细菌ATP荧光检测与常规计数相关性研究

ATP荧光检测仪是近年来的新生产物,可以通过荧光值快速反映出细菌菌落数。本研究以金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)为试材,培养24 h后,各自稀释11个梯度(10倍稀释),并进行细菌计数;同时采用ATP荧光仪对每一个稀释梯度进行荧光检测。以lg(菌落数)为横坐标(x),以ATP荧光值(y)为纵坐标,分别进行线性、对数、乘幂、指数拟合,发现二者之间关系符合指数曲线,相关系数均接近0.9或以上。以屠宰场的要求"1 000荧光值为合格,2 000荧光值为不合格"为实例进行使用指导:当实际lg(菌落数)10.04时,得出不合格的结论;当实际lg(菌落数)8.27时,得出合格的结论;但如果8.27实际lg(菌落数)10.04时,则容易出现误判。结论认为ATP荧光检测可以在一定程度上代替细菌常规检测,并应用于实际生产。     

正交试验法筛选环糊精包合碘制备工艺研究

选定搅拌速度(A)、高温搅拌时间(B)、搅拌总时间(C)、混合时β-环糊精温度(D)4个因素,综合评价产品碘含量和合格产品碘收率,对环糊精包合碘生产工艺进行4因素3水平筛选。结果表明,最优水平分别为A1B2C1D2,即搅拌速度为300 r·min-1、高温搅拌时间60 min、搅拌总时间8 h、混合时环糊精温度80℃时可以得到最优产品综合加权指数,此时产品有效碘(I)含量为17.71%,合格产品碘收率为87.16%。极差分析法表明各因素重要程度排序为混合时环糊精温度>搅拌总时间>搅拌速度>高温搅拌时间;方差分析法表明混合时环糊精温度与搅拌速度可以显著影响产品综合指数(P<0.05),作为工艺筛选评价方法较极差分析法更为客观。     

表达hTERT及SV40T永生化奶牛乳腺上皮细胞系的建立

构建pcDNA3.1-hTERT、pcDNA3.1-SV40 T载体,线性化后,共转染荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞,研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)和猿猴病毒40大T抗原(SV40 T)对荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞体外培养的作用,并对细胞进行RT-PCR检测分析及免疫荧光鉴定。结果表明,hTERT和SV40 T在奶牛乳腺上皮细胞中表达可以有效地延长细胞的体外培养时间,增加细胞传代次数,获得的细胞系可以正常表达角蛋白。说明在体外培养的乳腺细胞中共表达hTERT和SV40 T可以有效延长细胞寿命且不影响乳腺细胞特性。     

山东地区牛传染性鼻气管炎病毒的分离鉴定

从山东某地区发生呼吸道症状的奶牛场中采集样品,按常规方法处理后,接种牛肾细胞(MD-BK),分离病毒,盲传3代后,接种病料的MDBK细胞出现细胞圆缩、聚集成葡萄串样群落、在单层细胞上形成空洞等病变,且随着传代次数的增加,细胞病变更加规律。对所分离病毒进行TCID50测定,其TCID50值为108/ml;用IBRV特异性引物对分离病毒进行PCR扩增,获得与设计基因片段大小一致的特异性条带,序列测定分析结果确认所分离病毒为牛传染性鼻气管炎病毒。     

银连解毒口服液提取工艺研究

为了确定银连解毒口服液的最佳提取工艺,采用共水蒸馏法对处方中薄荷、荆芥挥发油的提取工艺进行了考察;以吸水率为指标,对药材浸泡时间进行了筛选;采用正交试验法,以干膏量、绿原酸含量、牛蒡苷含量为指标,对煎煮过程中加水量、煎煮时间、煎煮次数三个重要参数进行了筛选。结果:薄荷、荆芥加8倍量水,浸泡0. 5 h,共水蒸馏1 h,挥发油提取效率最佳;加水浸泡2 h后药材完全浸透,吸水率为220%;最佳煎煮工艺为加10倍量水,煎煮3次,每次煎煮1. 5 h。本研究为制定银连解毒口服液的生产工艺规程提供了依据。     

山东省部分地区鸡源大肠杆菌耐药性监测分析

采用药敏纸片扩散法,检测了2008～2012年于山东省不同地区鸡场临床分离鉴定的96株大肠杆菌对23种抗生素的耐药性.结果表明:96株大肠杆菌均出现不同程度的耐药性,其中对哌拉西林、利福平的耐药率最高(均在90％以上),其次对头孢拉定、头孢唑啉和四环素的耐药率也较高(均在84％以上),同时这些菌株对头孢吡肟、头孢他啶、阿米卡星的敏感率较高,其中对头孢西丁的敏感率最高(78.125％).通过所得的药敏试验结果可以在一定程度上指导临床用药.分析不同年份、不同地区菌株的耐药情况,有助于对大肠杆菌耐药性趋势进行预测.     

清营口服液质量检测方法的研究

为了建立清营口服液的质量检测方法,对制剂处方药味金银花、连翘、黄连、丹参、玄参、麦冬进行了薄层色谱(TLC)鉴别研究,并利用高效液相色谱(HPLC)法对制剂中绿原酸的含量进行了测定确定了HPLC的测定条件。结果表明,TLC鉴别方法专属性强、斑点清晰、阴性对照无干扰;在8~160 μg/mL范围内绿原酸浓度与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为97.86%,RSD为1.2%。以上结果表明,本研究所建立的检测方法简便、准确、专属性强、重复性好,可对清营口服液的质量进行有效检测。     

鸭疫里默氏杆菌向大肠杆菌传递抗药性的研究

为了解细菌抗药性的种间传递,本试验将抗药的鸭疫里默氏杆菌RA P3菌株和不抗药的大肠杆菌标准株8099混合传代培养,筛选传代培养后出现的大肠杆菌抗药菌株,之后对获得的抗药大肠杆菌菌株K-8099和大肠杆菌标准株8099及鸭疫里默氏杆菌RA P3菌株进行药敏试验和抗药基因检测。结果表明鸭疫里默氏杆菌RA P3的抗药基因传递给了不抗药的大肠杆菌标准株8099,且大肠杆菌抗药株K-8099的抗药水平显著提高。说明在混合感染过程中,鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌的的抗药性确实可以发生种间传递。