甘氨酰谷氨酰胺对鸡生长、内源激素及相关基因表达的影响

9日龄优质粤黄鸡360只，随机分为4组，每组90只，通过饮水添加不同剂量的甘氨酰谷氨酰胺（Glycyl—Glu—tamine，Gly—Gln，剂量分别为0％、0．01％、0．05％和0．1％），观察Gly—Gln对粤黄鸡生长性能、内源激素和肝脏GHRmRNA、肌肉IGF—IR mRNA的影响。结果显示：一定剂量的Gly—Gln显著提高了试验组鸡的平均体重、胸肌率和腿肌率，显著降低了腹脂率；添加Gly—Gln的各试验组鸡血清中IGF-1、TSH、T3、T4水平均明显升高，而血清胰岛素水平降低；添加Gly—Gln的各试验组鸡肝脏GHRmRNA表达量略高于对照组，但差异不显著，而肌肉IGF—IRmRNA表达量低于对照组，其中0．01％和0．1％Gly—Gin组差异显著。以上结果提示，Gly—Gin可通过提高鸡血液IGF一1、TSH、T3、T4水平，降低血液胰岛素浓度而发挥其促生长和改善胴体品质的作用。     

生物素对肉仔鸡脾脏细胞PCNA基因的mRNA表达的影响

采用分子生物学方法研究了生物素对脾脏细胞增殖细胞核抗原（PCNA）基因的mRNA表达的影响。将60只1日龄AA雄性肉仔鸡随机分成3个处理，每个处理20只鸡，基础日粮为小麦-酪蛋白-鱼粉型日粮，在基础日粮中分别添加0．30mg／kg和2．7mg／kg2个水平的生物素，包括对照组共计3种日粮处理，为了刺激PCNA基因表达产物mRNA的表达，在48日龄采用皮下注射方式定量接种禽流感疫苗。结果表明：添加生物素显著提高了脾脏细胞PCNA基因表达产物mRNA的表达量（P〈0．01），其中2．7mg／kg处理组极显著高于对照组和0．3mg／kg处理组（P〈O．01），0．3mg／kg处理组和对照组之间无显著性差异（P〉0．05），由此推断，生物素通过促进脾脏细胞PCNA基因的mRNA表达，进而促进脾脏细胞的增殖。     

籽鹅生长期部分血液激素含量及IGF-I mRNA表达量的研究

试验选择健康1日龄籽鹅100只，相同条件下饲养到12周龄。分析血清中IGF—I、T3和T4变化规律。同时，利用RT—PCR技术研究IGF-I mRNA在不同组织中的表达量变化。结果表明：血清IGF—I水平在出生后30d内都较高，30日龄与其他日龄相比差异均显著（P〈0．05）；T3水平在出生时最高，60日龄时低于其他各日龄（P〈0．05）；T4水平出生时显著低于其他各日龄（P〈0．05）；肝脏中IGF—I mRNA在30日龄表达量极显著高于其他各日龄（P〈0．05）；30日龄各组织中IGF-I mRNA以肝脏和生殖器官表达量最高。     

大鼠丘脑氨基酸类神经递质与塞拉嗪麻醉相关性

将32只Wistar大鼠随机分成4组,分别为对照组、麻醉组、恢复I组、恢复Ⅱ组。采用反向高效液相色谱法测定丘脑Glu、Asp、GABA和Gly的含量。结果显示,腹腔注射塞拉嗪40mg／kg后,麻醉组大鼠丘脑内GABA和Gly含量与对照组比较显著升高（P〈0．01）,Glu和Asp含量显著降低（P〈0．05或P〈0．01）;恢复I组丘脑Glu和Asp的含量与对照组比较差异显著（P〈0．05）;恢复Ⅱ组丘脑内GABA和Gly的含量与对照组比较差异显著（P〈0．05）,Glu和Asp的含量恢复显著（P〉0．05）。结果表明,塞拉嗪作用下引起丘脑内GABA、Gly、Glu和Asp含量的变化可能与塞拉嗪引起麻醉作用机制相关。     

