抑制素基因免疫黄牛的黄体发育与免疫纯度及剂量的关系

为探讨双拷贝抑制素pcISI基因疫苗纯度和剂量对肉牛黄体发育的影响,将150头同期发情的南阳黄牛随机分为8个试验组和2个对照组,试验组用pcISI按2种纯度、4种剂量(0.75、1.50、2.25、3.00 mg/头)进行免疫处理,2个对照组分别用空质粒和生理盐水进行处理;初次免疫21 d后进行加强免疫。结果表明:无论用高纯度还是低纯度疫苗免疫,2.25 mg/头剂量处理对黄体的作用效果最明显,且抗体水平与黄体发育密切相关,2.25 mg/头抑制素融合表达质粒组的黄体显著大于0.75 mg/头组(P<0.05),抗体阳性牛两侧黄体显著比抗体阴性牛的大(P<0.05)。     

主动免疫抑制素提高奶牛超数排卵胚胎产量的研究

 【目的】研究免疫抑制素提高奶牛超数排卵的效率以提高胚胎产量。【方法】免疫组首次免疫抑制素α亚基融合蛋白（1 mg?头-1）与白油佐剂混合乳液,首免后第28、56 d分别进行2次加强免疫,剂量为0.5 mg?头-1。对照组同时注射生理盐水与白油佐剂的混合乳液。在第二次加强免疫后10 d,采用FSH四日递减法进行超排处理,并根据母牛发情表现进行人工授精,试验一使用常规冷冻精液输精,试验二使用分离的雌性精子输精,输精后第7天进行冲胚。【结果】主动免疫抑制素能够有效提高血液抗抑制素抗体效价。试验一,免疫抑制素组头均获胚/卵总数为（15.8±2.8）枚,显著高于对照组（8.3±1.5）枚（P＜0.05）;头均可移植胚胎数为（9.6±3.1）枚,稍高于对照组的（5.8±1.6）枚（P＞0.05）。试验二,免疫抑制素组发情时间早于对照组(P＜0.05);输精后第7天血液孕酮浓度显著高于对照组（P＜0.05）;头均获胚胎总数和头均可移植胚胎数分别为（15.4±1.9）枚和（5.7±0.7）枚,显著高于对照组的（9.1±1.2）枚和（3.1±0.5）枚(P＜0.05);免疫组获得的一级胚胎为（3.8±1.0）枚,占总可移植胚数的58%,显著高于对照组的（0.6±0.2）枚或19.8%(P＜0.05)。【结论】主动免疫抑制素能够促进牛卵泡发育、提高超排效率和胚胎产量,在使用性控精液输精时不仅大幅提高雌性胚胎数量,同时大幅提高胚胎质量。     

不同营养水平对湖羊黄体期血液理化指标及卵泡发育的影响

【目的】研究不同营养水平对湖羊黄体期血液理化指标及卵泡发育的影响。【方法】选择28只经产母羊,于发情周期第6天分别按0.5倍体重维持需要量（R组）,1倍体重维持需要量（C组）和1.5倍体重维持需要量（S组）饲喂6 d,第12天每组屠宰6头;剩下的湖羊用于观察发情;分别于发情周期第7、8、10和12天采血。【结果】随着营养水平的提高,≥3.5 mm的卵泡数量显著增加（P＜0.05）、2.5-3.5 mm的卵泡数量显著降低（P＜0.05）,平均发情周期缩短（P＜0.05）,血液尿素、胆固醇和游离脂肪酸含量显著下降（P＜0.05）,甘油三酯含量显著提高（P＜0.05）;S组乳酸脱氢酶活性显著高于C组（P＜0.05）;血液尿酸、血氨、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白浓度和谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性差异不显著（P＞0.05）,但尿酸、血氨、低密度脂蛋白含量和谷草转氨酶活性具有时间效应（P＜0.05）。【结论】绵羊黄体期不同生理阶段具有不同的营养需求和代谢特点,黄体期限饲抑制卵泡发育与蛋白质和脂类合成降低、分解增强有关。     

