子叶为外植体,研究了不同激素配比、苗龄和AgNO3浓度对子叶不定芽再生的影响,建立了2种大白菜的子叶不定芽高效再生体系,为进一步有效的利用基因工程技术改良大白菜品种奠定了基础.结果表明:与6-BA相比,TDZ对诱导子叶不定芽再生更有效.在单独附加细胞分裂素(6-BA或TDZ)的MS培养基上,不能诱导子叶不定芽的分化.DG在MS+ 1.5 mg/L TDZ+0.2 mg/LNAA+6 mg/L AgNO3分化培养基上再生频率最高,为73.80％,最适苗龄为6d,平均再生系数为4.27.SN在MS+1 mg/L TDZ +0.4 mg/L NAA+6 mg/L AgNO3分化培养基上再生频率最高,为59.09％,最适苗龄为6d,再生系数为4.03.     

玫瑰叶片直接再生及其影响因素

以‘唐白’、‘紫枝’、‘唐红’和‘朱龙游空’4个玫瑰品种为试材研究不同的外植体、暗培养时间和激素组合对玫瑰不定芽直接诱导和植株再生的影响。结果表明:4个玫瑰品种在不定芽诱导培养基上黑暗培养10~15d转入光照培养15~20d,而后转入含有0.5mg/L BA和0.01mg/L NAA的MS培养基光下培养,再生效果最好;不同外植体间存在显著差异,未展开小叶的再生能力最好;不同基因型之间存在显著差异,‘唐白’在添加1.0mg/L TDZ、0.05mg/L NAA的1/2MS培养基中再生率最高,达到70.6%;‘紫枝’和‘唐红’在添加1.5mg/L TDZ、0.05mg/L NAA的1/2MS培养基中再生率最高,分别为47.9%和36.5%;‘朱龙游空’在添加1.0mg/L BA、0.3mg/L TDZ和0.05mg/L NAA的1/2MS培养基中再生率最高,达到60%。黑暗培养对不定芽分化有一定的促进作用,但不利于不定芽再生,‘唐白’、‘紫枝’和‘朱龙游空’的最佳暗培养时间为10d,而‘唐红’的最佳暗培养时间为15d。另外,4个玫瑰品种在添加有IBA 0.5mg/L的1/2MS培养基上生根率最高。     

辣椒组织培养再生体系的影响因素研究

以早熟辣椒、红线辣椒、茄门大辣椒(绿辣椒)3个品种为材料,研究了辣椒组织培养再生体系的影响因素。结果表明:红线辣椒为最佳基因型,辣椒离体再生最适外植体为茎段、子叶。诱导茎段愈伤生成的最佳培养基为MS+0.10 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA;子叶愈伤生成的最佳培养基为MS+0.10 mg/L6-BA+4.0 mg/L NAA;高效不定芽分化培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA;高效不定根分化培养基为MS+0.5 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA。     

山杏下胚轴再生植株的研究

研究了影响山杏下胚轴再生的有关因素,首次获得了山杏下胚轴再生植株。结果表明,经15d的暗培养,山杏下胚轴切段在附加TDZ2mg/L+NAA0.5mg/L的改良MS培养基(1/2NH4NO3)上,愈伤组织诱导率(100%)和再生频率(37.5%)均最高,细胞分裂素用TDZ效果优于6-BA,再生获得的不定芽在改良MS+IBA0.2mg/L培养基上生根率为75.8%。     

非洲菊花托的体细胞胚发生及植株再生

以非洲菊花托为外植体进行体细胞胚发生及植株再生研究。结果表明:非洲菊体细胞胚发生的适宜培养基为MS+BA 8 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+PIC 0.2 mg/L+TDZ 0.03 mg/L;以外植体初始培养时,先进行弱光照(400 lx)培养8 d,再置于强光照(2 500 lx)培养为宜,此条件下,体细胞胚再生率可达51.9%。外植体诱导培养40 d后开始有体细胞胚发生,50 d左右可达到发生高峰,体细胞胚的发生、发育是不同步的。将非洲菊成熟子叶胚转接于分化培养基:改良MS+KT 0.2 mg/L+IAA 0.2 mg/L,成苗率达100%。     

‘长富2号’红富士苹果离体叶片高效再生不定芽技术研究

以‘长富2号’(Nagafu No.2)红富士苹果试管苗为试材,研究了BA和TDZ组合、不同浓度的TDZ、糖的种类和不同暗培养时间对红富士苹果离体叶片再生不定芽的影响。结果表明:高浓度的TDZ可以有效提高红富士苹果离体叶片再生效率;最适宜叶片再生的糖类为蔗糖,最适宜的暗培养时间为3周,最佳的叶片再生培养基为MS+TDZ 6.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖35 g/L+琼脂6.2 g/L。在上述培养条件下,‘长富2号’红富士苹果离体叶片再生率达到100%,平均叶片再生芽数达到10.6个。     

