草鱼MYH mRNA表达量分析中采用的内参基因稳定性比较

本研究分别以β-actin、18SrRNA和GAPDH为内参基因,采用实时荧光定量PCR对草鱼早期发育时期肌球蛋白重链（myosin heavy light,MYH）基因的mRNA表达量进行分析,并比较不同内参基因对MYH基因mRNA表达水平检测结果的准确性。研究结果表明,以β-actin和GAPDH作为内参,MYH基因mRNA表达水平完全一致,其表达量从原肠到仔鱼阶段逐次递增,仔鱼与原肠期阶段相比表达量差异显著;当采用18S rRNA作为内参时,MYH基因mRNA在发育阶段的表达量呈不稳定状态。因此,β-actin和GAPDH均可作为内参基因,用于草鱼早期发育中MYH基因mRNA的相对定量研究;而18S rRNA作为内参时,可能会对检测结果造成偏差。本研究不仅准确的揭示了草鱼MYH基因mRNA的表达特征,并且为荧光定量PCR技术在鱼类基因表达研究方面提供了有价值的参考。     

鳜miR-21的时空表达特征及短期饥饿胁迫下的适应性节律表达调控

miRNAs 作为一类具有重要调控作用的非编码单链小分子 RNA, 对生物节律的调控发挥着重要的作用。为探究鳜(Siniperca chuatsi) miR-21 的时空表达特征以及短期饥饿对其昼夜节律表达的影响, 本研究利用实时荧光定量 PCR 分析了鳜胚胎不同发育阶段、幼鱼不同组织以及饥饿 5 d 后鳜白肌中 miR-21 的表达特征。结果显示, 在胚胎发育的早期可以检测到较高水平的 miR-21, 随着胚胎的发育其表达逐渐降低, 至原肠胚早期仅能检测到少量 miR-21; miR-21 在原肠胚后的表达有所提高, 但除尾芽期和心搏期外其余各阶段表达量无显著性差异; miR-21 在所检测的组织中均有表达, 其中在心、肠和红肌中具有较高水平的表达; 正常投喂时, 鳜白肌中 miR-21 的表达具有昼夜节律性, 为昼低夜高的节律性振荡; 饥饿 5 d 后, miR-21 的表达虽仍具有昼夜节律性, 但其中值、振荡幅度、 峰值相位等都受到了明显影响; 靶基因预测分析显示 Arntl2 mRNA 的 3′UTR 序列有 miR-21 结合的靶位点, 且荧光定量 PCR 的结果显示 Arntl2 的表达趋势在饥饿 5 d 后与 miR-21 的表达趋势相反。结果表明, miR-21 呈母源性表达, 在神经胚后表达开始上升说明 miR-21 可能参与调控神经胚后的器官形成; miR-21 在不同组织中的表达无明显组织特异性, 但在心、肠和红肌组织中可能有重要功能; 饥饿胁迫能够影响 miR-21 在鳜白肌的节律性表达, 并且 miR-21 可能通过调控昼夜节律基因 Arntl2 参与鳜的节律性调控从而影响鳜肌肉的生长和逆境胁迫下的生理功能。     

茶树菇-Ws子实体营养成分分析研究

[目的]对茶树菇一Ws子实体的营养成分进行测定和分析研究。[方法]采用现代仪器和方法测定并分析茶树菇一Ws中糖类、蛋白质和脂肪三大营养成分及维生素、氨基酸、矿质元素等各营养元素的含量,分析该菇种营养价值。[结果]茶树菇一ws子实体总糖及蛋白质含量都很高,分别为310．40和197．60∥kg,而脂肪含量仅21．30∥kg,并富含B族维生素和矿质元素,同时还含有18种氨基酸,氨基酸总合量为171．29g／kg,是一种高蛋白、低脂肪的健康食品。[结论]茶树菇一Ws的营养价值和药用价值均较高,对人体健康极为有利,具有推广栽培价值。     

翘嘴鳜肌球蛋白轻链3b基因（MLC3b）的分子克隆和特征分析

翘嘴鳜以其优良肉质性状近期已成为中国极具商品价值和大力推广的人工养殖名贵鱼类之一。为了解其控制优良肉质性状的遗传基础,本文采用同源克隆RT-PCR方法,获得该鱼肌球蛋白轻链MLC3b基因cDNA序列,该基因cDNA序列为453bp,编码150个氨基酸残基,通过PROSITE tools软件预测显示,该轻链具有两个保守的EF-手相结构和一个C-末端保守序列,且该MLC3轻链N端没有高等脊椎动物特有标志序列。MLC3b基因cDNA序列与MLC3a编码区的同源性达97.7%。本研究结果将为名贵鱼类肉质结构基因及功能的研究提供分子生物学基础。