免疫鸡群新城疫病毒强毒株感染的实验研究

ＳＰＦ试验鸡在８、２５日龄时接受了２次新城疫（ＮＤ）基础免疫，６０日龄时分别以标准新城疫病毒（ＮＤＶ）强毒株、中等毒力和弱毒疫苗株人工感染攻毒。应用单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒，对所有试验鸡泄殖腔棉拭样品进行了３０ｄ的连续检测。结果表明：从攻毒后第３ｄ起强毒株试验组检测出多例阳性，检出高峰分别在攻毒后第４～６ｄ和１１～１５ｄ，与鸡群症状表现的时间相一致；中等毒力和弱毒疫苗株对照组均呈检测阴性。本研究证明单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒可以检测免疫鸡群中ＮＤＶ强毒感染，为ＮＤ的监测提供了新手段。     

新城疫单抗酶联试剂盒对鸡群中强毒感染的监测试验

用新城疫(ND)单抗酶联试剂盒检测从疑有新城疫病毒强毒感染的鸡群中采集泄殖腔棉拭样品68份,检出阳性20份。随机对其中15份样品进行病毒分离,结果阳性符合率为100％(15/15)。结果表明,该试剂盒特异性强,灵敏度高,诊断快速,易于基层推广应用。为ND的确诊和免疫鸡群中NDV强毒感染的监测提供了新方法。     

用PCR、斑点杂交及间接免疫荧光试验诊断鸡传染性贫血的初步研究

利用地高辛标记的０８５ ｋｂ 的鸡传染性贫血病毒 （ Ｃ Ａ Ｖ） 核酸探针, 对江苏某地区疑为 Ｃ Ａ Ｖ 的１５～３０日龄病鸡的肝 Ｄ Ｎ Ａ 样品进行斑点杂交。结果在被检的２０份样品中有６份为阳性,阳性率为３０％ 。对相同样品根据已知引物（特异性扩增出 Ｃ Ａ Ｖ 的０５８ ｋｂ Ｄ Ｎ Ａ） 进行 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增, 所得结果与斑点杂交相同。对应的病鸡血清经间接免疫荧光试验 （ Ｉ Ｆ Ａ）, 有７份为 Ｃ Ａ Ｖ 抗体阳性, 与 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增结果的符合率为８３％ 。初步结果表明, 江苏某地区存在 Ｃ Ａ Ｖ 感染。     

免疫鸡群新城疫病毒强毒株感染的实验研究

ＳＰＦ试验鸡在８、２５日龄时接受了２次新城疫基础免疫，６０日龄时分别以标准新城疫病毒强毒株，中等毒力和弱毒疫苗株人工感染攻毒。应用单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒，对所有试验鸡泄殖腔棉拭样品进行了３０ｄ的连续检测。结果表明：从攻毒后第３ｄ起强毒株试验组检测出多例阳性，检出高峰分别在攻毒后第４￣６ｄ和１１￣１５ｄ，与鸡群症状表现的时间相一致；中等毒力和弱毒疫苗株对照组均呈检测阴性。本研究证明单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒     

感染法氏囊病毒雏鸡新城疫2次免疫器官组织的免疫学变化

研究了１日龄感染法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）雏鸡新城疫（ＮＤ）２次免疫及强毒攻击后免疫器官组织中浆细胞，酯酶阳性Ｔ细胞（ＴＡＮＡＥ＾＋），巨噬细胞（ＭФ）和淋巴细胞数量动态变化。结果表明，ＩＢＤＶ感染鸡中枢及外周免疫器官以及呼吸道，消化道局部免疫组织对对ＮＤ苗的２次免疫应答具有明显的增强作用，并提示ＢＤＶ所致的免疫抑制不是可逆的，但不能完全恢复到正常免疫应答水平。     