外源褪黑素对牛卵母细胞体外成熟的影响

 【目的】探索外源褪黑素（melatonin,MT）处理对牛卵母细胞体外成熟的影响从而优化牛体外胚胎生产体系。【方法】在牛卵母细胞成熟过程中添加不同浓度的MT,观察并统计其体外受精后胚胎的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数。应用放射免疫分析法检测血清、卵泡液和成熟培养液内MT与孕酮（P）、雌激素（E2)、促卵泡素（FSH）、促黄体生成素（LH）水平的变化并检测卵母细胞的活力和活性氧（ROS）的浓度。【结果】存在于牛卵泡液中的MT浓度与血清中的相近,添加10-11 mol•L-1 MT组的P浓度（2.01±0.33）ng•mL-1显著高于对照组（（0.87±0.10）ng•mL-1,P＜0.05）。与对照组（（67.32±7.30）%）相比,10-9 mol•L-1 MT组卵裂率显著提高（（77.81±7.06）%,P＜0.05）,并能提高囊胚率且囊胚细胞数（（29.61±9.55）%,（90.30±28.74）个）,显著高于对照组（（19.64±9.22）%,（75.07±25.98）个,P＜0.05）;同时,10-9 mol•L-1 MT组卵母细胞的活力高于对照组,并能降低卵母细胞内的ROS含量但没有显著差异（P＞0.05）。【结论】牛卵泡液中存在MT,适当浓度的外源MT能促进牛卵母细胞体外成熟。     

不同碳水化合物对断奶仔猪生长性能和生化指标的影响

 【目的】观察不同碳水化合物对断奶仔猪生长性能和生化指标的影响,为筛选更廉价的碳水化合物原料用于断奶仔猪日粮提供试验依据。【方法】选用28日龄断奶三元杂交仔猪（体重8.0 Kg±0.1 Kg）120头,采用随机区组法分为5个处理,分别为对照组、葡萄糖组、蔗糖组、乳糖组和玉米淀粉组。对照组日粮为玉米-豆粕型基础日粮,其余4个处理组分别用6%的葡萄糖、蔗糖、乳糖和玉米淀粉替代基础日粮中6%的玉米,试验期为28 d。测定各处理仔猪的全期生长性能;并于试验最后一天每个公仔猪重复中随机抽取1头,采血分离血清,测定血清生化指标,处死后取小肠粘膜测定二糖酶活性。【结果】葡萄糖组母仔猪的平均日增重显著高于蔗糖组(P＜0.05);乳糖组母仔猪的料重比显著低于对照组、葡萄糖组和蔗糖组（P＜0.05）,极显著低于玉米淀粉组（P＜0.01）。不论在十二指肠还是空肠,乳糖组的乳糖酶活性均显著高于对照组和蔗糖组（P＜0.05）,极显著高于葡萄糖组和玉米淀粉组（P＜0.01）;乳糖组和玉米淀粉组的麦芽糖酶活性无显著差异（P＞0.05）,但均显著高于其它3组（P＜0.05）;对照组、蔗糖组和玉米淀粉组的蔗糖酶活性均显著高于葡萄糖组和乳糖组（P＜0.05）。蔗糖组血糖浓度显著高于玉米淀粉组（P＜0.05）,血钙浓度显著高于对照组和玉米淀粉组（P＜0.05）。其他指标在各组间差异均不显著（P＞0.05）。【结论】葡萄糖可以替代或部分替代乳糖添加于断奶仔猪日粮中,而蔗糖或玉米淀粉不宜单独添加于断奶仔猪日粮中。     

