菊花脑离体培养再生植株研究

[目的]研究菊花脑离体培养再生植株技术。[方法]以菊花脑叶片、叶柄、茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究了不同激素组合对其不定芽诱导率的影响。[结果]叶片外植体诱导率最高,叶柄次之,茎段最低。菊花脑叶片生芽的最佳培养基是MS＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA;叶柄生芽的最佳培养基为MS＋0.5mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA;茎段生芽的最佳培养基是MS＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA。[结论]建立了菊花脑叶片、叶柄、茎段直接诱导不定芽的组织培养技术。     

葡萄砧木99R再生体系的建立

以99R葡萄无菌苗叶片、叶柄和茎段为外植体诱导不定芽再生,在MS培养基中附加不同浓度的6-BA与IBA、TDZ与IBA、6-BA与2,4-D组合。结果表明,叶片和叶柄较适宜的再生培养基为MS 5.0 mg/LBA 0.1 mg/L IBA,再生率分别为40.54%和50.00%,茎段适宜培养基为MS 2.0 mg/L BA 0.02 mg/L IBA,再生率达62.50%;一定时间的暗培养处理利于99R葡萄不定芽再生,3周为最适暗培养时间;不同节位外植体不定芽再生率随叶片节位下降而降低;卡那霉素浓度>3.0 mg/L时显著抑制叶片不定芽的发生,头孢霉素浓度<300 mg/L对叶片再生不定芽影响很小。     

柱杨的高效离体快繁技术

[目的]为利用组织培养技术培育柱杨新品种提供理论依据。[方法]以柱杨试管苗为材料,取其茎段为外植体,筛选最佳芽诱导培养基;分别以试管苗的叶片、茎段和叶柄为外植体,研究不同组织的再生芽诱导率;配制不同激素浓度的生根培养基诱导组培苗生根,筛选最佳生根培养基。[结果]培养基MS＋2.0 mg/L6-BA＋0.40 mg/LIAA诱导再生芽的效率最高,平均每块外植体再生芽8.6个,但芽的质量较差。综合考虑,较理想的芽诱导培养基为MS＋1.0 mg/L6-BA＋0.50 mg/L IAA;柱杨茎段产生再生芽的能力最强,叶柄次之,叶片最差;培养基1/2MS＋0.2 mg/LNAA与1/2 MS＋0.1 mg/LNAA诱导组培苗的生根率最高,每株平均生根数达8条以上,但根的质量较差。综合考虑,最佳生根培养基为1/2 MS＋0.2 mg/LIAA。[结论]柱杨最佳芽诱导培养基为MS＋1.0 mg/L6-BA＋0.50 mg/LIAA,最佳生根培养基为1/2 MS＋0.2 mg/LIAA。     

美人指葡萄再生体系的建立

以美人指葡萄为试材,研究了不同外植体类型、激素浓度配比以及暗培养时间等对器官再生的影响。结果表明:叶片、叶柄、茎段外植体均可再生出不定芽,其中叶柄的再生率最高;TDZ对美人指葡萄叶柄再生效果比6-BA好,IBA诱导美人指葡萄叶柄不定芽再生率高于NAA和2,4-D;暗培养3周时,美人指葡萄叶柄的再生率最高。叶片再生的最适培养基为:MS+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA,再生率为60.71%,增殖系数为5.65;叶柄再生的最适培养基为:MS+1.0mg/LTDZ+0.1 mg/L IBA,再生率为93.10%,增殖系数为5.91;茎段再生的最适培养基为:MS+1.0 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,再生率为47.37%,增殖系数为5.00。将再生不定芽置于3/4 MS+0.35 mg/L IBA培养基上诱导生根,完整植株培养35~50 d后炼苗移栽,成活率可达90%。     

