甘薯品种南薯88的组织培养及植株再生研究

[目的]为南薯88的离体筛选及遗传转化奠定基础。[方法]以南薯88的叶片和叶柄为外植体,置于不同激素配比的培养基中,进行组织培养及植株再生,研究不同激素及外植体对南薯88植株再生的影响。[结果]单独使用6-BA、NAA诱导愈伤组织的效果不理想。过高浓度的2,4-D不利于外植体根的形成,也不利于芽的诱导。在MS+NAA1 mg/L+6-BA0.5 mg/L、MS+2,4-D0.05 mg/L+KT1 mg/L培养基中,两种外植体的出愈率均达100%,根分化率均达100%,叶片的芽分化率分别为20%、7%,叶柄的芽分化率均为7%,成功获得再生植株。相同的培养基,不同外植体的愈伤组织生长情况差异不大,器官的分化表现出一定的差异。[结论]南薯88组织培养较适宜的培养基为MS+NAA1 mg/L+6-BA0.5 mg/L、MS+2,4-D0.05 mg/L+KT1 mg/L。南薯88叶片的分化能力大于叶柄。     

普那菊苣再生体系的优化

以普那菊苣叶片、叶柄、茎段为外植体,比较了在含不同激素浓度配比的MS培养基上愈伤组织、芽分化以及根再生的情况,优化普那菊苣组织培养再生体系。结果表明,0.1%Hg Cl2灭菌8 min时,能有效地去除外植体表面上的微生物,而且对外植体的伤害较轻;叶片、叶柄和茎段均能通过组织培养获得再生植株,其中,叶片外植体诱导效果最佳,茎段外植体诱导效果最差;普那菊苣叶片的极性对愈伤组织的形成以及不定芽的产生没有显著影响;外植体类型是影响愈伤组织、芽分化以及根再生的主要因素。优化的普那菊苣再生体系为:使用叶片外植体,愈伤组织和芽分化诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+Ag NO30.5 mg/L+Vc 0.3 mg/L或MS+KT1.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L+CH 100 mg/L,生根培养基为MS+NAA 0.2 mg/L或MS+IBA 0.2 mg/L。     

"花魔芋"顶芽组织培养快繁技术研究

[目的]通过器官发生直接途径再生植株的方式,研究建立完善的"花魔芋"组织培养快繁技术体系.[方法]以"花魔芋"球茎的顶芽为外植体,研究不同的灭菌方法、培养基、继代周期等因素对"花魔芋"组织培养的影响.[结果]适合"花魔芋"顶芽灭菌的方法是0.20％HgCl2灭菌10～15 min;适合初代培养的培养基是MS+6-BA 1.0～3.0 mg/L+NAA 0.2～0.5 mg/L;适合增殖培养的培养基是MS+6-BA 1.0～2.0 mg/L+NAA 0.1～0.2 mg/L;适合生根培养的培养基是1/2MS+NAA(或IBA)0.1～0.2 mg/L+活性炭0.1％.[结论]得出了一套完善的"花魔芋"组织培养快繁技术体系,能育出有较高素质的"花魔芋"种苗,可以推广应用于"花魔芋"的工厂化育苗,同时也为其他品种的魔芋组织培养快繁技术研究提供参考.     

野韭菜组织培养及快速繁殖研究

通过对野韭菜组织培养过程中外植体及激素配比的研究,建立野韭菜植株再生体系.结果表明,根尖外植体最适合野韭菜离体培养,MS+0.2mg/L 2,4-D+0.5mg/L ZT为最佳愈伤组织培养基,MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT为最佳不定芽分化培养基,MS+0.1mg/L NAA为生根培养基,移栽成活率达98％以上.     

葡萄抗寒砧木外植体愈伤组织诱导和植株再生体系的研究

[目的] 研究葡萄抗寒砧木外植体愈伤组织的诱导和植株再生体系的建立.[方法] 以河岸、山河系列葡萄抗寒砧木为试材,采用对比试验和正交试验,研究葡萄试管苗再生的最佳外植体、最佳激素组合.[结果] 通过对葡萄叶片、叶柄砧、无芽茎段、新根再生的研究,得出最佳再生外植体为叶柄砧.利用细胞分裂素6-BA、TDZ与生长素组合诱导不定芽,MS＋ 6-BA 3.0mg/L＋ NAA 0.05 mg/L不定芽生成诱导率为6.52％;以MS＋TDZ 3.0 mg/L＋ IAA0.05 mg/L为培养基,诱导率为2.5％.[结论] 建立了葡萄抗寒砧木的再生体系.     

