牡丹花瓣脂氧合酶测定方法的研究

采用紫外分光光度法,以亚油酸钠为反应底物,研究了牡丹花瓣脂氧合酶(LOX)的酶学特性并建立了其测定体系。结果表明,牡丹花瓣脂氧合酶反应的最适pH值为4.5,最适温度为45℃,最适底物浓度为0.594 mmol/L。该酶有着较好的热稳定性,90℃保温1 h后仍保持较高活性。     

水稻中以亚麻酸为底物的脂氧合酶活性测定

采用紫外分光光度法,以水稻新出全展叶片为实验材料,研究了以亚麻酸为反应底物的脂氧合酶(LOX)活性的测定。结果表明:在30℃条件下LOX活性测定的最适pH值是7.6;在5.2~8.8的pH范围内,以亚麻酸或亚油酸为反应底物所测得的LOX活性的变化趋势非常相似,但以亚麻酸为底物测得的LOX活性要高于以亚油酸为底物所测得的LOX活性;本实验条件下,经0.5或1 mmol/L的LOX专一性抑制剂水杨苷异羟肟酸(salicylhydroxam ic ac id,SHAM)处理的水稻叶片组织中LOX活性明显受到抑制。以亚麻酸为反应底物的脂氧合酶(LOX)活性测定方法的建立对于与茉莉酸(jasmon ic ac id,JA)代谢相关的LOX活性的研究具有重要的参考价值。     

黄瓜果实脂氧合酶活性测定方法的建立

采用紫外分光光度法,以亚油酸钠为反应底物,研究了黄瓜果实脂氧合酶(LOX)的酶活性测定方法。结果表明,黄瓜果实脂氧合酶最适pH为7.0,最适温度为40℃,最适底物浓度为3.3×10-4mol.L-1。该酶有着很好的热稳定性,90℃保温1h后仍具有很高的活性,70℃保温1h可能对该酶的活性有激活作用。     

毛尖茶叶中脂氧合酶活性测定方法的建立

采用紫外分光光度法,以亚油酸钠为反应底物,研究毛尖茶叶中的脂氧合酶(LOX)的酶活性测定方法。结果表明,毛尖茶叶中的脂氧合酶的最适pH值为6.3,最适温度为50℃,在底物300μL时酶活性最好,且有较好的热稳定性,60℃保温1 h后仍具有一定活性。     

制取小麦旗叶粗酶液的最佳缓冲体系研究

[目的]探讨制取小麦旗叶粗酶液的最佳缓冲体系。[方法]采用不同的缓冲体系制备小麦旗叶粗酶液,测定小麦旗叶中过氧化物酶(POD)、淀粉酶、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、脂氧合酶(LOX)的活力。[结果]当pH为6.2时,POD活力最高;当pH为5.8时,淀粉酶活力最高;当pH为7.0时,PAL和LOX活力最高。选用磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液为提取缓冲液时,PAL和LOX活力最高。当此缓冲液浓度为0.15 mol/L时,POD活力最高;当此缓冲液浓度为0.10 mol/L时,淀粉酶和LOX活力最高;当此缓冲液浓度为0.05 mol/L时,PAL活力最高。[结论]制取粗酶液的最佳缓冲体系是pH 7.0、0.10 mol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液。     

烤烟存储期间烟叶酶活性变化的初步研究

[目的]探究初烤烟存储过程中烟叶相关酶活性变化。[方法]以烤烟品种NC89为材料,研究皖南地区烟叶存储过程中多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、脂氧合酶(LOX)、苯丙氨酸裂解酶(PAL)活性随存储时间延长的变化趋势。[结果]随着存储时间变长,几种酶活性均呈现先上升后下降的趋势。其中多酚氧化酶、脂氧合酶和苯丙氨酸裂解酶活性在存储180 d时分别达到最大值[50.50 U/g,34.20、0.54△OD/(g·min)],而过氧化物酶活性则在存储270 d时达到最大值(118.90 U/g)。[结论]该研究为进一步丰富烟叶陈化理论,探究烤烟存储质量提升形成机理提供了参考。     