酿酒葡萄“赤霞珠”叶片和叶柄离体再生系统建立的研究

以赤霞珠叶片、叶柄为材料,研究了细胞分裂素(TDZ)、不同基本培养基、叶柄砧有无对其不定芽再生的影响。结果表明:TDZ对赤霞珠离体叶片、叶柄不定芽再生有诱导作用,对叶片、叶柄的最高诱导率分别为18.06%和28.57%;叶片再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L,叶柄再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.01mg/L,叶片不定芽生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+20g/L蔗糖。     

‘辽峰’葡萄叶片不定芽再生研究

以‘辽峰’葡萄试管苗叶片为试材,探讨了基本培养基、不同激素组合和暗培养对试管苗叶片不定芽诱导的影响。结果表明,基本培养基、不同激素组合和暗培养对叶片不定芽再生均起着重要的作用,叶片不定芽诱导最佳培养基为1/2 MS+NAA 1.2 mg/L+TDZ 3.0 mg/L,先暗培养14 d后转入光下常规培养,‘辽峰’叶片不定芽再生效果最好,不定芽再生率高达88.09%。     

2苹果品种叶片胚状体再生体系的建立

以苹果“富士”和“鲁加6号”为材料,建立叶片胚状体再生体系。结果表明:先经胚性细胞诱导培养基MS+BA1.0 mg·L^-1+NAA5.0 mg·L^-1+TDZ0.5 mg·L^-1诱导胚性细胞,再置于胚胎发育培养基MS+BA1.0 mg·L^-1+NAA0.1 mg·L^-1上进行暗培养,最佳时间为10 d,2品种叶片再生率分别为96.7%和100%。经胚状体不同时期形态学组织学观察,显示胚状体发育时期经历原胚、球形胚、心形胚、子叶形胚、鱼雷形胚、成熟胚等阶段。“鲁加六号”苹果最佳生根培养基为1/2MS+IAA0.1 mg·L^-1+IBA0.1 mg·L^-1,生根率达86.7%。     

澳洲青苹离体叶片不定芽再生体系的建立

以澳洲青苹试管苗的叶片为外植体诱导不定芽再生,研究不同的BA浓度、TDZ浓度、暗培养时间、叶片放置方式和AgNO3对叶片不定芽再生的影响。结果表明:最适宜的叶片不定芽再生的培养基为MS TDZ 2.0mg/L NAA 0.3 mg/L 琼脂6.0 g/L 蔗糖30.0 g/L和MS BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L 琼脂6.0 g/L 蔗糖30.0 g/L,最适的暗培养时间是20 d,在上述2种培养基中澳洲青苹离体叶片不定芽的再生频率分别达到100.0%和91.7%。     

青州蜜桃、冬桃成熟胚子叶再生不定植株的研究

以青州蜜桃、冬桃成熟胚子叶为外植体 ,研究了利用子叶再生不定梢的适宜培养基。两个品种的子叶在 1 / 2MS附加BA 1 0mg/L和NAA 0 .2mg/L的培养基上获得了最高不定梢再生率。青州蜜桃和冬桃子叶的不定梢最高再生率分别是 6 6 .7%和 5 6 .2 %。不定梢在WPM +BA 2mg/L +IBA 0 .0 1mg/L +GA 0 .5mg/L培养基上增殖培养后 ,转移到 1 / 2MS +IBA 0 .5mg/L +蔗糖 2 0g/L诱导生根 ,两个品种的生根率都在 90 %以上     

百合鳞片薄层细胞培养高效再生体系的建立

为了建立适宜百合遗传转化的受体系统,以铁炮百合品种白天堂无菌苗的叶片和鳞片为外植体,薄层切割后接种于添加不同植物激素的培养基上,观察其植株再生情况,并对其建立的再生体系的遗传转化前景进行了分析比较.结果表明,叶片薄层细胞几乎没有再生能力;2,4-D和Piclofram均可诱导横向薄层鳞片细胞直接产生鳞茎芽,最适的培养基是MS+2,4-D 0.002 mg/L,在30 d内就可直接诱导出鳞茎芽,再生率达到100%,平均出芽数为2.38;MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.5 mg/L可以诱导横向薄层鳞片细胞产生愈伤.综合考虑,百合鳞片薄层培养以MS+2,4-D 0.002 mg/L诱导的直接再生体系为最佳的再生体系.     