感染法氏囊病毒雏鸡新城疫2次免疫后免疫器官组织的免疫学变化

研究了１日龄感染法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）雏鸡新城疫（ＮＤ）２次免疫及强毒攻击后免疫器官组织中浆细胞、酯酶阳性Ｔ细胞（ＴＡＮＡＥ＋）、巨噬细胞（ＭΦ）和淋巴细胞数量的动态变化，结果表明，１ＢＤＶ感染鸡中枢及外周免疫器官以及呼吸道、消化道局部免疫组织对ＮＤ苗的２次免疫应答具有明显的增强作用，并提示ＢＤＶ所致的免疫抑制不是不可逆的，但不能完全恢复到正常免疫应答水平。     

应用聚乙二醇介导的单抗夹心ELISA监测湖南新城疫病毒强毒感染

采用新城疫病毒强毒快速检测法聚乙二醇介导的单抗夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）对湖南省新城疫病毒（NDV）强毒感染进行了监测，共检测来自30个新城疫发病群和28个无明显新城疫病症群共58个禽群的泄殖腔棉试样品1719份，并对97份样口进行了病毒分离鉴定。结果表明，NDV强毒感染的禽种多，易与其他疫病混合感染，免疫鸡群在发生形式上呈非典型化趋势，养禽场普遍存在NDV强毒且临诊健康群有一定比例的强毒感染率，这些是目前ND难以控制和净化的主要原因。结果还表明，所采用的ELISA是监测NDV强毒感染并指导免疫的可靠的快速检测方法。     

鸭源新城疫病毒和减蛋综合征病毒在同一鸭胚中增殖的观察

用鸭源新城疫病毒（ＮＤ）Ｄ１０株和减蛋综合征（ＥＤＳ—７６）病毒ＧＣ２株同时在同一鸭胚中复制增殖．结果表明：（１）两种病毒同时感染同一鸭胚后，鸭胚平均死亡时间（ＭＤＴ）７３．６ｈ，死亡率８８．２％（１５／１７）．胚体皮肤出血、淤血，绒毛尿囊膜水肿、增厚，尿囊液能凝集人和鸡红细胞．（２）尿囊液感染鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞，致细胞病变（ＣＰＥ），证实尿囊液中存在ＮＤＶ．用间接法Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ—７６病毒抗原，结果为阳性．（３）电镜观察经提纯浓缩后的尿囊液，可见到两种病毒粒子：ＮＤＶ形态不一，多数直径约１２０～１３０ｎｍ或更大．有囊膜；ＥＤＳ—７６病毒呈圆形，直径约７０ｎｍ，有囊膜．（４）用血凝试验（ＨＡ）测定两种病毒．其生长规律与单独接种时一致．（５）接种灭活的含毒尿囊液的雏鸡，在血清中出现抗两种病毒的ＨＩ抗体及抗ＥＤＳ－７６病毒的中和抗体，对ＮＤＶ强毒攻击有坚强的免疫力。     

应用新城疫诊断试剂盒快速诊断非典型鸡新城疫的研究

应用新城疫单抗酶联诊断试剂盒对３群发生疑似新城疫的鸡群进行了快速诊断。采用肛门泄殖腔棉拭取样方法取样，分别取６０、３５和３８份样品，应用双单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验检测出新城疫强毒抗原阳性分别为５、３和２份样品，诊断该３群发生非典型鸡新城疫。用病毒分离、鉴定和毒力试验的经典诊断方法验证表明，新城疫单抗酶联试剂盒诊断非典型新城疫简便、快速、准确     

鸡非典型新城疫的特点与防制

鸡新城疫（ＮｅｗｅａｓｔｌｅＤｉｓｅａｓｅ，ＮＤ）是一种急性高度接触性和毁灭性败血性传染病，对养鸡业的危害极大。目前，预防接种是控制ＮＤ的主要措施，但有的鸡群接种ＮＤ油乳剂疫苗后１～２个月又发生ＮＤ，且大多以非典型性病征出现，以二免前后的鸡多发。非典型ＮＤ的发病率、死亡率虽然不高，但由于病鸡排毒，使大量强毒滞留鸡场（舍），在一定条件下，强毒就有可能突破某些免疫力不足的鸡的免疫保护，在体内复制增殖，使鸡出现ＮＤ典型症状和病变。所以，研究非典型ＮＤ的特点与防制，具有十分重要的意义。１　非典型ＮＤ的特…     