菠萝蜜果实成熟过程中香气物质形成相关酶的活性变化

[目的]分析菠萝蜜果实成熟过程中香气物质形成相关酶的活性变化,确定对菠萝蜜果实香气物质形成起关键性作用的酶,为菠萝蜜栽培及育种提供理论支撑。[方法]以不同基因型的菠萝蜜为材料,分别以亚油酸钠、氢过氧化亚油酸钠、乙醛和丁醇为底物,测定脂氧合酶( LOX)、氢过氧化物裂解酶( HPL)、醇脱氢酶( ADH)和醇酰基转移酶( AAT)在果实成熟过程中的活性变化。[结果]在果实成熟过程中,LOX在果实成熟早期具有较高活性,在香气物质合成的前期起主要作用;HPL主要参与菠萝蜜果实中醛类香气的形成;ADH活性水平较高;AAT活性变化在种质间存在差异,在果实成熟末期活性增强或略有下降。[结论] AAT是菠萝蜜果实特征香气物质形成的关键酶。     

羟基化酶产生菌Stenorophomonas maltophilia CGMCC1.1788对农药氯噻啉生物转化的条件研究

[目的]探究羟基化酶产生菌Stenorophomonas maltophilia CGMCC 1.1788菌株中羟基化酶的转化活性.[方法]采用摇瓶发酵转化方法对羟基化酶产生菌S.maltophilia CGMCC 1.1788对农药氯噻啉的生物转化条件(不同生长时期的细胞、温度、pH等影响因子)进行了优化.[结果]确立了转化条件:100 ml锥形瓶最佳装液量10 ml,最佳反应温度25℃,最适pH 6.5,最佳反应底物起始浓度0.2 g/L,最佳反应时间48 h.[结论]为较好地发挥该菌的微生物转化功能及了解羟基化酶的生物学特性提供了理论依据.     

绿盲蝽乙酰胆碱酯酶最佳反应体系的建立

为明确绿盲蝽[Apolygus lucorum(Meyer-Dür)]乙酰胆碱酯酶(AChE)活性测定的最佳反应条件,采用正交试验研究了酶浓度、底物浓度、反应时间、反应温度、反应体系pH值5个因素对绿盲蝽三龄若虫AChE活性测定的影响。通过极差分析和方差分析发现,各因素对AChE活性测定影响的大小顺序为:反应时间酶浓度底物浓度pH值反应温度。绿盲蝽若虫AChE活性测定的最适反应条件为:酶浓度6头/mL、底物浓度6mmol/L、反应时间5min、反应温度35℃、pH值8.0。     

紫外线处理对新疆哈密瓜贮藏中几种酶活性的影响

[目的]分析紫外线处理对新疆哈密瓜贮藏中几种酶活性的影响。[方法]利用紫外线处理哈密瓜,测定贮藏期间哈密瓜的过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、脂氧合酶(LOX)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和超氧化物歧化酶(SOD)等指标,得出最佳的紫外线处理条件。[结果]哈密瓜紫外线处理及处理后贮藏过程中色泽、风味、营养成分变化与POD、PPO、LOX、PAL及SOD 5种关键酶活密切相关。[结论]紫外线处理哈密瓜50 min,对延缓果实后熟衰老效果最为明显,可为哈密瓜的贮藏保鲜提供新的科学依据。     

茉莉花粗酶液酶解β-D-葡萄糖苷活性研究

以pNPG为底物,测定茉莉花中具有β-D-葡萄糖苷酶活性的粗酶液活性.最适反应条件为总反应体积1 mL,反应时间20 min,底物pNPG体积200 μL,浓度50 mmol·L-1,最适pH值6.0,最适反应温度50℃;并以此条件,研究茉莉花开放过程中粗酶液酶解β-D-葡葡糖苷的活性变化,结果表明该酶液随着茉莉花的开放,酶活性逐渐增高,直至萎蔫失水后,活性才降低.     

