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细胞凋亡是生物有机体在进化过程中形成的一种主动性细胞死亡方式,它受细胞外微环境和细胞内遗传物质的调控.透射电镜下观察发现,维生素E缺乏雏鸡免疫细胞具有典型的凋亡特征[1],但其凋亡机制尚不清楚.p53是一种促凋亡基因,bcl-2是一种抗凋亡基因,二者在细胞凋亡过程中具有重要的调控作用.维生素E缺乏对雏鸡脾脏淋巴细胞凋亡基因p53和bcl-2mRNA表达的影响未见有文献报道.本研究通过建立维生素E缺乏雏鸡模型,采用半定量RT-PCR法检测脾脏淋巴细胞内p53和bcl-2mRNA表达水平,旨在揭示维生素E缺乏雏鸡淋巴细胞凋亡的基因调控机制. 相似文献
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旨在探究死亡受体Fas在镉致大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡中的作用及其对线粒体通路的调控机制,用10 μmol·L-1镉处理Fas基因沉默的PC12细胞株12 h,通过Western blot检测BH3相互作用域死亡激动剂(BID)、半胱氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)的活化情况,Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、凋亡诱导因子(AIF)、核酸内切酶G(Endo G)的表达情况,以及细胞色素C(Cyt C)在细胞内的分布情况,免疫荧光染色检测AIF核转位。结果显示,镉极显著上调tBID/BID比值和Bax/Bcl-2比值,诱导Cyt C从线粒体释放到细胞质,激活caspase-9、caspase-3和PARP,增加AIF和Endo G蛋白表达水平(P<0.01),并诱导AIF核转位;沉默Fas极显著抑制镉引起的tBID/BID比值和Bax/Bcl-2比值升高,Cyt C从线粒体释放到胞浆,caspase-3、PARP蛋白活化和AIF、Endo G蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),显著抑制镉激活的caspase-9(P<0.05),并抑制AIF核转位。综上表明,Fas通过调控线粒体通路参与镉致PC12细胞凋亡。 相似文献
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为探讨圆弧青霉菌毒素—青霉酸对小鼠脾脏组织的毒性作用,采用TUNEL法和RT-PCR对染毒后脾脏细胞凋亡和Bcl-2、Bax及Fas/FasL等凋亡相关基因mRNA表达的影响进行研究。结果表明,随着青霉酸染毒剂量的增加,脾脏组织中细胞凋亡数量逐渐增多。染青霉酸低剂量组脾脏组织中Bcl-2、Fas和FasL的表达增加,Bax表达下降,高剂量组和中剂量组中Bax、Fas和FasL表达增加,Bcl-2表达下降,说明青霉酸可能通过促使Bax、Fas/FasL表达增加和Bcl-2表达降低来诱导小鼠脾脏细胞的凋亡。 相似文献
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细胞凋亡是一种由基因控制的细胞自杀性死亡过程,是机体维持自身稳定的一种基本生理机制。机体通过细胞凋亡清除损伤、衰老与突变的细胞,维持生理平衡。通过对细胞凋亡的研究发现,线粒体在调节细胞凋亡中发挥着关键作用。尤其是被称为细胞凋亡主开关的线粒体通透性改变孔(Mitochondrion Permeability transition Pore,HPTP),它是细胞色素C、Smac、AIF等凋亡诱导因子的主要来源。本文以HPTP的开放、细胞色素C、AIF在细胞凋亡中的作用以及Bcl-2家族对细胞凋亡的调控做一综述,以便广大读者能系统地了解线粒体在细胞凋亡中的作用。 相似文献