促孕散对持久黄体和卵巢静止奶牛血清生殖激素的影响

【目的】研究促孕散对持久黄体和卵巢静止奶牛雌二醇（E2）、促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）和孕酮（P4）4种生殖激素的影响,探讨促孕散治疗奶牛持久黄体和卵巢静止的作用机理。【方法】用促孕散治疗奶牛持久黄体和卵巢静止,统计发情率,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测奶牛血清中的E2、FSH、LH和P4 4种生殖激素,并与正常奶牛对比。【结果】促孕散治疗持久黄体牛发情有效率为91.67%,治疗卵巢静止牛发情有效率为88.89%。促孕散处理前,持久黄体P4水平极显著高于正常组（P＜0.01）,卵巢静止P4极显著低于正常组（P＜0.01）,而两种病型在处理前E2、FSH、LH水平与正常组差异不显著（P＞0.05）。持久黄体患牛在促孕散处理后血清中E2和FSH水平不断升高,与正常组比较差异不显著（P＞0.05）,LH水平在促孕散处理后也逐渐上升,与正常组同时达到峰值,其变化规律与正常组相似,P4水平逐渐降低,与正常组水平差异不显著（P＞0.05）。卵巢静止组在促孕散处理后血清中E2、FSH和LH水平均升高,其变化规律与正常组相似,P4水平出现先升高后降低的变化,变化规律与正常组相似,差异不显著（P＞0.05）。【结论】促孕散对持久黄体和卵巢静止奶牛血清生殖激素具有显著调节和诱导发情的作用。     

饲粮油菜籽添加水平对肉牛生长性能、瘤胃发酵及血液生化指标的影响

【目的】旨在探讨饲粮中不同油菜籽添加水平对肉牛生长性能、瘤胃发酵及血液生化指标的影响,从而为肉牛育肥过程中合理使用油菜籽提供依据。【方法】试验采用单因子完全随机设计,选取18月龄、平均初始体重为（447±35.67）kg的西门塔尔杂交公牛40头,依据饲粮中油菜籽含量随机分为对照组（0%）、低菜籽组（8.7%）、中菜籽组（17.4%）、高菜籽组（26.0%）,预饲期10 d,正试期90 d。试验结束后称重,计算饲料成本,并采集瘤胃液和血液分别用气相色谱法、比色法和放射免疫法测定瘤胃液挥发性脂肪酸、氨态氮和血清中三碘甲状腺原氨酸酸（T3）、甲状腺素（T4）、促甲状腺素（TSH）。用SAS9.2软件中一般线性模型对试验数据进行方差分析。【结果】试验结束各组牛末重之间差异不显著（P＞0.05）,中菜籽组日增重最高,为1.33 kg•d-1,显著高于高菜籽组（P＜0.05）,比对照组和低菜籽组分别高6.40%和7.25%;高菜籽组干物质采食量最高,对照组最低,但各组之间差异不显著（P＞0.05）。随油菜籽添加水平的提高,饲料成本降低（P＞0.05）;中菜籽组料重比最低,高菜籽组最高,各组之间差异不显著（P＞0.05）;不同油菜籽添加水平不显著影响瘤胃液pH、氨态氮以及挥发性脂肪酸的含量（P＞0.05）,但随油菜籽添加水平的提高瘤胃液中氨态氮、丁酸和乙酸/丙酸的含量呈降低的趋势,丙酸呈上升趋势,总的挥发性脂肪酸先上升后降低;血清中三碘甲腺原氨酸（T3）和甲状腺素（T4）各组之间差异不显著（P＞0.05）,中菜籽组和高菜籽组血清中促甲状腺素（TSH）显著低于对照组（P＜0.05）,与低菜籽组差异不显著（P＞0.05）。饲粮油菜籽添加水平对血清中谷丙转氨酶、肌酐、胆固醇含量影响差异不显著（P＞0.05）,对照组和低菜籽组的谷草转氨酶活性显著低于中菜籽组和高菜籽组（P＜0.05）,中菜籽组尿素氮水平显著低于对照组（P＜0.05）,与其它各组差异不显著（P＞0.05）。【结论】添加不同水平的油菜籽对瘤胃发酵参数无显著影响,肉牛育肥期间饲粮油菜籽添加到17.4%时日增重不受影响,饲粮中添加油菜籽可加重甲状腺和肝脏的代谢负担。     

