转基因动物制备方法

动物转基因技术是通过将外源性目的基因整合到动物染色体上,使其在体内整合和表达,获得表达外源基因动物的技术。该技术广泛应用于转基因动物育种、基因功能研究、药用蛋白生产和器官移植等方面。其主要方法包括逆转录病毒感染法、显微注射法、体细胞核移植法、胚胎干细胞介导法、精子介导法等。本文旨在对动物转基因的各种技术和方法进行综述,甄别各自的优缺点,为科研工作者提供一定的参考。     

水产动物转基因研究进展

转基因技术为水产养殖遗传育种开辟了一条新的途径。转基因技术已迅速应用到培育高产、优质和抗逆的水产养殖新品种的研究中,并在解决发育生物学、分子生物学和生理学等方面的难题中发挥了重要作用。目前,水产动物转基因的方法主要是显微注射和精子介导-电脉冲法。涉及对象包括各种鱼类和贝类等。但转基因的定位整合、稳定表达和稳定遗传以及转基因动物的生态安全和食品安全等问题仍是转基因研究有待攻克的重点、难点和热点问题。     

转基因技术及转基因动物研究进展

转基因技术为从分子到个体多方面研究基因提供了新的方法和思路。本文介绍了原核注射法，载体法等转基因技术和转基因动物的检测方法。以及转基因动物在提高动物生长速度，提高动物产毛性能，制药，抗病育种以及由于转基因动物所产生的一些问题进行了探讨。     

转基因表达的调控方法

转基因动物技术作为一种研究基因功能的技术体系 ,在生命科学研究领域有着广泛的应用前景。有效地使精确的遗传基因修饰在动物体内得到表达并实现世代间的传递是转基因技术的关键。近年来由于转座子、逆转录病毒的运用以及采用加入或去除某些基因的体细胞的克隆技术的发展 ,不同物种转基因的培育方法日趋简便。 Cre-L ox P系统越来越多地用于从基因组中去除特定的序列或靶向整合外源DNA。四环素等系统已被证实可获得确切的转基因表达。具有反式显性阴性效应的与 DNA形成三链螺旋的 RNA、反义 RNA(包括 :含 RNA干预和核酶的双链 RNA)以及蛋白质的表达均被证实可特异性地抑制宿主或病毒基因的表达。文章综述了转基因的概念、表达及调控转基因表达的常用方法     

转基因动物研究进展

在综合了转基因动物近年来的研究进展基础上 ,简述了目前使用的各种转基因方法 ,对各种转基因方法整合表达过程中存在的问题以及提高表达效果等方面进行了初步探讨     

转基因动物研究进展

转基因动物技术是将已知的外源基因导入动物细胞并整合到基因组中,从而使其得以表达的技术。此技术将分子、细胞和个体水平统一起来,标志着基因工程已由离体操作发展到离体与载体相结合的新阶段。目前,转基因动物的制作方法主要有反转录病毒感染法、显微注射法、胚胎干细胞法和精子载体法等,每种方法都有其优缺点。转基因动物技术主要应用在人类疾病模型、生物反应器、异体器官移植和改良动物品种与性状等方面。同时转基因动物技术也存在一些技术难题和安全性问题,但发展前景被普遍看好。     

动物转基因的整合、表达及其调控方法

本文综述了转基因在动物体内整合表达机制的研究进展,以及基因构件、调控序列、转基因拷贝数和载体序列等对转基因整合表达的调控,并对转基因技术的现状与前景做了小结和展望。     

利用动物乳腺生物反应器生产人凝血因子IX

转基因动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达,并从转基因动物奶中获取重组蛋白.利用转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ是一种新型的生物制药方法且具有广阔的应用前景.本文就转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ的载体构建、研究现状以及存在的问题等作一综述.     

利用动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ

转基因动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达,并从转基因动物奶中获 取重组蛋白。利用转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ是一种新型的生物制药方法且具有广阔的应用前景。本文就转基因动物 乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ的载体构建、研究现状以及存在的问题等作一综述。     

利用动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ

转基因动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达，并从转基因动物奶中获取重组蛋白。利用转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ是一种新型的生物制药方法且具有广阔的应用前景。本文就转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ的载体构建、研究现状以及存在的问题等作一综述。     

加快技术整合进程,推进生物工程产业化升级

自从1980年第一只转基因鼠在耶鲁大学FrankRuddle教授的实验室中诞生以来(Gordon等,1980),转基因动物在医药开发、异种器官移植等方面就获得了前所未有的重视。当克隆羊Dolly在1997年出生,动物克隆对转基因研究领域所带来的冲击又引起了公共媒体和科研工作者的关注。动物乳腺生物反应器(mammaryglandbioreactor),或称动物个体乳腺表达系统,是指利用乳腺特异表达的乳蛋白基因的调控序列构建表达载体,制作转基因动物,指导特定外源基因在动物乳腺中特异性、高效率地表达,以期从分泌乳汁中获得外源活性蛋白。它是一个专门化的分泌腺体,是转基…     