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将40只未成年雌性昆明系小鼠随机分成3个处理组和1个对照组,每组10只。处理组小鼠分别连续2 d腹腔注射铅10、20、40 mg/kg(按体质量给药),对照组小鼠注射等体积的生理盐水。于注射后24、72 h分离卵巢,用原位末端标记法(TUNEL)测定卵巢颗粒细胞的凋亡率,同时用半定量RT-PCR方法检测凋亡基因p53、Bax、Bcl-2mRNA表达。结果表明,铅可促进颗粒细胞凋亡,且随剂量的增加和作用时间的延长,颗粒细胞中p53、Bax基因表达量逐渐增加,与对照组相比差异显著或极显著(P〈0.05或P〈0.01);而Bcl-2基因表达量则逐渐减少(P〈0.05或P〈0.01);表明铅可通过上调促细胞凋亡基因p53、Bax基因表达量,下调Bcl-2基因表达量,诱导卵巢颗粒细胞的凋亡。 相似文献
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《广东饲料》2017,(2)
黄曲霉毒素B_1是恒温动物中潜在的免疫抑制剂,它与免疫器官凋亡的上调有关。本研究中,我们研究了线粒体、死亡受体和内质网通路在黄曲霉毒素B_1诱导的胸腺细胞凋亡的作用。给试鸡饲喂含有黄曲霉毒素B_1的饲粮(0.6 mg/kg)3周。研究结果表明,(1)含黄曲霉毒素B_1饲粮能诱导肉仔鸡T细胞亚群减少,形态变化以及胸腺的凋亡。(2)极度的凋亡涉及了线粒体途径,上调了促凋亡蛋白Bax/Bak、细胞色素C的基因表达,下调了抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-2相关X蛋白Bcl-xL的基因表达;还涉及了死亡受体途径,上调了死亡受体Fas、Fas的配体FasL和死亡结构域结合蛋白FADD的基因表达。(3)在胸腺中也确认了氧化应激是凋亡的诱导剂。结论,本文首次证明线粒体和死亡受体途径参与了黄曲霉毒素B_1诱导肉仔鸡胸腺细胞的凋亡。 相似文献
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鸡Bcl—2基因的克隆及其对卵泡闰细胞凋亡的影响 总被引:5,自引:1,他引:4
将鸡的Bcl-2基因克隆到真核表达载体JLV,构建了重组质粒JLVB。0.2μg/孔JLVB重组质粒经脂质体介导转染卵泡颗粒细胞,应用流式细胞术等方法分析了转染Bcl-2基因后原代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。与对照组相比,转染后的传代细胞分裂速度较快(P<0.01),凋亡比率较低,G2/M+S期细胞比例极显著高于对照组(P<0.01)。这些结果表明,Bcl-2基因具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用,这种作用是直接的。在转染时间为12h、DNA量为0.3μg/孔的条件下,较好的脂质体介导用量的1.2μL/孔。 相似文献
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昆虫抗真菌肽Thanatin-CAD双价基因的合成、克隆及其表达 总被引:7,自引:3,他引:4
为促进昆虫抗菌肽基因在转基因抗病育种和生物工程制药的应用,通过设计嵌合引物结合分段PCR的方法将抗真菌肽Thanatin基因与Cecropin AD基因(CAD基因)融合拼接为Thanatin-CAD双价基因,采用T-A克隆法将其克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序,结果证实与预期设计的完全一致;然后再将其亚克隆至表达载体pET-21d中,用IPTG诱导含重组表达质粒的菌株,对表达产物进行生物活性测定,初步结果显示Thanatin-CAD双价基因的融合表达产物对受试细菌无抑菌活性,但对部分病原真菌有较强的抑菌作用。 相似文献
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基于连接酶检测反应的并行分型系统检测鸡肉风味相关候选基因多态性 总被引:1,自引:1,他引:0
旨在建立一个基于聚合酶链反应—连接酶检测反应(LDR)的基因多态性并行检测系统,检测鸡肉风味相关候选基因脂肪型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)基因、细胞外脂肪酸结合蛋白(Ex-FABP)基因和腺苷琥珀酸裂解酶(ADSL)基因的多态性,并分析其在优良地方鸡种——清远麻鸡和快大型隐性白羽鸡中的分布差异。采集165只隐性白羽鸡和185只清远麻鸡母鸡的血液并提取DNA,应用PCR-LDR方法检测A-FABP51C/T、Ex-FABP1011T/C和ADSL3484C/T的基因型。结果,所得分型结果同直接测序分型结果一致。3个多态位点在2个品种鸡中均表现为中度多态,并且在不同品种中的分布均存在差异,在A-FABP51C/T位点上达到显著水平。结果表明,建立的基于连接酶检测反应的基因多态性并行检测系统是一种准确、灵敏的SNP检测方案,为鸡肉风味性状相关基因的多态性研究提供了基础。 相似文献