硒不同添加水平对高峰期罗曼蛋鸡蛋品质及其在体内代谢的影响

为研究不同硒的添加水平对高峰期新罗曼蛋鸡蛋品质及其在体内代谢的影响。将360只90日龄新罗曼蛋用育成鸡随机分为三组，每组6个重复，每个重复20只。在硒含量为003mg／kg基础日粮中添加0．15、0．30和0．45mg／kg亚硒酸钠，进行60d的饲养试验，结果表明：（1）不同硒添加水平对蛋品质产生显著影响，添加0．45mg／kg亚硒酸钠可显著提高蛋壳强度和蛋形指数（P〈0．05），添加0．30mg／kg和0．45mg／kg可显著提高蛋白高度（P〈0．05），添加0．30mg／kg可提高蛋重（P〈o．05）。（2）不同硒添加水平对产蛋鸡硒的表观利用率无显著影响（P〉0．05）。（3）心脏、肝脏、大腿肌肉和羽毛中硒含量随添加量的提高而极显著的增加（P〈0．01），全血中硒含量无显著变化（P〉0．05）。     

生物素对肉仔鸡免疫器官的发育、机体免疫功能和神经内分泌激素的影响

将400只1日龄AA肉仔鸡随机分成4个处理，每个处理5个重复，每个重复20只鸡（公母各半）；基础日粮为小麦-酪蛋白型日粮，在基础日粮中分别添加0．30、0．90和2．7mg／kg3个水平的生物素，包括对照组共4种日粮处理。试验结果表明：（1）添加生物素可促进免疫器官的发育，提高其质量指数；提高了血清中新城疫抗体滴度和IgG水平，0．9mg／kg和2．7mg／kg处理组的新城疫抗体滴度显著高于对照组和0．3mg／kg处理组（P＜0．05），2．7mg／kg处理组的IgG水平显著高于对照组（P＜0．05）；（2）添加生物素显著提高了血液中B淋巴细胞的转化效率（P＜0．05）和脾脏中T淋巴细胞（P＜0．05）和B淋巴细胞的转化效率（P＜0．05）；显著降低了血液中表达CD3^＋的细胞含量（P＜0．05），其中2．7mg／kg处理组极显著低于对照组和0．3mg／kg处理组（P＜0．05）；显著降低了脾脏中表达CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋的细胞含量（P＜0．05），其中2．7mg／kg处理组显著低于对照组和0．3mg／kg处理组（P＜0．05）；（3）添加生物素后，血清甲状腺素T4、三碘甲状原氨酸T3、生长激素和皮质醇水平呈上升趋势（P＞0．05）。     

日粮添加亚油酸对断奶至2月龄肉兔生长性能、免疫指标及脂质代谢的影响

选用断奶伊拉肉兔200只,随机分成5组,每组40个重复,每个重复1只肉兔,分别饲喂添加0、0．3％、0．6％、0．9％和1．2％亚油酸（LA）的日粮。结果表明,在初始体质量无显著差异的情况下,日粮添加LA对平均日采食量、平均日增重和料重比影响不显著（P=0．9158,0．5747,0．9252）,对血清甘油三酯、高密度脂蛋白和极低密度脂蛋白影响不显著（P=0．5998,0．5717,0．6603）,对血清总胆固醇影响显著（P=0．0258）,0．9％和1．2％添加组显著低于0和0．6％添加组（P〈0．05）,对血清低密度脂蛋白影响极显著（P=0．0006）,0．9％和1．2％添加组显著低于0和0．6％添加组（P〈0．05）;免疫器官肝、脾指数和血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM受日粮LA水平影响不显著（P〉0．05）;日粮LA水平对肝脏乙酰辅酶A羧化酶（ACC）mRNA表达量影响不显著（P=0．7433）,对肉碱脂酰转移酶1（CPT1）mRNA表达量影响极显著（P=0．0034）,其中0．9％和1．2％添加组极显著高于对照组（P〈0．01）。日粮添加I。A对断奶至2月龄肉兔生产性能及免疫指标无显著影响,主要影响机体的脂质代谢。     