龙选蕉组培快繁技术

[目的]探讨不同灭菌剂对外植体的灭菌效果及不同激素浓度和组合对不定芽诱导和增殖的影响,建立龙选蕉的高频再生体系.[方法]以龙选蕉吸芽为外植体,以升汞和0.2%次氯酸钠对外植体灭菌;采用0~6.0 mg/L 6-BA、0.1~0.2 mg/L NAA激素组合对不定芽进行诱导或增殖培养.[结果]相对于升汞,次氯酸钠对龙选蕉外植体灭菌的效果更理想,灭菌率达到90.47%,且外植体生长良好,无中毒现象.在不定芽诱导培养基中,随着6-BA浓度的升高,不定芽萌发率呈先增加后降低趋势,其中以添加6-BA3.0mg/L的诱导效果最理想,萌发率为66.67%;随着6-BA和NAA浓度的提高,不定芽的增殖系数也随之增加,其中以4.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA为最佳组合,不定芽增殖效果最理想,增殖系数为4.05,芽苗粗壮,叶片颜色正常.[结论]次氯酸钠对龙选蕉吸芽的消毒效果优于升汞,操作简便,易于获得无菌外植体并利于不定芽生长;不定芽诱导最佳培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA;不定芽增殖最佳培养基为MS+ 4.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA.     

酿酒葡萄“赤霞珠”叶片和叶柄离体再生系统建立的研究

以赤霞珠叶片、叶柄为材料,研究了细胞分裂素(TDZ)、不同基本培养基、叶柄砧有无对其不定芽再生的影响。结果表明:TDZ对赤霞珠离体叶片、叶柄不定芽再生有诱导作用,对叶片、叶柄的最高诱导率分别为18.06%和28.57%;叶片再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L,叶柄再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.01mg/L,叶片不定芽生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+20g/L蔗糖。     

绿萝组织培养和遗传转化条件优化

为优化绿萝离体再生条件，建立更高效的遗传转化体系，分别以绿萝叶片和叶柄为外植体，比较不同植物生长物质对绿萝不定芽诱导和植株离体再生的影响。并通过PCR技术克隆拟南芥AtFALDH基因，利用农杆菌介导法对绿萝愈伤组织进行遗传转化，比较不同转化条件下绿萝愈伤组织抗性不定芽诱导率。结果表明，绿萝叶柄愈伤组织和不定芽诱导效果均优于叶片。绿萝叶片愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D，该培养基下诱导率大约为61.5%；叶柄愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA，该培养基下诱导率达到97.8%。绿萝叶片不定芽诱导最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，该培养基下诱导率接近100%；叶柄不定芽诱导最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA，该培养基下诱导率约为100%，但叶柄来源的愈伤组织诱导产生的不定芽数量较多，而且生长更旺盛。生根最适培养基为1/2 MS+0.05 mg/L NAA，该培养基下生根...     

新疆紫草快繁技术研究

[目的]建立新疆紫草组培快繁技术体系.[方法]以新疆紫草无菌苗的茎尖为外植体,筛选适合茎尖萌发、增殖、生根的激素组合.[结果]茎尖最佳萌发培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L,其萌发率为100;.芽增殖培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L,芽增殖倍数为13.50倍,继代壮苗培养基为MS+NAA 0.3 mg/L +6-BA 0.5 mg/L,生根培养基为MS+NAA 0.1 mg/L,生根率为84;.降低6-BA浓度到0.05 mg/L可大幅降低玻璃化发生率.经过此培养基继代后,再在原生根配方中生根,生根率提高到95.32;.[结论]茎尖是新疆紫草快繁的最佳外植体.     

马槟榔组培快繁技术研究

[目的]探讨不同灭菌剂对外植体的灭菌效果及不同激素组合对马槟榔芽诱导和增殖的影响,建立马槟榔的组培快繁体系.[方法]用马槟榔一年生的幼嫩茎段及幼苗作为外植体,以MS为基本培养基,附加不同的激素组合对外植体进行芽诱导和增殖培养.[结果]相对于10％次氯酸钠,0.1％升汞对马槟榔外植体灭菌效果更理想,灭菌率达到90％,且外植体的生长状况良好.在芽诱导培养中,随着6-BA的增加,马槟榔芽的诱导数呈先增后减的变化趋势;当6-BA为1.0 mg/L时,诱导率最高;当NAA为0.5 mg/L时,诱导率相对较高.在增殖培养中,当6-BA用量大于NAA时,增殖系数较低;当6-BA用量小于NAA时,增殖系数较高,最高可达3.8,且丛芽长势好,芽苗粗壮,叶片颜色正常.[结论]升汞对马槟榔外植体的灭菌效果优于次氯酸钠;芽的最佳诱导培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L,芽增殖最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 1.0 mg/L.     