单抗夹心ELISA检测免疫鸡群新城疫病毒

用SPF鸡胚将送检的免疫鸡群泄殖腔棉拭样品盲传一代，再用新城疫单抗夹心ELISA对F1代尿囊液进行新城疫病毒(NDV)快速检测，同时用世界动物卫生组织(OIE)推荐的NDV分离及鉴定的方法加以验证。通过对3423份样品的检测，检出阳性样品453份，阴性样品2959份，可疑样品11份，两种方法的阳性符合率为99．3％，阴性符合率为99．7％。对全部阳性样品进行病毒分离，经血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验证明均含有新城疫病毒(NDV)，再将全部阳性样品分离物进一步作毒力鉴定，结果有强毒力株、中等毒力株及弱毒力株，因此用新城疫单抗夹心ELISA检测免疫鸡群泄殖腔棉拭样品F1代尿囊液新城疫病毒快速、准确率高，呈阳性者不全是NDV强毒力株感染，还有NDV中等毒力株或弱毒力株感染。     

免疫鸡群感染新城疫强毒后群体带毒情况和对生产指标的影响

应用新城疫病毒单抗ＰＥＧ夹心ＥＬＩＳＡ试剂盒对一新城疫强毒感染群连续监测，检测泄殖腔拭子带毒情况和ＨＩ抗体效价，结果在鸡群发病后３０７ｄ仍可以测出强毒。且随着时间的推移和鸡群ＨＩ抗体水平的下降，强毒感染率呈上升趋势，表明免疫鸡群感染新城疫强毒后，强毒可在群内循环传播和长期维持。     

新城疫病毒和减蛋综合征病毒同鸭胚增殖的研究

鸭源新城疫病毒（ＮＤＶ－Ｄ１０）和减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）可以在鸭胚中同时良好增殖，两种病毒的血凝价分别与单独接种时一致；同胚增殖病毒对鸭胚或ＳＰＦ鸡胚的感染能力和致病性分别与单独接种组无显著差异；利用同鸭胚增殖病毒的尿囊液制备的二联油乳剂灭活疫苗接种免疫鸡可以分别抵抗ＤＮＶ强毒和ＥＤＳＶ强毒的攻击。     

应用新城疫诊断试剂盒快速诊断非典型鸡新城疫的研究

应用新城疫单抗酶联诊断试剂盒对３群发生疑似新城疫的鸡群进行了快速诊断。采用肛门泄殖腔棉拭取样方法取样，分别取６９．３５和３８份样品，应用双单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验检测出新城疫强毒抗原阳性分别为５、３和２份样品，诊断该３群发生非典型鸡新城疫。用病毒分离、鉴定和毒力试验的经典诊断方面验证表明，新城疫单抗酶联诊断非典型新城疫简便、快速、准确。     

应用酚－SDS法提纯新城疫病毒基因组RNA

应用酚－ＳＤＳ法提纯新城疫病毒基因组ＲＮＡ吴艳涛，刘秀梵，张如宽，刘伟忠（江苏农学院动物医学系，扬州２２５００９）新城疫病毒（ＮＤＶ）属副粘病毒科，为有囊膜的单链、负极性ＲＮＡ病毒，基因组ＲＮＡ全长１５ｋｂ。开展ＮＤＶ分子生物学研究，首先需要提取完整...     