月季“月月红”(Rosa chinensis‘Slater’s crimson China’)愈伤组织诱导及植株再生初报

以"月月红"(R.chinensis‘Slater’s crimson China’)的嫩叶为外植体,采用MS为基本培养基,在添加不同浓度的2,4-D、TDZ、GA3和NAA上,结合不同时间的暗培养,研究"月月红"胚性愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明,2,4-D 5 mg/L暗培养20 d诱导出的愈伤组织,在MS+TDZ 1.0 mg/L+GA30.1 mg/L+NAA0.01 mg/L培养基上暗培养12 d,可以获得较好的胚性愈伤组织;胚性愈伤组织转入光照培养15 d后可形成肉眼可辨的子叶期体胚及具有不定芽和胚根的结构,20 d后可长成绿色的小植株。     

剑麻叶片愈伤组织诱导及再生体系的建立

以剑麻幼叶为外植体,进行愈伤组织的诱导试验,建立从愈伤组织到再生植株的培养体系。结果表明：诱导愈伤组织阶段表现最优的配方是N6＋NAA0．2mg／L＋6-BA3．0mg／L,而后愈伤组织转入MS＋TDZ1．0mg／L＋NAA0．05mg／L的培养基中48d便可诱导出芽,在生根培养基MS中生根率可达90％。     

杜仲愈伤组织的诱导及植株再生的研究

在附加不同浓度ＮＡＡ,６—ＢＡ的ＭＳ培养基上对杜仲的下胚轴和子叶进行愈伤组织的诱导并获得两类不同的愈伤组织,一类是白色的结构松散的非胚性愈伤组织,虽然能继代培养,但在附加较高浓度的６─ＢＡ的ＭＳ培养基上都不能再生植株;另一类是黄绿色的结构紧密的有颗粒状突起的胚性愈伤组织．在附加适量的６—ＢＡ的ＭＳ培养基上能较容易再生小植株。实验表明,杜仲的下胚轴和子叶在附加１．０ｍｇ／ＬＮＡＡ和１．０ｍｇ／Ｌ６—ＢＡ的ＭＳ培养基上能１００％诱导成胚性愈伤组织;胚性愈伤组织在附加０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ和２．５ｍｇ／Ｌ６—ＢＡ的ＭＳ培养基上培养,植株再生频率高达９２％;小植株转移到附加１．５ｍｇ／Ｌ的ＩＢＡ的１／２ＭＳ培养基上,１５ｄ左右长出较粗的根。     

肥城桃幼子叶不定植株再生

以我国重要的名特优肥城桃为试材,基本培养基为ＭＳ,细胞分裂素有ＢＡ和ＴＤＺ,生长素有ＩＢＡ和２,４－Ｄ。ＬＨ和蔗糖都分别选用２种浓度,共设计７个处理。结果表明以ＢＡ５ｍｇ／Ｌ,ＩＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ,ＬＨ５００ｍｇ／Ｌ,蔗糖３％的培养基诱导子叶不定梢再生率最高,达７８％,其他６种不同处理,子叶不定梢再生率都很低。     

野生紫斑百合高效离体再生体系的建立

 采用丽江野生紫斑百合鳞片为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度激素,进行鳞片分化诱导、增殖和生根培养,筛选适宜激素浓度配比。结果表明：鳞片可以通过愈伤诱导发生途径再生,从愈伤组织上直接形成不定芽,最佳愈伤诱导培养基为MS+0.5mg/L TDZ+0.5mg/L NAA,诱导率为45.00%;不定芽增殖最佳培养基为MS+1.0mg/L 6BA+0.5mg/L NAA,增殖率为72.58%;最佳生根培养基为1/2MS + 1.5mg/L IBA,生根率达到93.33%。     

白玉彩椒子叶离体诱导不定芽的研究

以子叶为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的激素配比进行白玉彩椒子叶离体诱导不定芽试验。结果表明:将白玉彩椒播种繁殖萌发的子叶切成5 mm见方,转入到MS+NAA 0.6 mg/L培养基上,诱导愈伤组织的效果最好,然后将形成的愈伤组织切块转入到不定芽诱导培养基MS+6BA 0.4 mg/L+NAA 0.2mg/L或MS+KT1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L配方中,诱导不定芽的效果较好。     

菜薹组织培养和植株再生研究

对6个菜薹品种的4种不同外植体进行了组织培养和植株再生研究，结果表明，子叶与茎尖中以分化不定芽，而下胚轴和幼根只能形成愈伤组织及不定根；在MS BA2mg/L NAA1mg/L ABA0.5mg/L AgNO34mg/L培养基上，子叶的不定芽分化频率最高（23．3％），而在MS＋BA1mg/L KT1mg/L NAA0.2mg/L培养基上，茎尖繁殖系统为1．66，快速繁殖效果较为理想，结果还表明，菜薹不同品种间的组织培养能力存在明显差异。