脂肪酶的大孔树脂固定化工艺条件研究

以大孔树脂为载体,采用正交试验,探讨了脂肪酶的固定化条件。分别考察了5种不同载体固定脂肪酶的蛋白吸附率的大小,从而确定最佳载体;同时研究了固定化时间、温度、pH值和酶液用量对固定化酶酶活回收率的影响。结果表明,NKA-9的固定化率最高,为脂肪酶固定化的最佳载体;固定化最佳工艺条件为:温度33℃,固定化时间2h,酶液质量浓度为0.04g/mL,pH值为7.8。在此条件下获得的固定化脂肪酶,其酶活回收率平均达96.66%。     

以壳聚糖微球为载体对β-葡萄糖苷酶固定化的研究

以壳聚糖微球为载体,采用包埋—交联法固定化β-葡萄糖苷酶。通过单因素和正交试验确定了最佳固定化方法。研究结果表明,β-葡萄糖苷酶的最佳固定化条件为:pH值4.6,温度65℃,酶用量166.88IU/g(以绝干壳聚糖计,下同)的β-葡萄糖苷酶经质量分数为2.5%的壳聚糖微球包埋2h,在25℃下质量分数为4.0%的戊二醛下交联2h,得到酶活力为152IU/g和酶活回收率为90.60%的固定化酶。     

聚赖氨酸微囊固定化胰蛋白酶的研究

以海藻酸钠为载体,氯化钙为聚凝剂,聚赖氨酸为微囊膜固定化胰蛋白酶。结果表明,以 4%的海藻酸钙为载体,2%的氯化钙为凝聚剂和 0.06%的聚赖氨酸为微囊膜,加酶量为 6%,温度为 70 ℃,pH 值为 7.5,Km 值为4.51 mg/mL,在 4 ℃条件下固定化胰蛋白酶的半衰期为 35 d。     

交联壳聚糖磁性微球的制备及固定化果胶酶研究

以交联壳聚糖磁性微球为载体制备固定化果胶酶,并研究固定化酶的酶学性质与操作稳定性。通过Fe3O4磁核与壳聚糖制备磁性微球载体,戊二醛交联后对果胶酶进行固定,利用正交试验确定固定化酶制备条件,比较研究了固定化酶与游离酶的酶学性质。结果表明：在Fe2+:Fe3+体积比为1:1的溶液中,制得Fe3O4磁核;1 g Fe3O4磁核,3.0%壳聚糖,在3.0%戊二醛中交联4 h,3.0 mg/mL果胶酶在pH 4.0下固定化反应1 h,制备的固定化酶酶活力的回收率高达68.4%。对固定化酶酶学特性研究表明：最适pH 4.0,最适温度50℃,酸碱稳定性范围为pH 2.6~5.6,温度稳定性得到提高,70℃下剩余酶活力为82.8%,米氏常数Kmapp值为1.38 mg/mL,固定化酶连续使用6次还保留61.0%酶活力。说明以交联壳聚糖磁性微球为载体制备的固定化果胶酶,机械强度大、弹性好,酶活力回收率较高,操作稳定性好。     

苜蓿叶蛋白ACE抑制肽的制备

以苜蓿叶为原料,采用直接加热法提取苜蓿叶蛋白,分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶等6种酶进行酶解,获得酶解产物。通过对酶解温度、酶解pH值、底物质量分数来分析酶解液的ACE抑制率。研究发现,木瓜蛋白酶酶解苜蓿叶蛋白的ACE抑制能力最高,酶解温度在55℃时抑制率为83.26%±0.61%,酶解pH值为7.5时ACE抑制率为64.87%±0.49%,底物质量分数为4%时ACE抑制率为81.18%±0.04%。因此,确定木瓜蛋白酶为制备苜蓿ACE抑制肽的最佳用酶。     

壳聚糖固定糖化酶及其酶学性质研究

以糖化酶为研究对象,壳聚糖为固定化材料,采用戊二醛作为交联剂对糖化酶进行固定化,研究了戊二醛浓度、糖化酶浓度和固定化时间对固定化效果的影响,并对比了糖化酶固定化前后其酶学性质的变化。结果表明,当戊二醛浓度1%,酶添加浓度6.0 g·L-1,固定化时间12 h时,糖化酶的固定化效果最好,其催化可溶性淀粉的酶活性为7 125.3 U’;糖化酶经过0.04 g·mL-1壳聚糖固定化后其酶学性质如催化最适温度、pH和米氏常数Km都发生了改变,分别为温度75 ℃、pH 5.4和Km值8 mg·mL-1;固定化酶连续使用4次后,其酶活性仍保持有最初固定化时酶活性的49.82%,说明其具有一定的重复使用性。     

