夏季高温应激下牡蛎粗多糖对公猪生精功能的影响

夏季高温情况下,选择某猪场8头种公猪,随机分为2组,即牡蛎粗多糖试验组、对照组,对试验期间公猪的精液量、精子活力进行统计,并采集试验前后精液,检测精子密度、精子畸形率、精液抗氧化MDA、SOD、GSH-PX指标。结果：牡蛎粗多糖试验组公猪的射精量、精子活力比对照组都有一定水平提高,但差异不显著（P〉0．05）;牡蛎粗多糖试验组的精子密度增加0．32亿个／mL,差异不显著（P〉0．05）,精子畸形率减少了4．26％,差异显著（P〈0．05）;试验组精液SOD、GSH-PX显著提高（P〈0．05）;MDA含量极显著降低（P〈0．01）。结论：在夏季高温情况下,牡蛎粗多糖对精液抗氧化指标和种公猪的生精功能有较明显改善作用。     

纳米化红景天多糖对猪精液冷冻效果的影响

在冷冻稀释液中分别添加分数为1％、5％、10％、15％、20％的纳米化红景天多糖（Nonomaterialsrhodiolasa—chalinensispolysaccaride,NRSP）溶液,以添加6mg／L红景天多糖（Rhodiolasachalinensispolysaccaride,RSP）为对照组,不添加RSP为空白组,检测其对猪冷冻精子活力、顶体完整率、质膜完整率等生理结构指标,以及精子抗氧化能力的影响。结果表明,添加体积分数为15％NRSP组的精子活力（0．69）、顶体完整率（51．42％）、质膜完整率（25．95％）均高于其他组,并显著高于空白组（P〈0．05）。此外添加15％NRSP组的解冻后直线运动精子百分比（46．33％）要显著高于其他各组（P〈0．05）;添加6mg／LRSP组丙二醛（MDA）浓度最低（10．83±0．39）／2mol／L,并且显著低于空白组（31．85土1．36）μmol／L,（P〈0．05）,但与15％的NRSP组（11．60±0．42）μmol／L无显著差异（P〉0．05）。添加20％的RNSP组超氧化物歧化酶（SOD）活力最高（343．05-＋-19．64）μ／mgprot,显著高于其他添加组（P〈0．05）。精子活力、顶体完整率、质膜完整率之间存在显著的正相关关系（P〈0．05）,而精子活力和顶体完整性与MDA浓度呈显著负相关（P〈0．05）,与SOD活力呈显著正相关（P〈0．05）,质膜完整率与两者含量相关性不显著（P〉0．05）。     

稀释液中添加维生素E对和田羊冷冻精液品质的影响

在和田羊精液冷冻稀释液中添加不同浓度的维生素E,比较其对和田羊冷冻精液品质的影响。结果表明：维生素E添加量为1．2mg／mL时精子解冻后活率（43．56％）显著高于对照组（34．14％）和其他各添加组（P〈0．05）;顶体完整率（51．39％）极显著高于对照组（40．12％）和其他各添加组（P〈0．01）。说明在冷冻精液稀释液中添加适当浓度维生素E可以减缓冷冻对精子的伤害,有效提高和田羊冷冻一解冻后精子活率,改善冷冻精液的品质。     

水牛冷冻精液稀释液中添加SOD、GSH对精子品质的影响

试验对在水牛精液稀释液中加入SOD和GSH对水牛精子活率、顶体完整率、体外受精卵母细胞分裂率、囊胚率和孵化率的影响进行比较研究。300IU／ml SOD结合1．0mM GSH效果要好于单独添加3001U／ml SOD和1．0mM GSH,提高精子的活率和存活时间显著（P〈0．05）,在分裂率和囊胚的孵化率方面也明显高于对照组（P〈0．05）。从试验结果可以看出SOD和GSH都能明显减缓水牛精子的死亡时间。且SOD与GSH组合在减缓水牛精子的死亡速度方面效果更为明显。     

复方中草药添加剂对辽宁绒山羊种公羊精液品质的影响

将15只年龄2．60士0．25岁、体重43．48士1．46kg的辽宁绒山羊种公羊随机分为三组,试验一组和试验二组分别饲喂10g／d和15g／d的复方中草药添加剂,对照组不添加,目的是研究中草药添加剂对种公羊精液品质的影响。结果表明,试验45d和75d后,两个试验组的射精量均高于对照组,其中试验一组差异显著（P〈0．05）;精子密度均显著（P〈0．05）高于对照组;顶体完整率高于对照组,其中试验二组在试验75d后与对照组差异极显著（P〈0．01）;美兰褪色时间极显著（P〈O．01）低于对照组;两个试验组的精子活率、畸形率和解冻后活率与对照组均差异不显著（P〉0．05）。对于本复方中草药添加剂而言,辽宁绒山羊种公羊按照10g／d的剂量饲喂即达到了改善精液品质和提高生产效率的目的。     