山羊体细胞转基因方法的探讨

转基因体细胞核移植是制备高效表达转基因动物的主要手段与方法,但由于插入位点、拷贝数不同常使外源基因的表达受到一定影响。本试验以双正向选择标记的pLoxP M为转基因结构,以磷酸钙法、脂质体介导法、电击转染三种方法对山羊胎儿成纤维细胞进行转染。电击(1 70×10-4)和脂质体(1 36×10-4)法明显高于磷酸氢钙法(4 6×10-5),而且三方法的转染效率与细胞类型无关,但电击转染方法简单并适合于不同大小的转基因结构,对长片段更为实用。随机整合的转基因细胞系绿色荧光蛋白的表达水平有很大差异,主要与外源基因的拷贝数和插入位点有关。双正向选择标记不但可以筛选重组体而且可以体外监控外源基因的表达情况,为高表达转基因动物的制备提供了良好的手段与方法。     

精原干细胞介导法制备转基因羊的研究进展

精原干细胞介导法制备转基因动物是用试验导入的方法将外源基因移入动物细胞并整合到其基因组中,伴随着精原干细胞分化成精子,通过受精最终使外源基因得以表达。近年来,随着对精原干细胞研究的不断深入,人们发现其在建立转基因动物方面具有巨大的应用潜力和优势。作者从精原干细胞的生物学特性及携带外源基因的原理等方面阐述了其应用于转基因动物制备的理论机制,同时介绍了精原干细胞介导法在制备转基因动物方面,特别是转基因羊生产中的应用现状。     

不同杂交方式获得高效表达乙肝病毒基因转基因小鼠

转基因动物普遍存在转基因效率低、表达水平不高并且外源基因遗传不稳定等问题。根据传统育种原理，笔者在已经得到的转基因动物基础上，寻找比原代外源基因表达水平更高的后代，不仅可解决上述问题，而且可以节约成本，缩短获得高效表达转基因动物的时间。本研究是以繁殖周期短，易操作，较经济的小鼠作为试验模型，对已整合有人的乙肝病毒(Hepatitis B Virus，HBV)基因的小鼠进行近交和远交的方法进行选育，并对选育的后代进行外源基因的整合检测以及对小鼠血清中表达的外源基因进行定量检测，表明获得了高效表达的转基因小鼠，从而为以后的转基因动物研制提供了实践和科学依据。     

精子载体法制作转基因动物的可行性

精子载体法转基因由于具有简便易行、对卵原核无损伤等特点,而成为最具诱惑力的转基因方法之一近年来,已经通过该方法获得了多种转基因动物,从而对精子载体法制作转基因动物的可行性提供了证据.笔者对精子载体法的可行性、机制、提高转基因效率等方面作了简要综述.     

转基因技术及其应用

介绍了植物转基因技术方法和动物转基因技术方法,对于植物转基因技术方法中几种较为常用的外源DNA导入方法:农杆菌介导法、基因枪法、电击/聚乙二醇(PEG)法和花粉管通道法作了说明。同时就其在转基因食品、抗病性育种、控制发育、品质改良、医药研究、生产药物、农业生产、动物饲养等诸多领域的应用作了简单概述。另外,对转基因沉默及转基因食品的安全性问题进行了相关讨论。     

转基因动物研究新进展

近年来，一些研究者在原有的转基因动物制作方法基础上作了改进，获得了一些新的方法，如逆转录病毒注射MII期的卵母细胞，体细胞核移植技术法，精子与外源基因合并注射卵母细胞作为核体法以及基因打靶法等。此外转基因动物鉴定和应用也取得了突破性进展。     

转基因动物技术及其研究进展

转基因动物技术是在基因工程、细胞工程和胚胎工程的基础上发展起来的,具有更广阔的应用前景,能应用于畜牧业、渔业和医疗领域中。综述了转基因动物技术概念、转基因动物技术研究现状,转基因动物技术导入外源基因的方法和步骤、转基因动物技术的应用以及转基因动物研究与应用存在的问题,并且对转基因动物技术在动物新品种培育、医学疾病模型研究和生物制药等领域的应用前景进行了展望。     

精子载体法制作转基因动物的可行性

精子载体法转基因由于具有简便易行、对卵原核无损伤等特点，而成为最具诱惑力的转基因方法之一。近年来，已经通过该方法获得了多种转基因动物，从而对精子载体法制作转基因动物的可行性提供了证据。笔者对精子载体法的可行性、机制、提高转基因效率等方面作了简要综述。     

转基因猪的研究进展

自80年代转基因动物模型建立以来,转基因动物己应用于生命科学的各个领域,尤其在生物反应器、异种器官移植和提高动物生产性能等方面得到了广泛的应用。转基因动物越来越受到人们的重视,由于猪在解剖、组织、生理和营养代谢等方面均与人类最接近,又是一种重要家畜。所以转基因猪的研究越来越受重视。本文综述了转基因猪的常用技术方法,尤其是显微注射法、核移植法等几种主要方法,评价了转基因的研究概况和转基因猪的热点应用领域等。