人工养殖鲟鱼脊骨硫酸软骨素提取工艺研究

以人工养殖达氏鳇脊骨为原料,按碱提-酶解-乙醇沉淀工艺流程提取硫酸软骨素的工艺条件进行研究。通过单因素及正交试验,得出碱提的最佳条件是碱液质量分数为6%,料液比为1∶7,提取温度为40℃,提取时间为4.5 h。酶解的最佳条件为浸提液pH值调至8~9,采用质量比1∶1的木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的混合酶,按质量分数2.5%加入,55℃水浴酶解5 h。通过单因素试验,得出乙醇沉淀的最佳条件为滤液pH值调为6.5,加入无水乙醇至醇沉体积分数70%,室温静置过夜。在最佳工艺条件下硫酸软骨素得率为40.65%,D-葡萄糖醛酸含量为22.15%。     

人工养殖鲟鱼脊骨硫酸软骨素提取工艺研究

以人工养殖达氏鳇脊骨为原料,按碱提-酶解-乙醇沉淀工艺流程提取硫酸软骨素的工艺条件进行研究。通过单因素及正交试验,得出碱提的最佳条件是碱液质量分数为6%,料液比为1∶7,提取温度为40℃,提取时间为4.5 h。酶解的最佳条件为浸提液pH值调至8~9,采用质量比1∶1的木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的混合酶,按质量分数2.5%加入,55℃水浴酶解5 h。通过单因素试验,得出乙醇沉淀的最佳条件为滤液pH值调为6.5,加入无水乙醇至醇沉体积分数70%,室温静置过夜。在最佳工艺条件下硫酸软骨素得率为40.65%,D-葡萄糖醛酸含量为22.15%。     

双酶法水解罗非鱼下脚料制备降血糖肽的工艺研究

以水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为评价指标,确定双酶复合水解罗非鱼下脚料的方案,并通过单因素试验和正交试验进行优化,最后得到最适酶解工艺参数为先在碱性蛋白酶在温度50℃,加酶量10000 U/g,pH值9.5,底物质量分数6%条件下水解;再在胰蛋白酶在温度37℃,加酶量10000 U/g,pH值8条件下水解100 min。此工艺条件下罗非鱼下脚料水解度、水解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率分别为48.26%和41.46%。     

响应面优化碱性蛋白酶酶解米糠球蛋白工艺的研究

以米糠为原料,参照Osborne连续提取法获得米糠球蛋白,为改善球蛋白的溶解性,用碱性蛋白酶进行酶解,并对工艺进行优化。以溶出率为评价指标,底物质量分数、酶解pH值、酶解温度和酶解时间为变量,通过Box-Behnken中心组合设计试验和响应面分析,得出最佳酶解条件为酶浓度20 000 U/g,底物质量分数4.42%,酶解pH值8.19,酶解温度52.08℃和酶解时间2.15 h;在此条件下获得米糠球蛋白水解产物的溶出率高达89.64%,比原米糠球蛋白的NSI值高出64.35%。     

大豆胰蛋白酶抑制剂失活的研究

利用酶、温度、酸碱度、底物质量分数4个因素对胰蛋白酶抑制剂的影响及相互作用,将胰蛋白酶抑制剂降至最低。试验得到最适酶为胃蛋白酶,其用量为0.001 2 g/3 g,温度为70℃,p H值为7,底物质量分数为9%;其中,酶的用量和温度的升降对胰蛋白酶抑制剂有显著的影响。经过验证试验表明,该结果有效可靠。     

磁性固定化漆酶在苹果汁除酚中的应用

以磁性聚苯乙烯微球为载体,戊二醛为交联剂,制备出了磁性固定化漆酶.研究表明,固定化漆酶的Km值较游离漆酶小,最适温度与游离漆酶相同,最适pH较游离漆酶下降0.4个单位,热稳定性、pH稳定性和贮存稳定性均较游离漆酶有所提高.     

