碱性蛋白酶水解鸡血清蛋白制备ACE抑制肽的研究

采用碱性蛋白酶水解鸡血清蛋白制备ACE抑制肽。以ACE抑制率和水解度为评价指标,研究温度、p H值、底物质量分数、酶与底物浓度比、时间对水解效果的影响。通过单因素试验对碱性蛋白酶水解鸡血清蛋白制备ACE抑制肽的工艺条件进行优化。结果表明,最优水解条件为温度50℃,p H值8.0,底物质量分数6%,酶与底物浓度比6 000 U/g,时间4 h,此时ACE抑制率和水解度分别为63.07%±0.69%和17.22%±0.31%。     

碱性蛋白酶Alcalase水解杏仁蛋白制备ACE抑制肽

采用Alcalase蛋白酶水解杏仁蛋白,以水解度(DH)及水解产物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制率为指标进行酶解工艺优化。结果表明,较大活性的ACE抑制肽的最佳水解条件为:pH值7.0,温度50℃,酶底比4%,底物质量分数为2%。该条件下经60min水解,其水解度为12.23%,得到ACE抑制肽的IC50值为0.85mg/mL。     

酶解鹰嘴豆蛋白制备ACE抑制肽的研究

ACE抑制肽对血压调节起重要作用,对抑制ACE活性发挥着重要作用。为开发降血压多肽,以鹰嘴豆分离蛋白为原料,在碱性蛋白酶作用下水解,选择温度、pH值、酶与底物浓度比和水解时间4个因素,以ACE抑制率为评价指标,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面分析法优化酶解鹰嘴豆分离蛋白制备ACE抑制肽的条件。结果表明,最优水解条件为:温度50℃,pH值8.0,酶底比4%,水解时间4.0 h,在此条件下,ACE抑制率可以达到58.84%,验证试验ACE抑制率为(59.01±0.58)%,与理论值相符合。     

沙海蛰ACE抑制肽制备酶解条件研究

对用碱性蛋白酶酶解新鲜沙海蜇制备ACE抑制肽的酶解条件进行研究。先后以水解度(DH)和ACE抑制率为指标,经单因素试验和正交试验得到最佳的酶解条件为酶解温度50℃,加酶量5%,酶解起始pH值9.5。采用改进的高效液相色谱法测定ACE抑制率,发现新鲜沙海蜇在以上条件下酶解7 h时所得多肽的ACE抑制率最大。所得ACE抑制肽脱盐冻干后,测定质量浓度0.5 mg/mL时ACE抑制率为54.53%。最后,通过排阻色谱法测得其平均分子量约为500 Da。     

复合酶解大豆蛋白工艺的研究

以大豆蛋白为原料,采用复合蛋白酶Protamex与木瓜蛋白酶酶解,并通过单因素和正交试验分析。结果表明,Protamex酶与木瓜蛋白酶配比为6∶4,pH值为7.0,底物质量分数为5%,酶解时间为8 h,温度为60℃且水解度达到34.59%,为最佳酶解工艺。     

欧李仁蛋白多肽的制备

以欧李仁蛋白为底物,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和酸性蛋白酶进行分步复合酶解,以水解度为指标,确定其分步复合酶解的条件。结果表明,碱性蛋白酶的最适条件为底物质量分数5%,酶添加量为1.5%(基于底物蛋白质的质量),温度50℃,pH值10;中性蛋白酶添加量为5%,温度40℃,pH值7;酸性蛋白酶添加量5%,温度50℃,pH值5。分别水解30 min,经这3种酶酶解后其多肽质量浓度可达27.566 1 mg/mL。     

复合酶法制备汉麻籽多肽的工艺研究

采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶复合酶解汉麻蛋白制备汉麻籽多肽,在单因素试验基础上采用正交试验设计,以汉麻蛋白的水解度为考核指标,探讨各酶解因素对水解度的影响,优化复合酶水解蛋白的最佳工艺条件。试验结果表明,复合酶最佳酶解条件为酶解温度70℃,木瓜蛋白酶加酶量0.4%(底物质量),中性蛋白酶加酶量3.0%(底物质量),pH值5.0,料液比1∶5,酶解时间3 h。在该工艺条件下水解度为27.23%,与单一酶法相比,水解度明显提高。     