丝兰皂甙对绵羊瘤胃发酵及血液生化指标的影响

选用12只装有永久性瘤胃瘘管的成年雄性东北细毛羊，采用随机区组试验设计，分别饲喂0、100、200、300mg／kg水平丝兰皂甙，研究其对瘤胃发酵及血液生化指标的影响。对试羊采食后的0、2、4、6、8h瘤胃内环境指标进行测定，各组在同一时间点pH无显著差异（P〉0．05），但总体上随着丝兰皂甙添加水平的上升，pH随时间变化有变缓趋势；300mg／kg组较对照组4h和6h乙酸浓度下降15．1％和19．8％，丙酸浓度则提高22．7％和22．9％，差异显著（P〈0．05），各组总挥发性脂肪酸浓度差异不显著（P〉0．05）；100、200、300mg／kg组对氨的抑制率分别为17．17％、29．84％和27．12％，200mg／kg组较对照组差异显著（P〈0．05）；28d后，测定试羊血液生化指标，各组均处正常生理范围内且差异不显著（P〉0．05）。     

p38介导β-羟丁酸对原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响

本试验旨在探讨β-羟丁酸（BHBA）对体外原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响以及p38MAPK在其中的调控作用。选择培养72h的肝细胞,添加不同浓度的BHBA（0、0．6、1．2、2．4mmol／L）,培养9h,每个浓度3个重复。另外选取细胞,p38MAPK抑制剂SB203580（10pmol／L）预处理1h后,添加BHBA,使其终浓度为2．4retool／L;PI／An—nexinV—FITC双染,运用荧光显微镜观察肝细胞凋亡情况;ELISA法检测p38的活性;实时荧光定量PCR方法检测p38、Caspase-3、Caspase9、bcl2基因的mRNA表达水平。结果表明,与对照组相比,1．2和2．4mmol／I—BHBA组的肝细胞凋亡明显增加;p38酶活性明显升高;p38、caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平均显著增加（P〈0．01）。bcl2基因mRNA表达水平显著降低（P〈0．05）;添加p38抑制剂后,caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平显著降低（P〈0．01）,bcl-2基因mRNA表达水平显著增加（P〈O．05）。高浓度的BHBA可以诱导体外原代培养犊牛肝细胞凋亡,p38在BHBA诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。     

矢车菊素上调CYP7A1表达促进脂肪变性L02细胞内胆固醇降解

为了研究矢车菊素对肝细胞胆固醇代谢的影响,以人肝细胞系L02为研究对象,采用软脂酸建立肝细胞脂肪变性模型并通过不同浓度矢车菊素处理,采用ELISA检测细胞内胆固醇及胆汁酸浓度,RT—PCR和Westernblot检测胆固醇降解限速酶CYP7A11i3．RNA及蛋白表达水平。结果显示：与空白组相比,10g／L和30g／L软脂酸组L02细胞内胆固醇水平随软脂酸浓度增加而升高（P〈0．05）,而胆汁酸水平没有明显变化,此过程伴随cYP7A1蛋白表达上调（P〈0．05）。舍有30g／L软脂酸的模型细胞组内添加5mg／L以上矢车菊素可显著降低细胞内胆固醇水平并同时增加胆汁酸浓度（P〈0．05）,此过程伴随CYP7A1mRNA及蛋白的显著上调（P〈0．05）;当矢车菊素添加剂量为20mg／L时,与模型组相比CYP7A1蛋白极显著上调（P〈0．01）。结果提示,矢车菊素能够通过促进L02细胞CYP7A1蛋白表达,实现促进脂肪变性肝细胞胆固醇代谢的调节作用。     