正交法优选乌蔹莓过氧化物酶活性的测定条件

[目的]优选乌蔹莓过氧化物酶活性的测定条件.[方法]以酶活力为考察指标,通过正交试验,研究酶体积、底物体积、反应体系的酸碱度和反应温度等不同条件对乌蔹莓过氧化物酶活性的影响.[结果]影响乌蔹莓过氧化物酶活性测定的因素大小顺序依次是：底物体积＞温度＞酶体积＞ pH.乌蔹莓过氧化物酶活性测定的最佳条件为：0.5 ml浓度2％的H2O2,温度为35℃,酶体积为0.1ml,pH值为5.5.[结论]底物体积和温度是影响过氧化物酶活性的主要因素.     

丝瓜多酚氧化酶及过氧化物酶酶学特性的研究

应用分光光度法研究丝瓜多酚氧化酶及过氧化物酶酶学特性的影响因素,为丝瓜酶促褐变的研究提供基础。以普通丝瓜果肉为材料,PPO以邻苯二酚为底物,POD以愈创木酚为底物,研究分析反应温度、反应时间、pH及测量波长、底物的浓度、PPO提取酶液添加量对丝瓜PPO、POD活性的影响。丝瓜褐变相关酶提取和测定方法的优化:(1)PPO最佳反应体系:测定波长408nm、反应温度是35℃、pH为6.0、酶液用量0.15mL,最适底物为邻苯二酚,底物浓度为0.056mol·L~(-1);(2)POD最佳反应体系:测定波长410nm,反应温度为40℃,最佳pH为5.5,酶液用量0.1mL,底物是愈创木酚,浓度为0.067mol·L~(-1)。     

昆虫取食和机械损伤对棉花和玉米脂氧合酶活性的诱导作用

脂氧合酶(LOX)是植物防御反应中的关键酶,脂氧合酶途径的产物包括茉莉酸、绿叶挥发物等,在植物防御反应中起着重要作用.为了明确脂氧合酶在昆虫取食和机械损伤诱导植物通信中的作用,以棉花、玉米为研究对象,分析不同处理(包括棉蚜取食和机械损伤诱导棉花及其相应挥发物诱导邻近玉米、玉米螟取食和机械损伤诱导玉米及其相应挥发物诱导邻近棉花)的诱导防御机制,测定不同方法处理24、48、72 h后棉花、玉米的脂氧合酶的活性.结果表明,昆虫取食和机械损伤不仅会诱导棉花、玉米植株的LOX活性升高,还能诱导邻近健康植株的LOX活性升高.研究结果表明,脂氧合酶在昆虫取食和机械损伤诱导的棉花、玉米间通信中起作用.     

陈化期间不同地区烤烟叶片中酶活性变化研究

探索在河南气候条件下陈化的不同地区烤烟中多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、脂氧合酶(LOX)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的变化规律。结果表明:(1)在不同陈化阶段,国内4个烟区烟叶中各酶活性表现为在烟叶陈化初期呈现逐渐增加的趋势,到陈化6个月或者9个月时酶活性达到最大值,之后酶活性逐渐降低。(2)在24个月的陈化进程中,各地区的烟叶中4种酶的酶活均较其陈化初始降幅有所不同,其中湖南烟区烤烟过氧化物酶和苯丙氨酸解氨酶活性降低幅度最大,分别约为77.01%和14.15%;多酚氧化酶则以云南烟叶降幅最大,为66.67%;贵州烟叶的脂氧合酶活性降低最多,为68.93%。(3)津巴布韦烟区烤烟各酶活在15～39个月时逐渐降低,且活性相对较低,以脂氧合酶活性降幅最大。     

荔枝果实采后脂氧合酶活性的变化

研究了采后冷藏、外源ABA、亚精胺(Spd)、1-甲基环丙烯(1-MCP)、热处理及酸处理对荔枝果实脂氧合酶(LOX)活性变化的影响。荔枝果实组织中LOX活性测定反应系统的最适pH是6．5。与3℃冷藏相比,0℃下糯米糍果皮LOX活性升高较快,丙二醛(MDA)含量积累加快,在21d时分别高出34．9％和25．6％。0℃下桂味果皮LOX活性先升后降,于14d达到高峰。冷害促进了果皮LOX活性增加,但0℃下糯米糍果肉的LOX活性和MDA含量均低于3℃下果肉。外源ABA、Spd、1-MCP处理不同程度地降低了果皮LOX活性,减轻了果实冷害的发生程度。推测由LOX主导的膜脂过氧化作用引起的膜结构破坏在荔枝果实衰老和冷害褐变中可能起重要作用。46．2～80．0℃的热水处理诱导LOX活性的升高,适当浓度的酸则显著抑制该酶的活性。     

