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鸭肝炎病毒Ⅰ型基因片段的原核表达及单克隆抗体的制备
引用本文:高骏,孙凤萍.鸭肝炎病毒Ⅰ型基因片段的原核表达及单克隆抗体的制备[J].上海农业学报,2012,28(2):17-20.
作者姓名:高骏  孙凤萍
作者单位:上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106
基金项目:上海市科委科技创新行动计划
摘    要:根据Genebank上已报道的鸭肝炎病毒Ⅰ型基因的全长序列,设计了1对引物,通过RT-PCR方法扩增出特异的DHV-Ⅰ基因片段;将该片段克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌Rosetta-gami(DE3),并用IPTG诱导表达后,通过Ni柱纯化,获得了表观分子量在20kD左右的融合表达蛋白;将表达纯化后的蛋白作为抗原,免疫BALB/c健康小鼠,筛选和制备了1株DHV-Ⅰ单克隆抗体细胞株。Western-blot及ELISA分析表明:表达的重组蛋白均能与鸭DHV-Ⅰ阳性血清和制备的DHV-Ⅰ单克隆抗体产生反应。同时,制备的DHV-Ⅰ单克隆抗体除了能与重组蛋白反应,还能识别天然的DHV-Ⅰ病毒蛋白。

关 键 词:鸭肝炎病毒Ⅰ型  原核表达  单克隆抗体

Prokaryotic expression of gene segment of duck hepatitis virus Ⅰ and preparation of monoclonal antibody of DHV- Ⅰ
GAO Jun , SUN Feng-ping.Prokaryotic expression of gene segment of duck hepatitis virus Ⅰ and preparation of monoclonal antibody of DHV- Ⅰ[J].Acta Agriculturae Shanghai,2012,28(2):17-20.
Authors:GAO Jun  SUN Feng-ping
Institution:(Animal Husbandry and Veterinary Research Institute,Shanghai Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 201106,China)
Abstract:
Keywords:
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