饲料中维生素B_2测定的色谱条件优化

本实验建立了高效液相色谱法测定饲料中维生素B_2的含量。采用了国标法和优化法两种方法进行测定。国标法:按照GB/T14701-2002的方法进行。优化方法:采用Agilent-1260高效液相色谱仪,ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5-Microm)色谱柱;流动相A液:1.1003 g庚烷磺酸钠和0.0502 g EDTA及25 m L冰乙酸、5 m L三乙胺溶液,用冰乙酸、三乙胺调节pH值至3.4;B液为甲醇;A∶B=85∶15;检测波长:265 nm;柱温:35℃;流速:1.0 m L/min;进样量:0.5μL。结果表明:国标法的保留时间为70 min左右,优化法的保留时间为9 min,且优化法的相关系数、重复性和精密度都满足要求。可见优化法测定所需时间更短,更具有快速、精确测定等优点。     

饲料中金霉素测定的色谱条件优化

本实验采用高效液相色谱法检测饲料中金霉素含量,为进一步优化饲料中金霉素的国标检测方法,实验对国标法和优化法两种色谱条件进行对比,其中优化法色谱条件为:ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5-Microm);流动相:草酸、乙腈、甲醇按照10:2:2的比例混合;流速:0.800mL/min;进样量:20μL;柱温:30℃;检测波长:375nm。结果表明:优化法的相关系数、精密度和空白饲料样品的添加回收率都满足要求。     

乌腺金丝桃HPLC指纹图谱初步研究

为了建立乌腺金丝桃高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,试验采用HPLC法,将样品经甲醇超声提取,选用shim-pack VP-ODS C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);柱温40℃;流动相为甲醇和6 mmol/L磷酸氢二钠(磷酸调至p H值为6.5),梯度洗脱;分段用260 nm、324 nm、408 nm、588 nm检测;流速为0.6 m L/min的系统条件下进行研究。结果表明:此种检测方法的稳定性和重复性均符合要求;通过随机对10批药材样品的监测分析,建立了乌腺金丝桃中药材的HPLC指纹图谱,共标定了24个共有指纹峰。说明所用方法稳定、可靠、重复性好,可为乌腺金丝桃中药材的质量控制提供参考。     

含乳食品中常用防腐剂、甜味剂同时检测方法的研究

本文对一些含乳食品中的常用防腐剂(苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸)、甜味剂(安赛蜜、阿斯巴甜、糖精钠)同时检测方法的建立进行了研究。通过对检测波长、流动相及流动相比例的选择,确定的液相色谱检测条件是:流动相为乙腈:甲醇:0.01mol/L乙酸铵=4:3:93,流速为1.0m L/min,柱温为30℃,进样量为10μL,色谱样为Agilent C18液相色谱柱,高效液相色谱紫外检测波长为205nm。结果在最佳色谱条件下,六种化合物的线性关系良好,相关系数为0.9991~0.9998,实现了20min内对六种化合物的同时测定。     

HPLC法测定氨苄西林钠可溶性粉中氨苄西林的含量

测定氨苄西林钠可溶性粉中氨苄西林的含量 ,高效液相色谱法。色谱柱为 Watersspherical C1 8(3 .9× 1 50 mm column,5μm) ;流动相为水 -乙腈 -1 mol/ L 磷酸二氢钾溶液 -1mol/ L 醋酸溶液 (90 9∶ 80∶ 1 0∶ 1 ) ;检测波长2 54nm;流速 1 .0 m L/ min;柱温 :3 0℃ ;保留时间约 4.5min。结果 :氨苄西林在 0 .2 5～ 2 .0 mg/m L范围内具有良好的线性关系 (r=0 .9999) ,平均回收率为 99.6% ,RSD=0 .3 %。结论 :该法可用于氨苄西林钠可溶性粉中氨苄西林的含量测定     

HPLC法检测牛奶中喹诺酮类药物残留色谱条件的优化

通过对GB/29692-2013方法一中流动相组成比例、流动相pH值、色谱柱规格三个色谱条件的研究,发现在满足药物色谱峰分离度3.0的条件下,应用CAPCELL PAK C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相磷酸三乙胺溶液与乙腈的比例为80:20时药物保留时间短;色谱柱规格为C18(100 mm×4.6 mm,2.6μm)的情况下,药物保留时间短;pH值在2.0~4.0的范围内对药物保留时间影响不显著。因此,按照国标中方法一进行检测时,流动相中乙腈组分的比例越大,色谱柱的长度越短,填料粒径越小检测效率越高。     