染料木素对性成熟前小鼠卵巢卵泡发生动力学的影响

【目的】旨在探究染料木素对性成熟前小鼠卵巢卵泡发生动力学的影响，为畜牧生产尤其是种猪饲养过程豆粕型日粮的合理饲喂以及黄酮类替抗产品的科学应用提供参考。【方法】将40只21日龄昆明小鼠随机分为4组，其中对照组处以0.1 mL的溶剂（含5%DMSO的玉米油），试验组分别处以等体积不同浓度的染料木素（25 mg/kg、50 mg/kg和100 mg/kg），连续腹腔注射7 d。处理结束后，对部分小鼠进行PMSG-HCG促排并记录输卵管壶腹部的卵子数量，评估卵巢排卵潜能；剩余小鼠采集卵巢制成组织切片进行HE染色，统计分析卵巢内各级卵泡生长和闭锁状态。【结果】输卵管壶腹部成熟卵子数统计显示，染料木素处理组的卵子数量较对照组均显著增加（P<0.05），其中50 mg/kg染料木素组卵子排出数量最多，且显著高于25 mg/kg和100 mg/kg剂量组（P<0.05），而25 mg/kg和100 mg/kg剂量组之间差异不显著（P>0.05）。卵泡计数结果显示，染料木素处理组生长卵泡总数较对照组均无显著差异，但健康生长卵泡显著高于对照组（P<0.05），闭锁生长卵泡则反之（P...     

不同硒源对鹅早期生产性能、屠宰性能、肉品质、肌肉常规养分、免疫与抗氧化功能的影响

 【目的】研究不同硒源对鹅生产性能、屠宰性能、肉品质、肌肉常规养分、免疫和抗氧化功能的影响。【方法】试验选用1日龄健康、体重相近的肉鹅96只（P＞0.05）,按单因素完全随机设计分为对照组、亚硒酸钠组、酵母硒组和纳米硒组4组,每组3个重复,每个重复8只;对照组饲喂基础日粮,其它3组分别在基础日粮中添加0.3 mg&;#8226;kg-1水平的亚硒酸钠、酵母硒和纳米硒。【结果】除9周龄酵母硒组胸肌率、腿肌率显著高于对照组外（P＜0.05）,4、9周龄其余各试验组鹅的体增重、料重比、屠宰性能指标均与对照组差异不显著（P＞0.05）,且不同硒源间对鹅的生产性能也无显著性影响（P＞0.05）。9周龄肌肉失水率、硬度、水分、粗脂肪、灰分含量各试验组显著低于对照组（P＜0.05）,不同硒源间差异不显著（P＞0.05）;各试验组滴水损失显著低于对照组（P＜0.05）,且酵母硒组显著低于亚硒酸钠组（P＜0.05）;肌红蛋白含量各试验组显著高于对照组（P＜0.05）,酵母硒组显著高于亚硒酸钠组（P＜0.05）;各试验组粗蛋白含量显著高于对照组（P＜0.05）,且酵母硒和纳米硒组显著高于对照组（P＜0.05）,但不同硒源间差异不显著（P＞0.05）。除9周龄亚硒酸钠组、纳米硒组脾脏指数与对照组差异不显著外（P＞0.05）,第4、9周龄其余各试验组胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数均显著高于对照组（P＜0.05）,但不同硒源间差异不显著（P＞0.05）;第4、9周龄T淋巴细胞转化率与对照组相比,亚硒酸钠组、纳米硒组均显著提高（P＜0.05）,酵母硒组极显著提高（P＜0.01）,且酵母硒组显著高于亚硒酸钠组（P＜0.05）。各试验组4、9周龄血清与肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）,总超氧化物歧化酶（T-SOD）和总抗氧化能力（T-AOC）活力均显著高于对照组（P＜0.05）;各试验组4、9周龄血清与肝脏中丙二醛（MDA）和过氧化氢（H2O2）均显著低于对照组（P＜0.05）;不同硒源的4周龄试验肉鹅血清中GSH-PX活力差异不显著（P＞0.05）,4周龄肝脏、9周龄血清和肝脏酵母硒组均显著高于亚硒酸钠组（P＜0.05）;4、9周龄试验肉鹅血清与肝脏中的T-SOD活力差异不显著（P＜0.05）;4、9周龄血清,4周龄肝脏酵母硒组T-AOC均显著高于亚硒酸钠组（P＜0.05）,9周龄肝脏纳米硒组显著高于亚硒酸钠组（P＜0.05）;MDA含量,4、9周龄血清与肝脏酵母硒组均显著低于亚硒酸钠组（P＜0.05）;4、9周龄血清与肝脏H2O2含量差异不显著（P＜0.05）。亚硒酸钠和纳米硒组cGPx基因在肝脏中的表达量显著高于对照组（P＜0.05）;酵母硒组极显著高于对照组（P＜0.01）,酵母硒组显著高于亚硒酸钠和纳米硒组（P＜0.05）。【结论】日粮中添加不同硒源对鹅的生产性能和屠宰性能无显著性影响（P＞0.05）,但是能够改善鹅的肉品质和鹅肌肉的营养成分含量,增加机体免疫功能和抗氧化能力;酵母硒比亚硒酸钠和纳米硒的作用更为显著。     