半夏胚状体诱导及植株再生的研究

以采自甘肃省西和县的野生半夏为试验材料,以MS为基础培养基,观察了不同的激素配比及不同外植体对愈伤组织诱导、胚状体分化及植株再生的影响.结果表明,最佳培养基为MS+2,4-D(0.5 mg/L)+6-BA(1.5 mg/L),外植体以叶柄、株芽和块茎为好.     

薄皮核桃组织培养与快速繁殖

[目的]研究薄皮核桃组织培养与快速繁殖的方法.[方法]以薄皮核桃腋芽为外植体,DKW为基本培养基,通过不同的激素种类和浓度配比,建立薄皮核桃组培快繁体系.[结果]组织培养与快速繁殖最适培养基为:启动培养基:DKW/MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.01 mg/L;增殖培养基:DKW+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L;壮芽培养基:DKW+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.05 mg/L;生根培养基:1/2 DKW+IBA1.0mg/L,生根率可达70;以上.[结论]研究筛选获得适宜薄皮核桃快繁的最佳培养条件,为建立新疆薄皮核桃快繁体系、扩大优质薄皮核桃种植规模奠定一定基础.     

金康卡百合离体培养和愈伤诱导的初步研究

[目的]百合组培快繁技术途径.[方法]以金康卡百合的子房、花柱、花丝为外植体,研究不同灭菌时间、不同培养基对外植体组织培养过程的影响.[结果]在愈伤诱导培养基上培养两周左右外植体出现膨大,培养20 d左右,即有淡绿色愈伤组织出现;不同的NAA和BA浓度对愈伤诱导影响较大,激素浓度为0.5 mg/L NAA和1.5 mg/L BA的MS培养基对促进子房膨大和愈伤诱导效果最佳.[结论]不同的灭菌时间对外植体污染率的影响不同,均随着灭菌时间的延长呈显著下降的趋势.金康卡百合的子房、花柱、花丝形成愈伤组织能力有一定差异,用子房作外植体比花柱、花丝更易产生愈伤组织且存活率较高.     

橡胶草高效再生体系的建立和优化

[目的]优化橡胶草再生和遗传转化体系。[方法]以橡胶草茎和叶为外植体,以1/2MS和MS为基本培养基,研究不同激素浓度配比、外植体类型和激素浓度对橡胶草不定芽诱导和生根的影响。[结果]橡胶草进行组织培养的最佳外植体类型为茎,诱导不定芽形成的最佳激素浓度配比为1.0 mg/L 6-BA和0.10 mg/L NAA。诱导不定芽生根的最佳激素浓度为0.10 mg/L NAA,生根率达100%,移栽成活率达95%以上。[结论]建立了橡胶草高效再生体系,对提高橡胶草组织培养的效率和转化率具有重要意义。     

菊花脑离体培养再生植株研究

[目的]研究菊花脑离体培养再生植株技术。[方法]以菊花脑叶片、叶柄、茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究了不同激素组合对其不定芽诱导率的影响。[结果]叶片外植体诱导率最高,叶柄次之,茎段最低。菊花脑叶片生芽的最佳培养基是MS＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA;叶柄生芽的最佳培养基为MS＋0.5mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA;茎段生芽的最佳培养基是MS＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA。[结论]建立了菊花脑叶片、叶柄、茎段直接诱导不定芽的组织培养技术。     

广西优良珍贵树种灰木莲的组织培养

【目的】探索灰木莲组培快繁体系,为灰木莲的进一步开发和利用提供参考依据。【方法】以灰木莲盆栽苗的带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同种类、不同浓度植物生长调节剂,研究不同培养基对腋芽萌发、芽增殖及生根的影响。【结果】1~5号培养基均可以诱导灰木莲腋芽萌发,其中3号培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L腋芽萌发速度最快,芽的诱导率89.3%;添加KT（Kinetin,激动素）的10~13号培养基增殖系数为2.2~2.7,没有添加KT的6~9号培养基增殖系数为1.8~2.2,11号培养基 MS+6-BA 0.3 mg/L +NAA 0.05 mg/L+KT 1.0 mg/L芽的增殖系数可达2.7,为最适宜的增殖培养基;添加生长调节剂浓度在0.5 mg/L以上的17~21号培养基能诱导灰木莲组培苗生根,其中NAA浓度为0.5、1.5 、2.0 mg/L生根率分别为33.3%、45.4%、58.3%,21号培养基 1/2MS+NAA 2.0 mg/L上生根率最高。【结论】初步建立灰木莲组织培养体系,组培苗的芽诱导率和增殖率较高,苗木长势良好。     