UPLC-PDA法测定蒲公英提取物中咖啡酸的含量

建立超高效液相色谱-二极管阵列检测法(UPLC-PDA法)测定蒲公英提取物中咖啡酸的含量。采用反相高效液相色谱法,用带有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪(UPLC-PAD)对咖啡酸进行色谱分离和快速筛查。以ACQUITY UPLCTMHSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为分离柱,柱温:35℃;流动相体系:A项为乙腈,B项为0.4%磷酸水溶液,进行梯度洗脱;流速:0.35 m L/min;进样量:5μL;检测波长为323 nm。通过光谱图、保留时间及峰面积参数对咖啡酸进行定性定量检测。咖啡酸在1～100μg/m L的范围内线性良好(R2=0.999); 0.25μg/m L咖啡酸对照品溶液与空白溶液的信噪比3,为检出限,1μg/m L咖啡酸对照品溶液与空白溶液的信噪比10,为定量限,完全满足检测需求。该方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于蒲公英提取物中咖啡酸的定性定量检测。     

两种流动相测定饲料添加剂维生素B_(12)粉剂含量的比较

对比了两种不同流动相测定饲料添加剂维生素B_(12)粉剂含量的检测方法;采用Wters C18柱,波长361nm,流速0.80ml/min,柱温35℃,高效液相色谱法。从检测的系统性、线性关系、精密度、准确度方面对比了两种流动相测定结果的差异,结果显示,两种流动相测定结果的相对偏差在范围内。     

建立柱前衍生化-HPLC法测定发酵液中L-蛋氨酸

拟建立一种简单、快速、高效的柱前衍生化HPLC法测定发酵液中蛋氨酸含量。以2,4-二硝基氯苯(CDNB)为衍生化试剂,采用高效液相色谱法,定量测定发酵液中的蛋氨酸含量。色谱条件:流动相0.01 mol/L p H 5.2 Na AC-乙腈(70∶30);检测波长:350 nm;柱温:25℃;流速:0.8 m L/min。结果表明:蛋氨酸含量在10~80μg/m L范围内峰面积与浓度呈现良好的线性关系,R2=0.999 24;检测限和定量限分别为0.1和0.5μg/m;加样回收率为98.7%,并且具有良好的重复性。     

HPLC测定维生素ADE注射液中三种维生素的含量

采用HPLC建立了兽药维生素ADE注射液中维生素A、维生素D3和维生素E的含量检测。采用C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),甲醇为流动相A、乙腈-乙醇-水(60∶25∶5)为流动相B进行梯度洗脱,流速为1.5 m L/min,检测波长为265 nm,柱温为25℃,进样量为20μL。结果表明,在此色谱条件下,维生素ADE注射液中维生素A、维生素D3和维生素E的分离度良好,分别在60.96~1219.20μg/m L、2.56~51.20μg/m L和300.23~6004.60μg/m L范围内线性关系良好(r20.999)。按外标法以峰面积计算进行检测,维生素A、维生素D3和维生素E的平均回收率分别为99.6%、101.1%和99.0%,RSD均小于1.0%;平均重复性分别为105.7%、106.8%和102.3%,RSD均小于1.0%;中间精密度的RSD均小于0.5%;稳定性的RSD均小于1.0%;耐用性中选择流动相A与B变化为17∶83、流速为1.5 m L/min时,在一定范围内三种组分的含量基本稳定;柱温为25℃时,可避免维生素降解。说明该方法简单、快速,适用于维生素ADE注射液中三种维生素含量的测定,具有分离效果好、回收率高和稳定性好的特点。     