制备乳清抗氧化肽的水解条件优化

采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶3种酶对乳清蛋白进行酶水解试验,研究了不同酶解产物、水解时间、水解温度和pH值下的乳清抗氧化肽的水解度和TBARS值,确定了制备乳清抗氧化肽的最佳水解参数。结果表明,乳清蛋白水解物具有抗氧化活性,最佳复配条件是碱性蛋白酶的水解时间5 h,最佳水解温度为65℃,pH值8.5;胰蛋白酶的水解时间1 h,最佳水解温度为45℃,pH值8.0。当水解度达到32.28%时,乳清肽具有较强的抗氧化能力。     

复合酶解法制备木薯微孔淀粉的研究

研究了制备木薯微孔淀粉的工艺条件,以微孔淀粉的吸油率作为考察指标,通过单因素和正交试验,考察温度、时间、酶用量、酶配比、pH值对微孔淀粉吸油率的影响。结果表明,最佳酶解工艺条件为:酶配比1∶5,淀粉乳质量分数20%,温度50℃,时间8h,酶用量1.0%,pH值5.5,在此条件下所得微孔淀粉的吸油率达92%。     

采用响应面法对酶法提取香蕉皮可溶性膳食纤维工艺的优化

为提高香蕉皮中可溶性膳食纤维的得率,采用响应面法优化酶法提取香蕉皮中可溶性膳食纤维的工艺条件,对酶质量分数、酶解时间、酶解温度、酶解pH值4个因素进行单因素试验。根据单因素试验结果设计中心组合试验,以可溶性膳食纤维得率为指标值,采用响应面分析法确定最优工艺参数。结果表明,在酶质量分数为0.5%,酶解温度为49℃,酶解时间为120 min,酶解pH值5.3的条件下,可溶性膳食纤维的得率为12.36%,比单因素试验的最高得率9.47%高30.51%,与模型的预期值12.41%基本相符,响应面法优化酶法能够提高香蕉皮的可溶性膳食纤维的得率。     

多肽的酶法制备

以羊脾脏为原料,用菠萝蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解,选择最佳水解条件。结果表明,温度60℃,pH值7.0,加酶量5.0%,时间5.0h为最佳水解条件。     

碱性过氧化氢提取苹果木聚糖的研究

以苹果渣为原料,采用碱性过氧化氢法提取苹果木聚糖,分析了过氧化氢质量分数、溶液pH值、时间和温度对木聚糖提取率影响。结果表明,溶液pH值和反应时间对木聚糖提取率具有极显著性影响,过氧化氢质量分数和反应温度具有显著性影响,当过氧化氢质量分数为2.5%,pH值12.5,温度为50℃,反应时间为8h时,木聚糖的提取率可达86%。     

固定化果胶酶的制备及其澄清橘子汁的研究

以海藻酸钠为载体,采用包埋法制备固定化果胶酶,并将固定化果胶酶应用于橘子汁澄清。结果表明,制备固定化酶的适宜条件为:用醋酸缓冲液配制果胶酶,海藻酸钠混合液,浓度分别为1.5%和2.5%,将混合液滴入浓度为1%的CaCl2溶液中,固定化时间为60 min,经过滤,清洗,干燥获得固定化果胶酶颗粒。经正交试验优化,固定化酶颗粒澄清橘子汁的适宜条件为:固定化酶添加量为60 g/L,橘子汁pH为5.6,50℃反应60 min,橘子汁澄清效果良好。     

蜂蛹蛋白的酶解工艺研究

以蜜蜂蜂蛹为原料,研究蜂蛹蛋白质酶解工艺,并对所得结果进行分析。结果表明,胰蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为:酶解温度为60℃,酶用量为1.5%,酶解时间1.5 h,pH值为8.0,料水比为1∶8,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为1.526 mg/mL;中性蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为:酶解温度为45℃,酶用量为2.0%,酶解时间为1 h,pH值为7.5,料水比为1∶6,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为2.068 mg/mL;最优水解酶是中性蛋白酶;双酶水解蜂蛹蛋白质的最适条件为:总酶量为2.0%,酶量比为1∶2,酶解温度50℃,酶解时间为2 h,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为1.889 mg/mL。双酶同时水解的效果不及中性蛋白酶。     

欧李仁蛋白多肽的制备

以欧李仁蛋白为底物,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和酸性蛋白酶进行分步复合酶解,以水解度为指标,确定其分步复合酶解的条件。结果表明,碱性蛋白酶的最适条件为底物质量分数5%,酶添加量为1.5%(基于底物蛋白质的质量),温度50℃,pH值10;中性蛋白酶添加量为5%,温度40℃,pH值7;酸性蛋白酶添加量5%,温度50℃,pH值5。分别水解30 min,经这3种酶酶解后其多肽质量浓度可达27.566 1 mg/mL。