梨矮化砧优系'青砧D1'叶片离体培养再生体系的建立

"青砧D1"是青岛农业大学选育的一个梨矮化砧优系.本试验研究了不同浓度的TDZ、6-BA、IBA及IAA配比对"青砧D1"叶片离体再生培养的影响,从而为该砧木的快速繁殖和应用推广奠定基础.结果表明:MS培养基中附加适宜浓度和配比的6-BA与IBA能提高初代培养外植体的成活率,以6-BA 1.0 mg·L-1与IBA 0.1 mg·L-1浓度配比的外植体成活率最高,达86.3%.NN69培养基中附加不同浓度的TDZ与IBA或IAA能有效地诱导叶片外植体不定芽再生,以TDZ和IBA配合诱导产生不定芽的外植体比例高,在TDZ 4.0 mg·L-1与IBA 0.3 mg·L-1配比组合下可达到100%,但平均外植体再生芽数为3个,低于TDZ与IAA配比组合(3.9个/外植体).在所试的不同浓度TDZ与IAA配比组合中,外植体不定芽诱导率最高仅为68%.MS培养基中附加6-BA 1.0 mg·L-1和IBA 0.2 mg·L-1时芽增殖系数最高,达4.42.在1/2 MS培养基中附加IBA 0.3 mg·L-1时生根率最高,达87.3%,移栽成活率达95%.     

外植体和培养因子对剑麻不定芽诱导及植株再生的影响

以剑麻H.11648为材料,研究不同外植体、培养基和激素对不定芽诱导及生根的影响。试验结果表明,以珠芽苗茎尖为最佳快繁材料,最佳消毒时间25 min,最适合的基本培养基为SH;最佳分化培养基为SH+NAA0.05 mg/L+6-BA 4 mg/L,芽的分化率达到85%,同时可做增殖培养基,增殖平均倍数为18。分化芽在MS和SH两种培养基中添加NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.1 mg/L中均可生根,生根率为95%。     

半夏再生体系的建立

【目的】优化半夏再生条件,以获得优质半夏种苗.【方法】筛选出适宜的外植体后,使用3种激素2,4-D,KT,IAA利用正交设计法设置9个处理组对半夏愈伤组织进行诱导.选取长势良好,大小均一的半夏愈伤组织接于4种培养基中进行愈伤组织增殖.选取半夏叶柄诱导出的愈伤组织将其接于5种培养基中进行愈伤组织分化,观察不同培养基对半夏愈伤组织生根和出芽的影响,最后进行炼苗与移栽.【结果】在叶柄、叶片及块茎3种外植体中,叶柄是半夏愈伤组织诱导的最佳外植体;最有利于半夏愈伤组织诱导的培养基为MS+0.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT+1.0 mg/L IAA;在暗培养条件下,将半夏愈伤组织继代于MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0 mg/L IAA中生长最快;MS+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA培养基最有利于半夏愈伤组织的生根和出芽.     

铁皮石斛高效再生体系研究与应用

以原球茎为实验材料,对影响铁皮石斛再生体系的主要影响因素进行试验,建立铁皮石斛在生产中的高效再生体系。试验结果表明,在基本培养基MS、Fonnesbech和N6中,最适合的基本培养基为MS;原球茎最佳增殖培养基为MS＋6-BA0．75mg／L＋NAA0．2mg／L＋4．0％白糖,接种35d后原球茎增殖倍数为4．19;最佳分化培养基为Ms＋6-BA0．3mg／L＋3．0％白糖,分化率为74％。分化出的丛芽在生根培养基MS＋AC0．05％＋白糖3．0％中,28d生根率达到87％。     

勋章菊叶片再生技术的探讨（摘要）

[目的]研究勋章菊叶片再生技术,筛选适合勋章菊叶片再生的最佳培养配方。[方法]以日本引进的勋章菊叶片为材料,置床于添加不同种类和浓度激素的MS培养基中进行愈伤组织和不定芽诱导的正交试验,筛选勋章菊叶片再生的最佳培养基配方。[结果]在MS＋TDZ（0.8～1.0mg/L）＋NAA（0.05～1.0mg/L）培养基上可形成紧密型绿色的愈伤组织;叶片接种于MS＋TDZ（0.5～1.0mg/L）＋NAA（0.05～1.0mg/L）培养基上可形成许多不定芽,诱导效率达100%;健壮的不定芽长至2.0～3.0cm长时移至1/2MS＋NAA（0.1mg/L）培养基中,其发根状况良好,生根率达100%。[结论]为勋章菊的高频快繁提供了新途径,并为勋章菊的遗传转化及培育新品种奠定基础。     