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摘要:ESR、FSHβ和EGF基因与猪繁殖性状密切相关。为检测军牧1号白猪、西藏小型猪、杜洛克猪和失白猪ESR、FSHβ和EGF基因的多态性分布情况,采用PCR和PCRRFLP的方法对61头军牧1号白猪,51头杜洛克猪,51头西藏小型猪和69头大白猪的ESR、FSHβ和EGF基因多态性进行了检测。结果显示,对于各个基因的优势等位基因,在军牧1号白猪群体中,ESR基因位点A等位基因频率为0.6393,FsHp基因的13等位基因频率高达0.9098,EGF基因的A等位基因频率仅有0.0164杜洛克猪群体中,ESR基因A等位基因频率为0.6078,FSHβ基因的B等位基因频率为0.8235,而EGF基因的八等位基因频率仅为0.0297;西藏小型猪群体中,ESR基因A等位基因频率是0.4608,FSHβ基因B等位基因频率仅为0.0687,H;F基因A等位基因频率为o.1961;大白猪群体中。ESR基因位点有频率为0.5000的有害A等位基因,而FSHβ基因和EGF基因的13等位基因频率则分别为0.8013和0.7391。所有基因型分布均符合哈代温伯格平衡(P〉0.05)。 相似文献
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犬瘟热病毒小熊猫株H、F和N基因的克隆及表达 总被引:4,自引:0,他引:4
根据GenBank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的核苷酸序列,设计并合成了扩增CDVH、F和N基因的3对引物,经RT—PCR分别扩增获得了CDV小熊猫株(LP株)H、F和N基因,并对H、F及N基因进行了克隆和序列测定。序列分析表明,CDV LP株属于强毒谱系,与CDV流行株的亲缘关系近.H基因含有较多潜在的糖基化位点.F和N基因相对比较保守。将CDV LP株H、F和N基因克隆入真核表达栽体pVAX1的CMV启动子下游,构建了CDV基因疫苗表达载体pVAXLPH、pVAXLPF、pVAXLPN,体外转染BHK-21细胞.用间接ELISA方法检测到目的蛋白的表达。用构建的3个表达质粒免疫小鼠,从小鼠血清中检测到了抗CDV抗体.初步证实用CDVH、F和N基因作为核酸疫苗免疫动物,可以激活机体的免疫应答。 相似文献
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不同猪种肉质相关基因Hal、RN和FTO的多态性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了明确肉质相关基因氟烷基因(Hal)、酸肉基因(RN)和脂肪肥胖相关基因(FTO)在国内外不同猪种群体间的遗传变异特性,本研究以大约克、长白、杜洛克和金华猪等猪种群体为研究对象,应用PCR-RFLP技术分别检测了Hal、RN和FTO基因的多态性,并分析了FTO基因上2个多态位点g.276G>T和c.594C>G的遗传变异情况.结果表明:(1)在杜洛克猪中发现了Hal的基因型HalN Haln,其频率为0.166,但未发现基因型Haln Haln,其它猪种群体中仅检测到了基因型HalN HalN;(2)在已检测的所有猪种群体中只检测到RN基因的rn/rn基因型,未发现rn/RN和RN/RN基因型;(3)在FTO的g.276G>T位点上,金华猪呈现单态,其它猪种群体均呈现多态.在FTO的c.594C>G位点上,4个猪种群体均呈现多态,3个外来猪种群体均以CC基因型频率较高,而金华猪则以GG基因型频率较高.研究结果提示,由于Hal基因在养猪生产中的利弊双重性,因此在某些猪种群体中仍然存在较高频率的HalN Haln基因型.此外,结合FTO基因的生理功能和已有的研究结果,可在特定的猪群中将其作为影响猪肉质性状的候选基因.本研究发现FTO的基因型分布在我国优良地方猪种金华猪与国外3个种猪群间存在较大差异,为深入研究不同品种猪的肉质形成机理提供了基础数据. 相似文献