| 鸡新城疫病毒F基因与鸡白介素-2(IL-2)基因在真核载体中串连表达及免疫原性 |
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| 引用本文： | 亓丽红,朱剑英,艾武,黄兵,于可响,刘涛,秦卓明,宋敏训.鸡新城疫病毒F基因与鸡白介素-2(IL-2)基因在真核载体中串连表达及免疫原性[J].农业生物技术学报,2012,20(11). |
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| 作者姓名： | 亓丽红 朱剑英 艾武 黄兵 于可响 刘涛 秦卓明 宋敏训 |
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| 作者单位： | 1. 山东省农业科学院家禽研究所,山东省禽病诊断与免疫重点实验室,济南250023
2. 济南市畜产品质量安全监测中心,济南,250000 |
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| 基金项目： | 山东省科技发展计划项目 |
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| 摘 要： | 为了探索鸡白介素-2(IL-2)对鸡新城疫病毒(NDV)F蛋白免疫效果的增强作用,本研究通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)利用连接子(G2SG3S)将鸡IL-2基因和鸡NDV F基因串连,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建了表达质粒pcDNA-IL-2-F.通过脂质体介导DNA瞬时转染法,将重组质粒pcDNA-IL-2-F和pcDNA-F分别转染鸡胚成纤维细胞,Western blot验证表明,pcDNA-IL-2-F和pcDNA-F均能瞬时表达F蛋白,表达蛋白分别为76.0和59.6 kD,表达蛋白的大小与预期一致并具有抗原性.将表达质粒免疫SPF鸡(Gallus domedticus),6d后开始用ELISA方法检测NDV的特异抗体,免疫20 d后,用F48E9进行攻毒.结果显示,免疫pcDNA-IL-2-F的鸡群产生的抗体水平(P＜0.05)高于混合免疫pcDNA-IL-2和pcDNA-F,高于免疫pcDNA-F的鸡群,但比免疫Lasota组的抗体水平要低.攻毒试验说明免疫pcDNA-IL-2-F组比免疫其他质粒组保护率高,这说明串连表达的免疫效果要好于二者的联合使用,为病毒病疫苗的研制提供了思路.
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| 关 键 词： | 新城疫病毒(NDV) F基因 鸡白介素(IL-2) 串连真核表达 增强免疫效果 |
Tandem-expressing of Newcastle disease virus F and Chicken Interleukin-2(IL-2)Genes in Eukaryotic Expression Vector and Their Immunogenicity |
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| QI Li-Hong
,
ZHU Jian-Ying
,
AI Wu
,
HUANG Bing
,
Yu Ke-xiang
,
LIU Tao
,
QIN Zhuo-Ming
,
SONG Min-Xun.Tandem-expressing of Newcastle disease virus F and Chicken Interleukin-2(IL-2)Genes in Eukaryotic Expression Vector and Their Immunogenicity[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2012,20(11). |
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| Authors: | QI Li-Hong ZHU Jian-Ying AI Wu HUANG Bing Yu Ke-xiang LIU Tao QIN Zhuo-Ming SONG Min-Xun |
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