响应面法优化菜籽蛋白酶解条件

采用碱性蛋白酶水解菜籽蛋白,制备具有生物学功能特性的活性肽。选取pH值、温度和底物质量分数3个因素进行中心组合试验设计,利用响应面法对菜籽蛋白酶解条件进行优化研究。通过minitab15软件对水解度的分析表明,在酶解pH值9.5,温度50℃,底物质量分数为4%时,酶解产物水解度最高。该结果与实测值相符。     

杂色蛤酶解制备ACE抑制肽的工艺优化

杂色蛤酶解产物对ACE活性的抑制作用采用马尿酸法测定。以ACE抑制率和水解度为指标,通过单酶筛选,得出对杂色蛤肉酶解效果最佳的酶是木瓜蛋白酶。通过单因素试验和正交试验,确定木瓜蛋白酶酶解杂色蛤肉制备ACE抑制肽的最优工艺为料液比1∶10,加酶量1.5%,酶解温度45℃,p H值6.0,酶解时间1.5 h。酶解产物(10 mg/m L)对ACE的抑制率为86.7%,水解度为27.75%。酶解液经超滤,小于6 k Da部分(2 mg/m L)抑制率最高为52.3%,IC50为1.738 mg/m L。     

响应面优化碱性蛋白酶酶解米糠球蛋白工艺的研究

以米糠为原料,参照Osborne连续提取法获得米糠球蛋白,为改善球蛋白的溶解性,用碱性蛋白酶进行酶解,并对工艺进行优化。以溶出率为评价指标,底物质量分数、酶解pH值、酶解温度和酶解时间为变量,通过Box-Behnken中心组合设计试验和响应面分析,得出最佳酶解条件为酶浓度20 000 U/g,底物质量分数4.42%,酶解pH值8.19,酶解温度52.08℃和酶解时间2.15 h;在此条件下获得米糠球蛋白水解产物的溶出率高达89.64%,比原米糠球蛋白的NSI值高出64.35%。     

木瓜蛋白酶水解大豆蛋白制备啤酒糖浆复配液的研究

在一定的温度、pH值、底物质量分数条件下,采用不同酶用量的木瓜蛋白酶对大豆蛋白进行酶解,测定水解产物的多项理化指标,包括可溶蛋白质回收率(NR)、水解度(DH)、α-氨基氮、隆丁(Lundin)区分,以及SDS-PAGE电泳图谱等。结果表明,其高分子可溶性蛋白含量相对较高;在酶解温度60℃,底物质量分数6%,酶用量8 000U/g,pH值6.0,反应时间1～2 h的条件下,所得的酶解液为浅黄色,其Lundin分布较为接近麦汁Lundin区分分布的要求,NR值约52%。将其与啤酒糖浆混合,颜色清亮,混溶性好,口味风味和谐,采用木瓜蛋白酶制备的大豆蛋白酶解液,可作为氮源复配液用于复合啤酒糖浆。     

芝麻蛋白酶水解条件的研究

对芝麻蛋白的酶水解工艺进行了初步研究,结果为:①通过比较,选用木瓜蛋白酶为酶解芝麻蛋白制备功能性短肽的专用酶,其工艺参数为:底物质量浓度9.0 g/L,酶添加量20.0%,pH值6.5,温度50℃,时间6 h,在此工艺下得到的酶解产物的抗氧化活性最高,对邻苯三酚自氧化的抑制率为35.6%;②酶解前的热处理可以提高酶水解的效果,最佳的热处理条件是将蛋白溶液在90℃下加热10 min。     

碱性蛋白酶酶解蛋清工艺条件研究

通过单因素和正交试验研究了蛋清稀释程度、pH值、酶解温度及酶与底物比对碱性蛋白酶酶解蛋清的影响,得到最佳的酶解条件为:将蛋清液稀释至60%后变性,按照酶与底物比为2.5:100(mL:g)加入碱性蛋白酶,酶解温度为60℃,反应初始时不调节pH值,待pH值降至7.5时通过加入NaOH使pH值保持在7.5进行酶解。     