花花柴组织培养与植株再生体系的优化

【目的】探讨植物生长调节剂、外植体及NaCl等因子对花花柴愈伤组织诱导、分化与植株再生的影响,并优化花花柴的再生植株体系,建立直接从茎端诱导丛生芽的植株再生体系。【方法】对生长约为2个月的花花柴植株进行不同的处理。采用不同浓度组合的细胞分裂素6-BA(6-Benzylaminopurine)和生长素NAA(α-Naphthaleneacetic acid)的MS(Murashige and Skoog)培养基(0.8%(w/v)琼脂粉)。【结果】最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.6 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA2.0 mg/L;从外植体直接诱导不定芽的最佳培养基是MS培养基;诱导根的最佳培养基是1/2MS+NAA mg/L。【结论】花花柴叶片是愈伤组织形成的最佳材料,NaCl胁迫对愈伤组织的诱导有一定的抑制作用。     

三褶虾脊兰无菌播种快繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplicata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0.5 mg/L 6-BA、0.1 mg/L NAA 和 1.0 g/L AC）、附加物［椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥］及基本培养基（花宝1号、1/2花宝1号、MS和1/2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1/2花宝1号+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+200 mL/L CM+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基中培养150 d左右可形成原球茎,萌发率超过80%以上;诱导原球茎在1/2MS+100 mL/L CM+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4.5;原球茎接种于花宝1号+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上分化培养40 d后,再转入花宝1号+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+2.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上培养40 d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100.0%,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的三褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

绿萝组织培养与快繁技术

[目的]研究绿萝组培快繁技术要点,为绿萝再生体系建立和工厂化生产提供技术支持.[方法]以绿萝叶片和无节茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同浓度的激素组合(1.0~3.0 mg/L 6-BA、0.1~0.3 mg/L NAA、0.1~0.3mg/L IBA)对愈伤组织诱导及其分化、不定芽诱导、生根培养等的影响.[结果]两种外植体均能产生愈伤组织,但茎段产生愈伤组织较快,产生不定芽也快.叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L.茎段诱导愈伤组织及其分化的最适培养基均为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/L,最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L.[结论]绿萝叶片和茎段可作为愈伤组织培养的较好外植体,茎段培养效果优于叶片.     

枸杞优选优株快繁体系的建立及优质种苗繁殖技术研究

【目的】以枸杞宁杞1号优选优株嫩枝为外植体,研究影响枸杞离体快繁的各种因素,建立优选优株快繁体系,以期达到大量培育枸杞优质种苗的目的。【方法】通过观察采集优选优株,进行外植体的灭菌方法、侧芽诱导及继代培养、生根培养基激素的筛选,确定出相适应的培养基;同时对试管苗的移栽基质也进行了筛选。【结果】加用青霉素注射液500 mg/L浸泡5~8 min后进行外殖体进行表面消毒时,易获得无菌外殖体。适宜培养基:侧芽诱导MS+6-BA0.5 mg/L+IAA0.1 mg/L;增殖培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+IAA1.0mg/L;生根培养基1/2MS+IBA0.3 mg/L;移栽基质泥炭∶珍珠岩2∶1,成活率96%。【结论】枸杞优选优株快繁体系的建立,对于加速育种进程和新育良种的繁育、推广奠定了良好的技术基础,通过优选优株进行枸杞优质种苗的培育是可行的。     

白亮独活的组织培养和植株再生研究

建立了白亮独活组织培养和小植株再生的体系。以叶片为外植体,在含不同生长调节物质的MS培养基中培养,结果表明,在MS培养基上附加2,4-D 2.0 mg/L和6-BA 0.5 mg/L对愈伤组织的诱导率可达100%;而愈伤组织继代最合适的培养基培养为附加2,4-D2.0 mg/L和6-BA0.2 mg/L的MS培养基;苗的诱导以附加6-BA2.0 mg/L的MS培养基效果最好;生根在附加NAA0.2mg/L和IAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基中最好。     