免疫鸡群中新城疫强毒感染流行趋势的探讨

采用运用ND单抗酶联免疫试剂盒作为ND流行病学调查手段,对本地区部分免疫鸡群中ND强毒感染进行监测,结合测定个体HI抗体,探讨免疫鸡群中ND强毒感染流行原因和趋势,为制定合理的ND控制计划,尤其在改进免疫程序、降低群体感染水平方面提供依据。     

鸡新城疫、支气管炎、法氏囊病三联弱毒接种雏对新城疫应答效果观察

通过对种毒接种量、比例及接毒时间的调整，促使鸡新城疫（ＮＤ）、支气管炎（ＩＢ）、法氏囊病（ＩＢＤ）三株弱毒在同一鸡胚细胞上增殖并研制成鸡新城疫、支气管炎、法氏囊病三联细胞弱毒，经１６批次五万余只不同品种雏鸡的接种试验及对抽检雏ＮＤ血凝抑制抗体（ＨＩ）检测和ＮＤ标准强毒攻击结果表明：首次接种后１０天的雏鸡ＮＤ血凝抑制抗体达６Ｌｏｇ２以上，与单苗组和混合苗试验组比较无明显差异。且首次接种后３３天和二次接种后３０天，能抵抗ＮＤ标准强毒攻击获１００％保护。     

鸡新城疫马立克氏病二联冻干苗的研究：I.生产工艺

用引进标准的鸡新城Ｌａｓｏｔａ系弱毒和鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒，分别接种鸡胚组织细胞，在恒温条件下培养，按科学方法收毒制成原苗，再将原苗配制成新城疫Ｌａｓｏｔａ系弱毒单苗和鸡马立克氏病弱毒单苗以及鸡新城疫（ＮＤ）尿囊液和鸡马立克氏病（ＭＤ）细胞二联苗和ＮＤ、ＭＤ细胞二联苗，将二联苗、单苗冻干，生产出符合标准的冻干苗。共生产出：ＮＤ尿囊液单菌１００瓶（１万羽份）；ＮＤ细胞单苗１００瓶（１万羽份）；Ｍ     

鸡新城疫,支气管炎,法氏囊病三联弱毒按种雏对城疫答效果观察

通过对种毒接种量、比例及接毒时间的调整，促使鸡新城疫（ＮＤ），支气管炎（ＩＢ），法氏囊病（ＩＢＤ）三株弱毒在同一鸡胚细胞上增殖并研制成鸡新城疫，支气管炎、法氏囊病三联细胞弱毒。经１６批次五万余只不同品种雏鸡的接种试验及对抽检雏ＮＤ血摄制抗体（ＨＩ）检测和ＮＤ标准强毒攻击结果表明：首次接种后１０天的雏鸡ＮＤ血凝抑制抗体达６Ｌｏｇ２以上，与单苗组试验组比较无明显差异。且首次接后３３天和二次种后３０天，     

污染场地雏鸡新城疫法氏囊病的综合控制试验

在鸡法氏囊病（ＩＢＤ）和新城疫（ＮＤ）常发鸡场进行ＩＢＤ、ＮＤ的综合控制试验表明，严格环境卫生、消毒工作是控制污染鸡场ＩＢＤ、ＮＤ发生的关键措施。根据雏鸡ＩＢＤ、ＮＤ母源抗体下降和免疫抗体产生情况，应用合适的疫苗，选择正确的免疫程序，是免疫成功的重要保证。对农村专业户鸡场的雏鸡，在３周龄前进行ＩＢＤ苗的多次免疫或在其母源抗体偏低的日龄（１６～１８日龄）以后进行大剂量的ＩＢＤ（Ｄ７８）疫苗强化免疫均可控制鸡群ＩＢＤ的发生。对ＩＢＤ、ＮＤ发病鸡或其隐性感染鸡群尽早注射高免蛋黄可有效控制病情；注射高免蛋黄后１０天，超常量应用ＩＢＤ疫苗及ＮＤⅣ系疫苗免疫可预防ＩＢＤＤ、ＮＤ的继续感染。