高温诱导蛋鸡氧化损伤及对卵泡发育的影响

【目的】研究高温诱导蛋鸡氧化损伤及对卵泡发育的影响,探讨环境高温抑制蛋鸡卵泡发育、降低产蛋量的机制。【方法】试验分两部分进行：试验一,将180只27周龄的海兰褐蛋鸡随机分为3个处理组,分别饲养于人工环境控制舱内,3个处理组分别为常温组（23℃,饲喂基础日粮）、日循环高温组（28—35—28℃,饲喂基础日粮）和高温补充VE组（28—35—28℃,饲喂基础日粮+250 IU•kg-1 VE）,试验期14 d;试验二,分离蛋鸡F1和F2卵泡颗粒层并制备颗粒细胞悬浮液,将颗粒细胞分别在39或44℃下培养。【结果】试验一结果显示,日循环高温显著抑制蛋鸡卵泡发育,表现为产蛋数量下降（P＜0.05）、卵巢重量降低（P＜0.05）、大卵泡数量减少（P＜0.05）,同时颗粒细胞层细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶（P450scc）mRNA的表达量以及孕酮（P4）分泌量均显著（P＜0.05）减少;日循环高温还诱导蛋鸡氧化损伤,表现为蛋鸡血浆、肝脏和卵黄中丙二醛（MDA）水平上升（P＜0.05）;高温环境下补充250 IU•kg-1 VE,显著降低蛋鸡血浆、肝脏和卵黄中MDA水平（P＜0.05）,同时显著缓解高温对卵泡发育的抑制（P＜0.05）。试验二结果显示,提高培养温度可显著增加颗粒细胞中活性氧（ROS）的产生量（P＜0.05）,同时抑制颗粒细胞的增殖活性（P＜0.05）;培养液中添加VE预处理24 h可显著缓解高温的影响,表现为细胞ROS降低（P＜0.05）,细胞增殖活性增加（P＜0.05）。【结论】高温增加蛋鸡颗粒细胞ROS的产生量,诱导蛋鸡机体（肝脏,血浆和卵黄）氧化损伤,同时影响颗粒细胞增殖及分泌孕酮的能力,抑制蛋鸡卵泡发育;补充VE可以缓解高温诱导的蛋鸡氧化损伤,并缓解高温对卵泡发育的抑制。表明高温抑制蛋鸡卵泡发育与诱导蛋鸡氧化损伤有关。     

非抗性筛选抑制素基因疫苗免疫对奶牛产后子宫复旧的影响

将24头产后7 d的荷斯坦奶牛随机分为4组,高、中、低剂量免疫组(记为T1、T2、T3)分别注射1010、109、108 CFU/mL无抗性基因的抑制素真核表达质粒基因疫苗(重组菌C500(pXAIS))各3 mL,对照组(CK)注射10%生理盐水3 mL。初次免疫28 d后进行加强免疫。用B超诊断仪检测产后奶牛子宫恢复情况。结果表明:加强免疫能提高抗抑制素抗体P/N值,各免疫组P/N值均高于对照组,其中T1和T2组均与对照组差异显著(P0.05),加强免疫7 d,后T1组抗体阳性率最高,达83.33%;抑制素基因疫苗免疫30 d内,前21 d子宫颈和子宫孕角恢复较快,后7 d恢复较慢,各免疫组奶牛产后子宫颈恢复时间短于对照组,但差异不显著(P0.05);各免疫组产后子宫孕角恢复时间比对照组短,且T1组的恢复时间(28.75±1.92)d)与对照组((33.75±1.09)d)差异显著(P0.05)。以上结果表明,在本试验条件下,非抗性筛选的抑制素真核表达质粒基因疫苗免疫产后奶牛,加强免疫后能引起较好的免疫应答,且能促进奶牛产后子宫复旧。     