TCM199对陇东绒山羊细管精液的冷冻效果

目的研究陇东绒山羊细管精液冷冻时,通过在葡萄糖一柠檬酸盐稀释液中添加TCM199,观察其对陇东绒山羊细管冷冻精冷冻效果的影响。方法选用4个试验组和对照组进行对比试验,试验组是在稀释液基础上分别添加TCM199标准液,含量为0．5％、1％、3％、5％（V／V）。结果表明：添加19／6的TCM199标准液的试验组（B）效果较好,其冷冻解冻后精子活力高于对照组和其它试验组,但差异不显著（P〉0．05）,质膜完整率试验组和对照组相比差异不显著（P〉0．05）,在精子穿卵活力试验中（SPA）,试验组和对照组相比差异不显著（P〉0．05）。但在细管解冻后不同时间段活力测定试验中,解冻后5h、8h、12h,试验组（B）和对照组活力差异显著（P〈0．05）,且随着时间延长呈下降趋势。因此制作陇东绒山羊精液细管冷冻时,添加1％TCM199标准液具有比较好的效果。     

稀释液中添加谷氨酰胺对绒山羊冷冻精液品质的影响

在绒山羊冷冻精液稀释液中分别添加0mmol/L、2.5mmol/L、5.0mmol/L、7.5mmol/L和10.0mmol/L五个梯度的谷氨酰胺,以确定冷冻效果最好的谷氨酰胺添加浓度,优化绒山羊冷冻稀释液配方。结果表明:添加5.0mmol/L谷氨酰胺组精子的活率、顶体完整率和生存指数均极显著或显著地高于其他试验组(P0.01,P0.05),而畸形率极显著或显著低于其他试验组(P0.01,P0.05);在脂质过氧化反应和抗氧化酶活性方面,添加5.0 mmol/L组MDA浓度极显著低于其他试验组(P0.01),而CAT活性极显著高于其他试验组(P0.01)。总之,在稀释液中添加5.0mmol/L谷氨酰胺,在冷冻—解冻过程中能起到很好的保护精子的作用。     

海藻糖对猪精液冷冻保存效果的影响

在传统的Tris-柠檬酸-葡萄糖稀释液基础上，分别添加25％、50％、75％、100％的海藻糖，研究不同浓度海藻糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明，海藻糖相对于对照TCG稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果，其最佳添加浓度为25％，冷冻-解冻后猪精子活力、活率、线粒体活性、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高（P〈0．05），分别达到41．38％、46．34％、44．56％、43．51％和64．09％。海藻糖可以明显抑制精子获能，获能处理前精子获能率仅为3．68％，而获能处理后达到41．82％，有利于促进精子获能。精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为2％，海藻糖只有与甘油共同作用，才能在冷冻-解冻过程更加有效地保护精子。猪精子活力、活率、线粒体活性、质膜完整率、顶体完整率等之间存在极显著的正相关关系（P〈0．01），而与获能处理前精子的获能率存在显著的负相关关系（P〈0．05）。     

MCE对哺乳仔猪生产性能及相关生理生化指标的影响

试验选用体重、胎次、泌乳量、产仔数相近的健康母猪所产的180头哺乳仔猪为试验对象,分为试验组和对照组。每个处理组9个重复,每个重复10头仔猪。试验组添加MCE4．5mg／kg,对照组未添加MCE。从第7d诱食,到断奶结束,研究MCE对哺乳仔猪生产性能、免疫应激参数、血清抗氧化参数的影响。结果表明,7～35d试验组哺乳仔猪的日采食量明显低于对照组（P〈0．05）;试验组空肠绒毛长度极显著高于对照组（P〈0．01）,隐窝深度极显著低于对照组（P〈0．01）;试验组钠泵和总二糖酶的含量显著高于对照组（P〈0．05）;试验组总抗氧化能力、总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶显著高于对照组（P〈0．05）,而丙二醛含量极显著低于对照组（P〈0．01）;试验组黏膜谷胱甘肽极显著高于对照组（P〈0．01）;添加MCE组仔猪血清免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、溶茵酶、一氧化氮合酶、一氧化氮极显著高于对照组（P〈0．01）,而乳酸脱氢酶显著低于对照组（P〈0．05）。MCE作为抗生素替代品能明显改善新生仔猪免疫和氧化应激参数,提高仔猪抗病和抗氧化能力,改善小肠粘膜健康,促进饲料养分的利用,改善仔猪生产性能。     

不同稀释剂对猪冷冻精液精子活率的影响

手握法采集12月龄大约克种公猪精液，在37℃下离心，弃去精清，收集浓缩段富含精子部分，用7种不同的稀释液进行稀释，应用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。结果表明，在7种稀释液中，7号稀释液优于其他6种稀释液（P〈0．05）：与其他的冷冻保护剂相比，甘油的冷冻保护性能较好（P〈0．01），其适宜浓度为2～4mL／L：干解冻（40℃～45℃）效果优于湿解冻，解冻后精于活率达0．6～0．49（P〈0．05）；稀释液中添加安钠咖可有效地延长精于的冻后存活时间（P〈0．01）。     