‘幻想’矮牵牛遗传转化受体再生体系建立

[目的]建立‘幻想’矮牵牛的高效遗传转化受体再生体系。[方法]以‘幻想’矮牵牛嫩叶片为外植体,对其暗培养时间、出芽和生根培养基的生长素种类及浓度、筛选抗生素和抑菌抗生素进行优化。[结果]诱导叶片分化的最佳暗培养时间为2 d;最佳出芽培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳生根培养基为MS+IBA 0.1 mg/L;适宜出芽和生根阶段的卡那霉素筛选压为15 mg/L;适宜的抑菌抗生素头孢霉素浓度为300 mg/L。[结论]该研究为后期‘幻想’矮牵牛的分子及育种研究奠定了基础。     

芥蓝子叶离体培养再生植株的研究

以芥蓝Brassica alboglabra Bailey品种‘尖叶夏芥兰’带叶柄子叶和不带叶柄子叶切块为外植体，探讨了直接分化形成不定芽以及不定芽生根的适宜培养基组成．结果表明：带叶柄子叶比不带叶柄子叶切块的不定芽分化率高，其中在MS＋0．05mg／L NAA＋2．0mg／L6-BA＋30．00g／L蔗糖＋8．00g／L琼脂（pH5．8）培养基上，带叶柄子叶的不定芽分化率达93．75％；将分化形成的不定芽转接到不添加NAA和添加0．1mg／LNAA的生根培养基中，不定芽生根率分别达到100％和86．11％，其中以后者所形成的根多且较粗壮．     

淡黄花百合丛生小鳞茎的诱导及快速繁殖

分别以淡黄花百合的鳞片、叶片、叶柄为外植体,“一步法”获得丛生小鳞茎及其再生植株,建立了淡黄花百合的快速无性繁殖体系。结果表明:鳞片为最佳外植体,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L为小鳞茎最佳诱导培养基,诱导率最高达到95.0%,平均小鳞茎增殖系数最高可达8.6;叶片、叶柄最佳小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。     

晚香玉组培技术研究

以单瓣、重瓣两个晚香玉品种叶片为材料,选用4种升汞消毒时间、6种愈伤组织诱导培养基、6种分化培养基和9种生根培养基,研究不同基因型和激素组合对再生体系建立的影响。结果表明：（1）叶片的消毒时间为0．1％HgCl2浸泡2min;（2）诱导单瓣叶片愈伤形成的较适培养基为：MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA1．0mg／L：诱导重瓣叶片愈伤形成的较适培养基为：MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．5mg／L．（2）2单瓣叶片分化最佳配方为：MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L;重瓣叶片分化的较适培养基为：MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L,（3）诱导生根的最佳培养基为：1／2MS＋KT0．2mg／L＋NAA0．5mg／L＋6-BA0．2mg／L。     

甘蓝型油菜下胚轴离体培养再生植株研究

[目的]为进一步通过基因转化获得预期优良性状的甘蓝型油菜提供借鉴。[方法]以甘蓝型油菜的下胚轴为外植体,研究不同苗龄、不同基因型、不同预培养条件以及各种生长调节剂组合对油菜外植体高频率再生的影响。[结果]试验中,7 d苗龄的甘蓝型油菜下胚轴再生频率可达35.83%;经3 d预培养处理的油菜下胚轴芽再生频率可提高至57.78%,油菜品种史力丰下胚轴的芽分化率较高,达35.00%,其次是N481-1,而N370-1的芽分化率最低;其最高分化率的激素组合为6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L,达38.89%。史力丰品种6~8 d无菌种子实生苗的下胚轴在预培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L上预培养3 d,在最适分化培养基MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO35.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L中培养,再生频率最高。[结论]建立了甘蓝型油菜下胚轴离体培养高频率再生植株模式。     

玉簪花器官植株再生体系的建立

以2个玉簪品种白玉簪和法兰西的花器官为试材,再生出了不定芽,筛选出了最佳的玉簪芽增殖培养基是MS+6-BA 2.0~3.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,最佳的生根培养基是1/2MS+IBA 0.5 mg/L,建立了玉簪的花器官植株再生体系。不同外植体类型对不定芽再生的影响较大,再生率最高的是花葶,其次是花蕾,最低的是花。花叶品种法兰西的花器官在不定芽再生过程中产生了一定数量的黄化苗和白化苗。