重组脂联素对皖南花猪脂肪细胞脂联素及其受体mRNA表达的影响

脂联素（Adp）是主要由脂肪组织分泌的细胞因子,有重要的生理作用。本试验旨在研究重组脂联素（rAdp）对皖南花猪脂肪细胞脂联素及其受体2,AMP激活蛋白激酶（AMPK）、过氧化物增殖剂活化受体α（PPARα）mR-NA表达的影响。选择10d皖南花猪皮下脂肪组织分离前体脂肪细胞,增殖培养至80%融合后换分化培养基培养,细胞分化后用0、2和10mg/L rAdp分别处理12和48h。油红O染色法鉴定脂肪细胞,MTT方法检测细胞活力;酶法测定培养液中甘油释放量,荧光定量RT-PCR方法检测脂肪细胞脂联素（Adp）、脂联素受体1（AdpR1）、脂联素受体2（AdpR2）、PPARα和AMPK mRNA表达。结果显示,rAdp处理后,脂肪细胞活力总体有降低趋势,10mg/L处理48h达到显著水平（P〈0.05）;rAdp处理对甘油释放的抑制作用未达到差异水平。rAdp处理12h后,脂肪细胞AdpR1和AdpR2mRNA表达显著升高（P〈0.01）,但无剂量依赖性;rAdp处理48h后,脂肪细胞AdpmRNA表达显著下降（P〈0.05）。rAdp处理12h后,脂肪细胞PPARαmRNA表达显著升高（P〈0.01）,且有剂量效应性;而AMP AMPK mRNA表达均无显著性变化。结果提示,重组脂联素处理猪原代脂肪细胞有降低细胞活力和抑制脂肪细胞甘油释放量的趋势,能显著上调AdpR1、AdpR2和PPARα基因的表达,从而刺激脂肪酸氧化和甘油三酯的水解作用。     

纳米氧化铜对鸡肝细胞CP mRNA表达及培养基质中肝酶活性的影响

将培养48h的鸡原代肝细胞随机分为13组,每组3个重复。第1组为对照组,第2～5、6～9和10～13组分别以硫酸铜、氧化铜和纳米氧化铜的形式添加铜2、4、8、16mg/L,继续培养24h后检测上清中AKP、AST、ALT、γ-GT和LDH活性,用实时荧光定量PCR法检测肝细胞CP mRNA表达量。结果显示,以硫酸铜形式添加铜2～16mg/L、以氧化铜形式添加铜8～16mg/L和以纳米氧化铜形式添加铜16mg/L,培养基质中γ-GT活性均显著高于对照组（P〈0.05）;添加铜2mg/L时,硫酸铜组γ-GT活性显著高于纳米氧化铜组（P〈0.05）,添加铜8mg/L时,氧化铜组γ-GT活性显著高于纳米氧化铜组（P〈0.05）。添加铜2mg/L时,硫酸铜和氧化铜组AST和LDH活性显著高于对照组和纳米氧化铜组（P〈0.05）。添加铜2mg/L时,氧化铜组ALT活性显著高于纳米氧化铜组（P〈0.05）。添加铜8mg/L时,硫酸铜和氧化铜组AKP活性显著高于对照组和纳米氧化铜组（P〈0.05）。添加铜2～8mg/L时,肝细胞CP mRNA表达量显著高于对照组（P〈0.05）;添加铜2mg/L时,纳米氧化铜组肝细胞CP mR-NA表达量显著高于氧化铜组（P〈0.05）,氧化铜组显著高于硫酸铜组（P〈0.05）;肝细胞CP mRNA表达量随铜添加量的增加而降低。结果表明,基质中铜达到2mg/L时,纳米氧化铜比硫酸铜、氧化铜更有利于肝细胞生长,纳米氧化铜对体外培养肝细胞的损害作用低于硫酸铜和氧化铜。     

