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为了探索鸡白介素-2(IL-2)对鸡新城疫病毒(NDV)F蛋白免疫效果的增强作用,本研究通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)利用连接子(G2SG3S)将鸡IL-2基因和鸡NDV F基因串连,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建了表达质粒pcDNA-IL-2-F.通过脂质体介导DNA瞬时转染法,将重组质粒pcDNA-IL-2-F和pcDNA-F分别转染鸡胚成纤维细胞,Western blot验证表明,pcDNA-IL-2-F和pcDNA-F均能瞬时表达F蛋白,表达蛋白分别为76.0和59.6 kD,表达蛋白的大小与预期一致并具有抗原性.将表达质粒免疫SPF鸡(Gallus domedticus),6d后开始用ELISA方法检测NDV的特异抗体,免疫20 d后,用F48E9进行攻毒.结果显示,免疫pcDNA-IL-2-F的鸡群产生的抗体水平(P<0.05)高于混合免疫pcDNA-IL-2和pcDNA-F,高于免疫pcDNA-F的鸡群,但比免疫Lasota组的抗体水平要低.攻毒试验说明免疫pcDNA-IL-2-F组比免疫其他质粒组保护率高,这说明串连表达的免疫效果要好于二者的联合使用,为病毒病疫苗的研制提供了思路. 相似文献
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根据新城疫病毒(NDV)融合蛋白和禽流感病毒(AIV)核蛋白的核酸序列设计2对引物,对NDV和AIV的特异扩增片段分别为156bp和219bp,建立了同时检测强毒力NDV和AIV核酸的一步法复合RT—PCR。试验中未能检出弱毒力NDV,IBV,IBDV,REV,REOV及SPF鸡肌肉组织的RNA,从不同年代分离的16个NDV强毒株全为阳性而NDV弱毒株全为阴性。经验证,复合引物与单一引物的扩增效率一致,能够检出NDV和H;亚型AIV的最低病毒量分别为10^3.7EID。和10^3.9EID50。试验结果表明,此次建立的一步法复合RT—PCR特异、敏感,适用于强毒力NDV和AIV.感染的快速鉴别。 相似文献
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ATP荧光检测仪是近年来的新生产物,可以通过荧光值快速反映出细菌菌落数。本研究以金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)为试材,培养24 h后,各自稀释11个梯度(10倍稀释),并进行细菌计数;同时采用ATP荧光仪对每一个稀释梯度进行荧光检测。以lg(菌落数)为横坐标(x),以ATP荧光值(y)为纵坐标,分别进行线性、对数、乘幂、指数拟合,发现二者之间关系符合指数曲线,相关系数均接近0.9或以上。以屠宰场的要求"1 000荧光值为合格,2 000荧光值为不合格"为实例进行使用指导:当实际lg(菌落数)10.04时,得出不合格的结论;当实际lg(菌落数)8.27时,得出合格的结论;但如果8.27实际lg(菌落数)10.04时,则容易出现误判。结论认为ATP荧光检测可以在一定程度上代替细菌常规检测,并应用于实际生产。 相似文献
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鸡败血霉形体病是由败血霉形体引起的主要侵害鸡呼吸道的疾病,该病不仅可以经卵垂直传染,并且能引起饲料转化率降低。目前我国还没有有效的疫苗采用,防冶该病主要依靠抗菌素,为了探讨不同药物对该病的治疗效果,我们用不同的抗菌素对败血霉形体阳性鸡进行了治疗试验和净化方面的研究。 相似文献
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鸡产蛋下降综合症(简称EDS—76)是一种由腺病毒引起的以产蛋下降及卵壳形成不全为特征的传染病,该病自1976年以来,已在许多国家和地区流行,给养鸡业造成了很大的损失。在我国,某些鸡场已发生过此病,自今年7月份以来,我省的某些地区的养鸡场和养鸡专业户相继出现了以不明原因的产蛋下降为特征的疾病,经过对流行病学的调查及血清学试验,确诊为鸡产蛋下降综合症,现介绍如下。一、发病及流行情况: 自7月份以来,我省的章丘、邹平、平原、济南、淄博等地的养鸡场或养鸡户 相似文献