加米霉素注射液含量的高效液相色谱检测法的建立

为了建立加米霉素注射液含量的高效液相色谱检测法,为其检测提供依据,试验选用样品浓度为0.3 mg/mL,进样量为20μL,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃,溶剂为乙腈,作为初步的色谱条件,比较不同比例流动相、不同色谱柱的峰形及分离效果,确定最优色谱条件,并考察该方法的线性关系、重复性、稳定性及添加回收率,并利用该方法对样品进行检测。结果表明:通过筛选确定了液相色谱检测条件,色谱柱为资生堂CAPCELL PAK C_(18) MGⅡ(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸盐缓冲液(取0.01 mol/L磷酸氢二钾溶液,用20%磷酸溶液调节pH值至8.0)∶乙腈(20∶80),检测波长为210 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为40℃。用该条件进行检测,加米霉素标准品在1.714～450.0μg/mL范围内呈良好的线性关系(R~2=0.999 7);重复性试验平均含量为98.18%,相对标准偏差(RSD)为0.85%;在高、中、低3个水平下的回收率为98%～102%,平均回收率为99.71%,RSD为0.94%;用确定的液相色谱检测条件对8批中试样品的含量进行测定,结果RSD为0.23%。说明该方法重复性好、准确性高,可用于加米霉素注射液含量的检测。     

HPLC法测定99-杀虫星中辛硫磷的含量

采用高效液相色谱法测定99 杀虫星中辛硫磷的含量。色谱柱为WaterssphericalC18(3 9×150mm,5μm);流动相为甲醇 水(75∶25);检测波长254nm;流速1 0mL·min 1;柱温为23℃。保留时间约3 3min。辛硫磷浓度在40～320μg·mL 1范围内具有良好的线性关系(r=0 9999),平均加样回收率为99 8%,RSD为0 64%。该法可用于99 杀虫星中辛硫磷的含量测定。     

青贮饲料中主要有机酸的高效液相色谱分离分析

研究利用高效液相色谱法同时测定青贮饲料中乳酸、乙酸、丙酸和丁酸含量的最佳色谱条件。通过优化比较试验发现测定青贮样品中有机酸含量的最佳色谱条件为:以Agilent TC-C18柱(250 mm×4.6 mm×5μm)作色谱柱,柱温50℃,甲醇为流动相A,0.01 mol/L的KH2PO4水溶液(用磷酸调p H值到2.70)为流动相B,流速0.7 m L/min,设置梯度洗脱:0:00时A∶B=3∶97;10:00时A∶B=10∶90,进样20μL,紫外检测波长为210 nm。该方法检测结果表明:4种有机酸的色谱图峰分离良好,峰型对称,检测时间适合,高效可行;样品中乳酸、乙酸、丙酸和丁酸的回收率为94.7%~99.8%,表现出较高的准确性;相对标准偏差均小于5%,表明该方法具有较好的精密度。     

清瘟解毒口服液黄芩苷的HPLC法测定

为了对清瘟解毒口服液中的黄芩苷进行定量分析,探索中兽药质量管控的新方法,试验采用高效液相色谱(HPLC)法对黄芩苷进行定量检测。黄芩苷高效液相色谱条件为供试品制备:取药液1 m L,置于50 m L容量瓶中,加入适量50%甲醇溶液,超声处理20 min(100 W,40 k Hz),放置至室温,用50%甲醇溶液定容至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,所得供试品检测结果最稳定,适用于本制剂的检测。色谱条件:以Kromasil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈∶0.2%磷酸溶液(22∶78),检测波长为274 nm,流速为1.0 m L/min,柱温为40℃,进样量为10μL。结果表明:该方法对黄芩苷适用性和线性关系良好,精密度、重复性、加样回收率高。说明该方法可以作为清瘟解毒口服液的质量控制手段。     

利用超高效液相色谱-高分辨四极杆飞行时间质谱鉴别预混剂中黄霉素

利用超高效液相色谱-高分辨四极杆飞行时间质谱对预混剂中的黄霉素5种组分进行鉴别分析。采用C18色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液(含2 mmol/L乙酸铵)为流动相梯度洗脱,流速0.4 m L/min,柱温40℃;质谱条件为电喷雾离子源,检测方式为负离子全扫描模式,通过保留时间、精确分子量和二级质谱特征碎片完成对黄霉素的5种组分的鉴别。与高效液相色谱方法比较,本方法具有判断准确、检测快速的特点,具有很好的应用价值。     