海北牦牛内脏中活性物研究

对海北8头成年牦牛的内脏中活性物进行了测定。结果为:海北牦牛肝脏中L-肉碱含量为30.45mg/g,比普通黄牛高7.33mg/g,且差异极显著(P0.01);肺脏L-肉碱含量为6.42mg/g,比普通黄牛高1.14mg/g,且差异显著(P0.05);心脏和肾脏中差异不显著。海北牦牛肝脏中含牛磺酸7.02mg/g,比普通黄牛高0.96mg/g,且差异极显著(P0.01);肺脏中含牛磺酸4.62mg/g,比普通黄牛高0.64mg/g,且差异显著(P0.05);心脏和肾脏中差异不显著。海北牦牛心脏和肺脏中分别含肝素钠74.33mg/kg和310.60mg/kg,比普通黄牛相应脏器高35.36mg/kg和111.12mg/kg,且差异极显著(P0.01)。海北牦牛肝脏中谷胱甘肽的含量为0.16mg/g,极显著的低于普通黄牛(P0.01);肾脏中含量为0.18 mg/g,显著的低于普通黄牛(P0.05)。     

冷应激对猪脂肪、肝脏、心脏与肾脏组织中PPARγ2 mRNA及蛋白表达的影响

为了研究冷应激对机体的影响及过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPARγ2）在冷应激中的作用,本试验选用30头军牧一号猪,并随机分成5组,包括常温对照组和4个冷应激组。常温组在（21±2）℃饲养,冷应激组的温度设置分别为：（-10±2）、（-5±2）、（0±2）、（5±2）℃。冷应激2h屠宰后分别采集猪腹腔脂肪、颈部皮下脂肪、胸部皮下脂肪、肝脏、心脏与肾脏组织样品提取总RNA与总蛋白。通过荧光定量PCR技术检测了PPARγ2mR-NA的表达量;通过Western blot检测PPARγ2蛋白表达量。结果显示,各温度组猪腹腔脂肪、颈部皮下脂肪、胸部皮下脂肪、肝脏、心脏PPARγ2mRNA及蛋白表达量总体上差异显著（P〈0.01）,肾脏PPARγ2mRNA表达量总体显著升高,但其蛋白表达量总体呈下降趋势。结果表明,PPARγ2对冷刺激非常敏感,它除了可以调节冷应激时的脂肪代谢平衡,还对心脏有较好的保护作用,但是对肾脏的作用有限。本试验显示了冷应激中PPARγ2在脂肪代谢与能量代谢中作用,为研究冷应激对机体的影响及畜禽品质的提高奠定了基础。     

引入西藏高原的家兔血液生化参数的比较研究

对引入西藏高原多年的加利福尼亚兔和中国白兔的12项血清生化指标进行测定,并与SPF新西兰兔进行比较。结果显示：①3个品种公兔之间,加尼福利亚兔与中国白兔比较,AST、TP、ALB、GLO、A／G、GLU、CRE、LDH差异极显著（P〈0．01）,TG、BUN差异显著（P〈0．05）,其中TP、ALB、A／G、CRE、CHOL、LDH表现极强的公兔特征,而ALT、GLU母兔明显高于公兔;加利福尼亚兔与SPF新西兰兔比较。ALT、A／G、CRE、TG、BUN差异显著（P〈0．05）,AST、CHOL、LDH差异极显著（P〈0．01）;中国白兔与SPF新西兰兔比较,ALT、AST、TP、ALB、GLO、A／G、CRE、CHOL、TG差异极显著（P〈0．01）;②3个品种母兔之间,加利福尼亚兔与中国白兔比较,ALT、GLO、CRE、TG差异显著（P〈0．05）,AST、TP、BUN、LDH差异极显著（P〈0．01）,加利福尼亚兔与SPF新西兰兔比较,ALT、TP、ALB、GLO、A／G、BUN、CRE、LDH差异极显著（P〈0．01）,AST、TG差异显著（P〈0．05）;中国白兔与SPF新西兰兔比较,ALT、TP、ALB、GLO、A／G、CRE、CHOL、TG、LDH差异极显著（P〈0．01）,BUN、AST差异显著（P〈0．05）。     