白背三七组织培养技术

【目的】探讨不同激素配比对白背三七离体繁殖的影响,建立白背三七种苗再生繁殖体系。【方法】以当年生枝条为外植体,采用不同激素组合（0～0.1 mg/L 6-BA、0～0.2 mg/L KT、0～0.2 mg/L 2,4-D以及0～0.4 mg/L IBA、0～0.4 mg/L NAA）对带芽茎段进行不定芽诱导和增殖、壮苗和生根培养。【结果】在添加相同KT、2,4-D条件下,添加过高的6-BA（1.0 mg/L）会降低丛生芽增殖系数;而在相同6-BA、KT的条件下,添加2,4-D可提高芽的增殖,以在培养基MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L KT+0.2 mg/L 2,4-D中茎段丛芽增殖系数最高,为15.4,丛生苗较壮、生长良好。不同IBA、NAA组合均可诱导丛生芽生根,但以培养基MS+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA的生根效果最好,接种10 d开始生根,15 d时生根率为85.3%,每株平均生根数为4~9条,移栽成活率可达82.3%。【结论】建立了白背三七种苗再生繁殖体系,可为白背三七的产业化生产提供技术支撑。     

君迁子叶片培养再生植株的研究

 【目的】建立君迁子叶片离体再生体系,为转基因操作奠定基础。【方法】以君迁子幼叶为外植体,研究适合其再生植株的叶片部位、放置方式、基础培养基、植物生长调节剂以及暗培养时间等条件。【结果】叶片基部上表面朝下接种于1/2MS+ ZT 5.0 mg•L-1+IBA 0.01 mg•L-1的培养基,先期暗培养5周后转移至正常光照下培养效果最好,愈伤组织形成率、不定芽再生率和外植体平均不定芽数分别为100.0%、85.3%和2.8±0.6个。再生芽接种于不含植物生长调节剂的1/2MS培养基上,30 d时生根率达100%,平均根数和平均根长分别达5.4条和3.7 cm。再生植株炼苗后移栽,30 d时成活率达98.5%。【结论】成功地建立了君迁子叶片的离体再生体系。     

红腺忍冬组织培养快繁技术

【目的】研究广西山银花当家品种红腺忍冬的组织培养,为红腺忍冬种苗工厂化生产提供技术支持。【方法】以红腺忍冬腋芽为外植体,用0.1%升汞溶液灭菌处理;以MS为基本培养基,探讨不同浓度6-BA、NAA和MET组合对芽诱导、增殖培养和根诱导的影响。【结果】较适宜外植体灭菌的处理为0.1%升汞溶液（加吐温-80）处理7 min,外植体污染率为16.0%。春季取材的灭菌效果及腋芽萌发效果最好,冬季最差。较适宜的芽初代诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L,继代培养较适宜的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,生根培养较适宜的培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+MET 3.0 mg/L。【结论】通过红腺忍冬腋芽培养,得到可用于生产的组培苗,该技术可应用于红腺忍冬种苗工厂化生产。     

白玉蔗组织培养研究

[目的]以广西贵港市白玉蔗为材料,探讨影响白玉蔗离体培养的主要因素,建立其快速再生繁殖体系.[方法]以白玉蔗尾梢心叶为外植体,诱导愈伤组织并进行继代培养后,分别进行不同培养基和激素组合对白玉蔗愈伤组织芽分化培养、不定芽增殖和生根壮苗等影响试验.[结果]白玉蔗心叶切片供诱导愈伤组织是方便快捷的有效方法.心叶切片接人培养基(MS+2,4-D 3 mg/L,琼脂5g/L,糖30 g/L)30 d后,外植体迅速膨胀,边缘出现颗粒状、淡黄或黄色、质地均一的胚性愈伤组织或糊状的愈伤组织.诱导白玉蔗芽分化以培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+ NAA0.2 mg/L的效果最佳;培养不定芽增殖以MS+6-BA 3.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.6 mg/L+糖30.0 g/L培养基的效果最佳.PVP和活性炭对防止组培苗褐变的效果有差异,1%活性炭能有效抑制白玉蔗增殖培养基中丛生芽的褐化.在生根壮苗培养中,最优培养基为MS+ NAA 0.6 mg/L+糖50.0 g/L+活性炭0.1%.[结论]通过正交试验设计,建立了白玉蔗的再生繁殖体系,为加快白玉蔗繁殖速度、提高繁殖系数、节约种茎提供有效途径.