固定化菊粉酶酶解菊芋提取液制备果糖的研究

[目的]研究固定化菊粉酶酶解菊芋提取液制备果糖的适宜反应条件。[方法]以菊芋提取液为原料,以固定化菊粉酶酶法制备果糖,采用蒽酮比色法测定总糖含量,采用3,5-二硝基水杨酸法测定果糖含量,研究了底物浓度、反应温度、pH值、加酶量对果糖制备的影响。[结果]底物浓度、反应温度、pH值、加酶量对果糖制备均有显著影响。固定化菊粉酶酶解菊芋提取液制备果糖的适宜反应条件为:底物浓度10%(W/V),反应温度60℃,pH值5.0,加酶量3.0U/g菊糖。在适宜条件下反应12h,底物降解率为98.2%,果糖占总糖的87.6%,总转化率高。[结论]固定化菊粉酶既保持了游离酶的活性,又具有固定酶的功效,具有实用价值。     

外源甜菜碱处理对黄瓜冷藏期间活性氧代谢的影响（英文）

[目的]研究不同浓度的外源甜菜碱(GB)处理对低温胁迫下黄瓜抗氧化作用的影响,探讨甜菜碱对黄瓜抗冷性作用的机理。[方法]以"中农8号"黄瓜为试材,分别用浓度0、5、10、15 mmol/L的甜菜碱浸泡黄瓜15 min,置于4℃条件贮藏。[结果]外源甜菜碱处理提高了黄瓜甜菜碱含量,降低果实中脂氧合酶(LOX)活性、增强过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性并有效清除过氧化氢(H2O2)、减少丙二醛(MDA)积累。[结论]以10 mmol/L甜菜碱处理黄瓜效果最为明显。     

水分胁迫下离体烟叶中脂氧合酶活性、水杨酸与茉莉酸积累的关系

 采用河南农业大学设计的电热式温湿度自控烤烟箱 ,研究水分胁迫下离体烟叶中脂氧合酶活性、水杨酸(SA)与茉莉酸 (JA)积累的关系。结果表明 ,水分胁迫下茉莉酸积累的同时 ,脂氧合酶 (LOX)活性也上升 ,两者呈极显著正相关 ;去加愈创木酸 (NDGA)是LOX专一抑制剂 ,在抑制LOX活性的同时也阻断了水分胁迫下茉莉酸的积累 ;无细胞体系加入LOX可直接引起茉莉酸的积累。这表明LOX很可能是JA生物合成及胁迫诱导JA积累的一种关键酶 ,水杨酸抑制茉莉酸积累。     

赛买提杏多酚氧化酶特性的研究

[目的]多酚氧化酶(PPO)会对杏加工生产产生重大影响,它不仅影响杏加工产品如杏酱等的色泽,而且也影响其品质,特别是在制作杏茶、杏汁饮料的过程中更为突出.所以,准确测定PPO活性,具有重要的生理和现实意义.[方法]以新疆主栽赛买提鲜杏为原料,对杏组织中PPO的特性进行了研究.[结果]杏多酚氧化酶最适反应pH为6.0,最适反应温度为25℃;杏多酚氧化酶的最适反应波长为400 nm,最适反应时间为6 min,当酶加入量为0.4 mL时,酶活性最大;60～80℃处理10 min,酶基本失活.[结论]丙酮粉与pH为6.0的磷酸缓冲液反应6 min,离心后制得粗酶液;一定量的磷酸缓冲液和邻苯二酚在25℃下保温10 min,添加0.4 mL酶液,在400 nm波长下,测定的PPO活性较为准确.