孕酮对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-α、IL-1β、TLR4、CD14和MD2的影响

先分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,经差速贴壁法纯化后,随机分为6组：空白对照组、0.5mg/L脂多糖（LPS）组、10-6 mol/L孕酮（P4）组、LPS＋10-5 mol/L P4组、LPS＋10-6 mol/L P4组、LPS＋10-7 mol/L P4组。各组在处理12、24h分别提取上清液,ELISA法测TNF-α和IL-1β的含量;各组在处理24h分别提取细胞总RNA,用RT-PCR法测TLR4、CD14、MD2mRNA的表达。结果显示,处理12、24h,0.5mg/L LPS组TNF-α和IL-1β的含量均极显著高于对照组（P〈0.01）;10-6 mol/L P4组与对照组差异不显著（P〉0.05）;LPS＋10-5 mol/L P4组极显著低于对照组（P〈0.01）;LPS＋10-6 mol/L P4组显著低于对照组（P〈0.05）;而LPS＋10-7 mol/L P4组TNF-α的表达差异不显著（P〉0.05）,IL-1β的表达差异显著（P〈0.05）。说明P4可降低LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α和IL-1β的分泌,且呈剂量依赖关系。LPS单独处理,TLR4和CD14mRNA的表达极显著高于对照组（P〈0.01）;10-6 mol/L P4单独处理与对照组无显著差异（P〉0.05）;分别添加1-5、10-6、10-7 mol/L P4组均极显著降低LPS诱导TLR4和CD14mRNA的表达（P〈0.01）,而MD2mRNA的表达差异不显著（P〉0.05）。说明P4可极显著降低LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞TLR4和CD14mRNA表达,但对MD2mRNA表达影响不显著。结果显示,P4能抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α和IL-1β的分泌,此过程与细胞TLR4和CD14表达下降相关,而与MD2的表达无关。     

鸭血红素加氧酶-1（HO-1）基因表达及对蛋壳颜色的影响

以35周龄产绿壳蛋巢湖鸭、产白壳蛋巢湖鸭以及樱桃谷鸭为素材,采集每只鸭的肝脏和输卵管子宫部,提取总RNA进行cDNA反转录,利用实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法检测样品中血红素加氧酶（heme oxygen-ase,HO-1）基因的表达水平,分析不同品种、品系间及同一品种不同器官中HO-1mRNA的表达差异。结果显示：不同品种间,HO-1基因在肝脏组织中相对表达量无显著差异（P〉0.05）,在子宫组织中表达量巢湖鸭极显著高于樱桃谷鸭（P〈0.01）。不同品系间,HO-1基因在肝脏组织中相对表达量无显著性差异（P〉0.05）;巢湖鸭2个品系在子宫中的相对表达量差异不显著,但均显著高于樱桃谷鸭。在同一品种内,HO-1基因在肝脏组织中的相对表达量均极显著高于子宫组织（P〈0.01）。     

不同蛋白质水平对獭兔繁殖性能的影响

选择年龄、体重基本一致,生长发育正常的健康獭兔种母兔24只,随机分成对照组以及A、B、c3个试验组,每组6只,对照组饲喂养殖场现有日粮（蛋白水平为15％）,试验组分别饲喂蛋白质水平为16％、18％、20％的日粮,研究不同蛋白质水平对獭兔繁殖性能的影响。结果表明。不同营养水平对窝产仔数、初生窝重没有明显影响,各组差异不显著（P〉0．05）,但对泌乳力、断奶窝重、断奶个体重等有明显影响。B组的泌乳力、断奶窝重与对照组相比差异显著（P〈0．05）,分别比对照组提高47．6％和1573．42g;断奶个体重,A组和B组均显著高于对照组（P〈0．05）,比对照组分别高30．9％和47．4％,B组显著高于A组（P〈0．05）,比A组高12．6％,C组与对照组差异不显著（P〉0．05）;各组断奶成活数、成活率差异不显著（P〉0．05）。