双酶法水解罗非鱼下脚料制备降血糖肽的工艺研究

以水解度和α-葡萄糖苷酶抑制率为评价指标,确定双酶复合水解罗非鱼下脚料的方案,并通过单因素试验和正交试验进行优化,最后得到最适酶解工艺参数为先在碱性蛋白酶在温度50℃,加酶量10000 U/g,pH值9.5,底物质量分数6%条件下水解;再在胰蛋白酶在温度37℃,加酶量10000 U/g,pH值8条件下水解100 min。此工艺条件下罗非鱼下脚料水解度、水解产物的α-葡萄糖苷酶抑制率分别为48.26%和41.46%。     

用于连续制备乳清蛋白ACE抑制肽的酶膜反应器运行条件优化

采用中空纤维膜连续型酶膜反应器制备血管紧张素转移酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制多肽。在传统酶解工艺条件的基础上,设计出能高效连续制备ACE抑制肽的酶膜反应器,并对此酶膜反应器的运行参数进行了优化,得到能高效制备ACE乳清蛋白源抑制肽的运行条件是:循环流速22.4 L/h,底物质量分数5%,跨膜压力0.07 MPa,酶膜反应器能稳定运行12 h以上,得到乳清蛋白酶解产物的ACE抑制率为30%￣50%。     

鹰嘴豆分离蛋白的酶解工艺研究

通过单因素实验和正交实验,得出碱性蛋白酶水解鹰嘴豆分离蛋白的最佳反应条件是：pH8.5、反应温度55℃、底物浓度[S] 2%、酶与底物浓度之比[E]/[S]2%,在此条件下,蛋白水解率可以达到27.86%;碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶在各自最佳反应条件下（碱性蛋白酶pH8.5、反应温度55℃、[S]2%、[E]/[S]2%,木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶均为pH7.2、反应温度55℃、[S]2%、[E]/[S]2%）依次水解鹰嘴豆分离蛋白,反应结束时,蛋白水解度可达到34.64%。     

中性蛋白酶和碱性蛋白酶对玉米蛋白水解作用的研究

文章研究了中性蛋白酶和碱性蛋白酶对玉米蛋白粉中玉米蛋白的水解效果,结果表明,中性蛋白酶水解玉米蛋白的较佳水解条件是底物质量分数为2．5％、pH值为7．5、酶底比为2％、温度为50℃,水解4h水解度可达24．75％;碱性蛋白酶水解玉米蛋白粉的较佳水解条件是底物质量分数为1．5％、pH值为10.0、酶底比为1％、温度为60℃,水解4h水解度可达31．04％。     

利用抑菌率对羊骨酶解产物的制备中最佳用酶的筛选

利用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶分别在各自最适条件下对羊骨进行酶解,以大肠杆菌、枯草杆菌和藤黄球菌为供试菌种,以抑菌性为指标,对7种酶作用下所得酶解产物的抑菌性进行评定,以选出水解最佳用酶。结果表明,在各自最适条件下,胃蛋白酶酶解产物(pH值为3.0,37℃,底物质量浓度0.2kg/L,酶添加浓度2000U/g,作用时间6h)的抑菌效果最佳。     

牡蛎蛋白酶解液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究

以太平洋牡蛎为原料,研究了牡蛎蛋白酶解液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,以期为新型α-葡萄糖苷酶抑制剂的开发提供基础性研究数据。试验结果表明,胃蛋白酶、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及Alcalase酶6种蛋白酶解液中,菠萝蛋白酶与Alcalase酶酶解液对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高,分别为37.53%和35.59%,与其他处理差异达显著水平(p<0.05)。采用正交试验对这2种酶的酶解条件进行优化,结果显示,菠萝蛋白酶在50℃,pH值6.0,料水比1∶4,加酶量2 400 U/g,酶解时间2 h时对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高;Alcalase酶在温度50℃,pH值8.5,料水比1∶4,加酶量1 800 U/g,酶解时间2 h的条件下对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高。     

薏米蛋白的酶水解工艺优化

为确定蛋白酶水解薏米蛋白的最佳工艺条件,以氮溶解指数(NSI)和水解度(DH)为指标对中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶进行筛选,确定碱性蛋白酶为最佳水解用酶,并通过单因素和二次回归正交旋转试验,建立了碱性蛋白酶水解薏米蛋白的数学模型。结果表明,碱性蛋白酶在底物质量浓度39.95 g/L,酶用量1 201.75 U/g,温度54.61℃,pH值7.99,反应时间4 h的条件下,水解后的氮溶解指数可达95.79%。