HPLC法测定维生素ADE注射液中苯甲醇的含量

采用HPLC建立了兽药维生素ADE注射液中苯甲醇的含量检测。用C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),甲醇为流动相A、水为流动相B进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长为257 nm,进样量为20μL。结果表明,在此色谱条件下,维生素ADE注射液中苯甲醇在0.010 4～0.103 9 mg/mL范围内线性关系良好(r2=0.999 9)。按外标法以峰面积计算进行检测,苯甲醇的平均回收率为100.3%,RSD小于1.0%;平均重复性为1.88%,RSD小于1.0%;中间精密度的RSD小于1.0%;稳定性的RSD小于0.5%;耐用性中选择柱温为25～35℃、流速为0.8～1.2 mL/min时,苯甲醇的含量基本稳定。该方法简单、快速,适用于维生素ADE注射液中苯甲醇含量的测定,具有回收率高和稳定性好的特点。     

板青败毒口服液的HPLC特征图谱研究

为完善提升板青败毒口服液的质量标准,反相HPLC法建立板青败毒口服液特征图谱标识其中各种组分群体特征。采用Waters XBridge C18色谱柱（粒径为3.5μm，4.6 mm×250 mm），以乙腈为流动相A相，以0.4%磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为240 nm。流速为1.2 mL/min，柱温为35℃。供试品色谱中呈现8个特征峰，并与对应的参照物色谱峰保留时间一致。该方法灵敏度高，专属性强，结果重复性好，节省了试剂、时间，操作简便、环保，可以更有效的对板青败毒口服液内在质量进行控制。     

RP-HPLC法测定CPFL原位凝胶中主药的含量

建立乳酸环丙沙星泊洛沙姆原位凝胶中乳酸环丙沙星含量测定的高效液相色谱法。以流动相为参比溶液,在波长200～400 nm段用紫外分光光度计进行光谱扫描以选择乳酸环丙沙星的入射波长;用Extreme C18柱(5μm,25 cm×4.6 mm)为色谱柱,流动相为0.025 mol/L磷酸溶液(三乙胺调节pH至3)-乙腈(87:13),流速为1.0 mL/min,检测波长为λmax=279 nm,进样量为50μL,采用峰面积外标标准曲线法计算含量。结果表明:乳酸环丙沙星的最大吸收波长为279 nm,峰宽较窄;乳酸环丙沙星检测质量浓度线性范围为1.25～40μg/mL(r=1),平均回收率99.50%(相对标准偏差=1.67%,n=9)。本法操作简便,快速,结果准确可靠,重复性较好,可用于测定乳酸环丙沙星原位凝胶中乳酸环丙沙星的含量。     

复合维生素中呋喃类违禁药物高效液相色谱检测方法研究

为了快速检测呋喃类违禁药物,本文研究了复合维生素中呋喃唑酮、呋喃西林和呋喃妥因3种呋喃类违禁药物的高效液相色谱(HPLC)检测方法,建立了同时检测呋喃唑酮、呋喃西林和呋喃妥因的定性、定量方法.采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,参考色谱条件:色谱柱为Alltech C18柱250mm×4.6mm(i.d.),5 μm;流动相为乙腈-水(28:72,V/V);流速为1.0 mL/min;检测波长为365 nm;柱温为室温;进样量为10 μL.结果表明,呋喃唑酮、呋喃西林和呋喃妥因的加样平均回收率分别为:96.1%、99.7%、99.9%;线性方程:呋喃唑酮y=4×109x+233505,相关系数R2=0.9993;呋喃西林y=5×109x+253168,相关系数R2=1;呋喃妥因y=5×109x+201638,相关系数R2=1.这表明,本实验建立的测定方法简便、灵敏、准确、快速、重现性好,可用于复合维生素中呋喃类违禁药物的定性和定量检测.     

正交设计法优化蒲公英中黄酮提取工艺

在510 nm最大吸收光时检测正交提取蒲公英中的黄酮含量,建立正交提取工艺,对提取物进行HPLC检测,色谱柱为Eclipse×DB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇∶1%冰醋酸=60∶40(v/v),流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温30℃,进样量20μL,在此色谱条件下测定黄酮含量。结果表明,各因素影响力大小为:pH值>浸泡时间>料液比;用HPLC测定蒲公英中的黄酮含量为9.26%。