黄牛对抑制素pCISI基因免疫的反应性

为分析抑制素基因免疫对黄牛的影响,优化免疫方法,将3.0 mg抑制素真核融合表达质粒pCISI以不同纯度并配以不同的免疫佐剂分2次导入72头母黄牛体内,采用ELISA法检测血样中抗抑制素抗体效价。结果表明:抗体阳性牛占59.72%(43/72);添加佐剂的重组质粒较空质粒组免疫效果明显(P<0.05),普鲁卡因佐剂显著优于脂质体(P<0.05);高纯度疫苗组阳性牛的比例略高于低纯度组,但差异不明显(P>0.05)。这说明应用抑制素质粒pCISI免疫黄牛后可产生抗抑制素抗体。     

Effect of Inhibin α(1-32)Gene Immunization on the Follicular Development and Reproductive Hormones in Rats

A total of 40 rats, aged in 30 days, were divided into 4 groups and immunized (intramuscularlyinjection) with 0 μg(control), 15 μg (group 1), 25 μg (group 2) or 40 μg(group 3) of inhibin α(1-32) re-combinant expression plasmid pcINH in combination with liposome. Booster was given without liposome onday 20 after primary immunization. The results showed that 50%(13/26) rats were detected in positive anti-body against inhibin. However, the increase of immunization dosage and booster did not promote the ratio ofantibody positive rats. The number of matured follicles above 0.8 mm in diameter in the antibody positive ratswas 2.3 more than that in the negative rats (P＞0.05). The concentration of blood plasma FSH increased dis-tinctively on day 10 after primary immunization (P＜0.05), but no increase was observed after booster immu-nization. The 17-β-estradiol levels in blood plasma of rats between the positive and the negative groups had noremarkable differences (P＞0.05). These results suggested that recombinant inhibin expression plasmid couldstimulate animal body to produce antibody against inhibin.     

抑制素基因免疫对黄牛孪生的影响

为增强肉牛的繁殖力,应用本实验室构建的抑制素真核融合表达质粒pCISI,提纯后辅以不同的免疫佐剂注入96头母黄牛体内,采用AMI-900兽用B超对其中84头发情牛进行卵泡检测,并对其中78头妊娠牛进行早期胚胎数目检测。结果发现:抑制素质粒pCISI能促进双大卵泡发育(80.95%,68/84),诱发排双卵(60.71%,51/84),诱导黄牛孪生(41.03%,32/78);普鲁卡因佐剂(48.78%)比脂质体(32.43%)效果明显。研究表明,抑制素基因免疫能有效提高黄牛的繁殖率。     

性腺肽类激素在动物生殖调控中的作用

阐述了性腺肽类激素抑制素、活化素及卵泡抑素对动物生殖机能的影响及其分泌的调节。抑制素和卵泡抑素均可抑制垂体FSH的活性,从而影响动物的生殖功能。抑制素受内分泌、旁分泌及自分泌作用;卵泡抑素以自分泌方式调节颗粒细胞功能,促进卵泡的黄体化;活化素以自分泌方式调节颗粒细胞的分化,阻止排卵卵泡的黄体化,并有诱导产生和增加FSH受体的功能。     

牛卵巢黄体类型与卵泡生长发育关系的组织学研究

本试验通过对牛卵巢不同黄体类型和各级卵泡生长发育状况的组织学观察 ,探讨了不同黄体类型对各级卵泡生长发育的影响 试验结果表明 :1)不同类型黄体之间 ,黄体功能的强弱不同 黄体功能由强至弱依次为圆锥状型 (Ⅰ型 )、火山口状型 (Ⅱ型 )、蘑菇状型 (Ⅲ型 )、扁平片状型 (Ⅳ型 )、表面无黄体型 (Ⅴ型 ) 2 )黄体类型对生长发育过程中各级卵泡的数量有一定的影响 Ⅴ型腔前卵泡总数和有腔卵泡总数与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型的腔前卵泡总数和有腔卵泡总数之间差异极显著 (p <0 0 1) ,而Ⅰ、Ⅱ型之间差异不显著 Ⅲ、Ⅳ之间差异显著 ,Ⅰ、Ⅱ型与Ⅲ、Ⅳ型之间差异显著 (p <0 0 5) 3)黄体类型对各级卵泡平均直径均无显著影响     

