城口县蜜源植物资源分析

通过对城口县辖7镇17乡的蜜源植物进行调查,摸清了该地区蜜源植物的种类、数量及分布,并分析了现有蜜源植物的开发和利用现状,为开发和利用城口县宝贵植物基因库,制定该县蜜粉源植物保护与开发方案奠定基础。调查发现该县蜜、粉源植物共有78科、173属、228种,可以作为主要蜜源植物的达24种。     

猪圆环病毒Ⅱ型核酸诊断方法的建立和初步应用

根据Genebank上已发表的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)序列设计1对引物PL1/PL2,通过对反应条件的优化,建立了有效的猪圆环病毒Ⅱ型的PCR诊断方法,并对沪郊1株PCV-2分离毒进行了检测和测序鉴定,结果显示此株分离毒为PCV-2病毒。结果显示:新建立的PCV-2的PCR诊断方法具有快速、准确等优点。     

猪繁殖与呼吸综合征RT-LAMP检测方法的建立和初步应用

根据Genbank上已报道的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组序列设计了2对LAMP引物(P-F3/P-B3、P-FIP/P-BIP),通过反转录-环介导等温扩增技术(RT-LAMP)反应条件的优化,建立了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RT-LAMP检测方法,并通过酶切的方法对阳性结果进行了验证。本方法最低可以检测到反应体系内1pg的PRRSV的RNA,表明本方法具有较高的检测灵敏度;通过在反应中加入SYBR-Green I荧光染料后可以方便地用肉眼对试验结果进行可视化判定。所以,本研究建立的PRRSV的RT-LAMP检测方法能够满足基层临床PRRSV病原的快速检测要求。     

上海部分鸡场禽沙门菌血清学检测分析

禽沙门菌病是由沙门氏菌属中的任何一个或多个成员引起禽类的一大群急性或慢性疾病。目前有2 500多个血清型,也是家禽最为重要的蛋传细菌病之一。在所有动物中,最常报道的沙门氏菌(鸡白痢沙门菌、禽伤寒沙门菌、副伤寒沙门菌、肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌)绝大部分来源于家禽和禽产品,其中诱发禽副伤寒的沙门菌能广泛感染各种动物和人类。本文通过血清学方法对上海部分鸡场禽沙门菌的抗体情况进行了检测分析。     

鸭肝炎病毒Ⅰ型基因片段的原核表达及单克隆抗体的制备

根据Genebank上已报道的鸭肝炎病毒Ⅰ型基因的全长序列,设计了1对引物,通过RT-PCR方法扩增出特异的DHV-Ⅰ基因片段;将该片段克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌Rosetta-gami(DE3),并用IPTG诱导表达后,通过Ni柱纯化,获得了表观分子量在20kD左右的融合表达蛋白;将表达纯化后的蛋白作为抗原,免疫BALB/c健康小鼠,筛选和制备了1株DHV-Ⅰ单克隆抗体细胞株。Western-blot及ELISA分析表明:表达的重组蛋白均能与鸭DHV-Ⅰ阳性血清和制备的DHV-Ⅰ单克隆抗体产生反应。同时,制备的DHV-Ⅰ单克隆抗体除了能与重组蛋白反应,还能识别天然的DHV-Ⅰ病毒蛋白。     

免疫复合物疫苗用于鸡新城疫病毒感染的研究

以鸡新城疫病毒上海株sh09作为抗原,与鸡新城疫卵黄抗体IgY按照一定的比例配置免疫复合物疫苗。用无特定病原鸡进行免疫分组试验,实验分为对照组、灭活苗组、免疫复合物疫苗组3组,每隔1周取鸡测定血凝抑制(Hemagglutination Inhibition,HI)抗体效价。攻毒实验在免疫实验的基础上增加1组常规弱毒苗组。结果表明,制备的复合物疫苗在鸡体内HI抗体效价上升较显著,其免疫效果比常规疫苗好,能很好地应对强毒株的攻击。     

11株鸡新城疫病毒强毒株的分子特性

选取2002～2007年从上海市分离鉴定的11株鸡新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）强毒株,克隆其融合蛋白（Fusion,F）基因片段,测序后登录GenBank,序列号分别为NDV 022433（EU258661）、022435（EU258662）、0210149（EU258653）、0210154（EU258654）、0210227（EU258656）、0210252（EU258658）、03024（EU258637）、04011（EU258639）、05013（EU258640）、07011（EU258642）和07023（EU258643）。序列分析结果显示：上述分离株的F基因扩增片段为1 654 bp,编码551个氨基酸,其核苷酸序列同源性为94.6%～100%,推导的F蛋白氨基酸序列同源性为93.0%～100%;各分离株F蛋白裂解位点序列均为112R-R-Q-K-R-F117,为基因Ⅶ型NDV强毒株。系统发育分析表明：这11株NDV分离株之间的遗传距离较近,而与传统疫苗株B1、La Sota、V4和F48E9的遗传距离较远。此外,这11株NDV强毒株均具有大多数鹅源NDV毒株特有的973和1 249 nt RsaⅠ位点。     

鸭肝炎病毒Ⅰ型的RT—PCR诊断方法的建立

根据Genebank上发表的鸭肝炎病毒Ⅰ型（DHV-1）的部分序列设计了1对引物D1／D2,通过对反应条件的优化,建立起了有效的鸭肝炎病毒Ⅰ型的RT—PCR诊断方法。并应用此方法对近年在上海及周遍地区分离到的2株DHV-1分离毒进行了检测和测序鉴定,结果证实此株分离毒为DHV-1病毒。结果显示建立的DHV—1的PER诊断方法具有快速、准确的优点。     

沼渣沼液在玉米栽培上的应用

沼液沼渣是经过沼气厌氧发酵后而得到的,是很好的生物营养有机肥料。沼液经过对农作物进行浸种、以及叶面喷施,来对玉米进行栽培,沼渣用于农作物的基肥,本文着重阐述沼液、沼渣在玉米栽培上的应用,为进一步的了解沼渣沼液,做好基础。