抑制素基因免疫京白鸡后在心脏组织中的表达

[目的]探讨基因免疫的安全性。[方法]抑制素基因免疫京白鸡后,取其心脏组织制备石蜡切片,再利用免疫组化方法检测心脏组织切片中是否有抑制素基因残留（即是否有阳性点的存在）。[结果]在心脏组织切片中,试验组和对照组均无阳性点。[结论]抑制素免疫后京白鸡的心脏组织中无外源抑制素表达,说明抑制素基因免疫是安全的。     

Endocrine and ovarian responses in water buffalo cows immunized against inhibin and subjected to the Ovsynch protocol

The aim of this study was to investigate the feasibility of stimulating ovarian follicle development in order to improve fertility in water buffalo cows by immunization against inhibin. The experiment was carried out in early summer(May) and included 24 multi-parity crossbred Murrah-Swamp buffaloes that were divided into immunized(n=11) and control(n=13) groups. Each immunized cow was administered with a 2-m L immunogen of mineral oil adjuvant containing 2 mg of recombinant inhibin α-subunit fusion protein. The controls were treated with the adjuvant only. All animals received Ovsynch protocol treatment, starting on the day of the antigen administration, and they were artificially inseminated upon behavioral estrus. As a result, all of the immunized buffaloes generated antibodies against inhibin during the experimental period and had higher plasma concentrations of follicle-stimulating hormone(FSH), activin, and estradiol(E2) related to estrous expression. A higher proportion of immunized animals expressed estrus behavior than did the controls(72% vs. 30%, P0.05). On average, inhibin-immunized buffaloes had significantly more large follicles(≥9 mm in diameter) than the controls(mean±SEM; 1.2±0.1 vs. 0.84±0.1, respectively; P0.05) and a slightly higher mean total number of follicles(≥2 mm; 11.4±0.7 vs. 9.0±1.1, respectively; P=0.09) and small(2–4 mm) follicles(8.81±0.6 vs. 6.84±1.0, respectively; P=0.12). A higher percentage of cows ovulated in the immunized group than in the control group(91%(10/11) vs. 54%(7/13), respectively; P0.05). Moreover, inhibin-immunized cows had slightly larger corpus luteum(CL) than the controls 9 days after ovulation and significantly higher(P0.01) post-ovulation peak plasma progesterone(P4) concentrations. Immunization against inhibin also marginally increased the conception rate 42 days after insemination(45.8% vs. 15.4%; P0.05). These results demonstrate that immunization against inhibin, coupled with the treatment with the Ovsynch protocol, can constitute a new technique to increase fertility in water buffalo cows.     

黄鳝出血病三联微胶囊口服疫苗制备及免疫效果研究

【目的】制备出能有效防御黄鳝出血病的三联微胶囊口服疫苗,促进黄鳝养殖业健康发展。【方法】以嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌及温和气单胞菌为抗原,海藻酸钠为壁材,利用乳化法制备三联微胶囊口服疫苗,然后直接拌入饵料对健康黄鳝进行口服免疫,7 d后进行加强免疫,测定各项血清免疫指标。加强免疫结束15 d后,经腹腔注射3种活菌(1.0×109 CFU/mL)进行攻毒试验,检验三联微胶囊口服疫苗对黄鳝的免疫保护率。【结果】制备获得的三联微胶囊口服疫苗的平均粒径为44.5μm,平均含菌量为4.56×109 CFU/mg。按0.4和0.6 g/kg的剂量口服免疫黄鳝,其血清补体C3含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性均显著高于对照组(P<0.05),血清平均抗体效价分别为7.5949和11.0651,对应的免疫保护率为60%和65%,且0.6 g/kg剂量组的各项指标均高于0.4 g/kg剂量组。【结论】制备获得的三联微胶囊口服疫苗能显著提高黄鳝血清SOD、ACP活性及刺激血清补体C3产生,有效抵御由嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和弗氏柠檬酸杆菌引起的出血病,生产使用时须进行加强免疫,并适当加大免疫剂量。