谷胱甘肽对犬精液冷冻保存效果的影响

为探讨在冷冻稀释液中添加谷胱甘肽（GSH）对犬精液冷冻保存效果的影响,采用按摩法采集5只杂种土犬的精液,离心去精清后,在冷冻液中分别加入0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L的GSH,制成0.25 mL的冻精进行冷冻保存,以不添加GSH的处理组作为对照组。解冻后在含有5% CO₂的空气、37 ℃、相对饱和湿度条件下孵育10 h,分别在孵育0、2、4、6、8、10 h时检查精子活力。结果显示：冻融后0 h,0.5、1.0 mmol/L GSH处理组的精子活力较高,分别为0.36和0.38,均显著（P<0.05）高于对照组和2.0、2.5 mmol/L处理组,且两者之间差异不显著（P>0.05）;1.0 mmol/L处理组的精子顶体完整率最高,为85.10%,显著（P<0.05）高于对照组,同时,其精子畸形率最低,为23.00%,显著（P<0.05）低于对照组。冻融后体外孵育2、4 h时,0.5、1.0 mmol/L处理组的精子活力均较高,其中,0.5 mmol/L处理组在体外孵育4 h时,其精子活力仍可达到0.30;孵育6 h时,1.0 mmol/L处理组精子活力最高,显著（P<0.05）高于对照组和2.0、2.5 mmol/L处理组;孵育8 h时,各GSH处理组的精子活力均显著（P<0.05）高于对照组;在孵育至10 h时,各GSH处理组的精子活力较其他孵育时间均有较大幅度的下降,未检测到对照组中有呈直线运动的精子。综上提示,在犬精液冷冻液中添加0.5~1.0 mmol/L的GSH能够显著提高冻融后的精子质量和体外存活时间。     

含N-乙酰半胱氨酸稀释液对鸡精液低温保存效果的影响

采集安卡红种公鸡鲜精,分别用含不同浓度N-乙酰半胱氨酸的A、B 2种稀释液稀释后低温保存,之后测定保存时间、生存指数和精子畸形率,比较不同浓度的N-乙酰半胱氨酸对鸡精液在低温保存下的效果。结果表明：A液中,0.013 0 mol/L添加量和0.002 6 mol/L添加量相比保存时间和生存指数均无显著差异（P〉0.05）,且均极显著（P〈0.01）高于A液无添加组;B液中,0.013 0 mol/L添加量在保存时间和生存指数方面均极显著（P〈0.01）优于0.002 6 mol/L添加量和无添加组,0.002 6 mol/L添加量与B液无添加组相比,保存时间和生存指数差异均不显著（P〉0.05）。而2种稀释液中是否添加N-乙酰半胱氨酸及添加量的多少对精子畸形率影响均不大（P〉0.05）。     

红景天粗多糖中基分对猪精子冻后生化指标及活力的影响

试验将采自5头杜洛克（2～4岁）猪精液（2次/周）冷冻解冻于含有红景天粗多糖中基分（Middle Components of Rhocliola Polysacchoride,MCRP）的稀释液中,应用计算机辅助精子分析系统对猪精子运动特征进行了评价,其它参数用常规精子评价方法进行评估,分析MCRP对猪精子冻后生化指标及活力的影响。结果表明,MCRP在稀释液中的有效浓度范围为4.0～6.0mg/L,当MCRP浓度为6mg/L时,其各项指标均显著高于其它各组（P〈0.05）,而且冷冻解冻后,MCRP添加于稀释液I的精子质量显著优于MCRP添加到稀释液II的精子质量（P〈0.05）。冷冻解冻液中MCRP的浓度与解冻后解冻液中的谷胱甘肽、精子线粒体活性、精子低渗肿胀系数呈显著正相关（P〈0.05）,而与解冻液中的丙二醛浓度呈显著负相关（r=-0.982,P〈0.05）。猪精液冷冻保护液中添加MCRP能够有效地抵抗由于冷冻产生的活性氧自由基对精子的伤害,从而提高精子冻后质量,但是MCRP抑制活性氧自由基的具体成分仍需要进一步的研究。     

p38介导β-羟丁酸对原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响

本试验旨在探讨β-羟丁酸（BHBA）对体外原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响以及p38MAPK在其中的调控作用。选择培养72h的肝细胞,添加不同浓度的BHBA（0、0．6、1．2、2．4mmol／L）,培养9h,每个浓度3个重复。另外选取细胞,p38MAPK抑制剂SB203580（10pmol／L）预处理1h后,添加BHBA,使其终浓度为2．4retool／L;PI／An—nexinV—FITC双染,运用荧光显微镜观察肝细胞凋亡情况;ELISA法检测p38的活性;实时荧光定量PCR方法检测p38、Caspase-3、Caspase9、bcl2基因的mRNA表达水平。结果表明,与对照组相比,1．2和2．4mmol／I—BHBA组的肝细胞凋亡明显增加;p38酶活性明显升高;p38、caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平均显著增加（P〈0．01）。bcl2基因mRNA表达水平显著降低（P〈0．05）;添加p38抑制剂后,caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平显著降低（P〈0．01）,bcl-2基因mRNA表达水平显著增加（P〈O．05）。高浓度的BHBA可以诱导体外原代培养犊牛肝细胞凋亡,p38在BHBA诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。     

Effect of pre-freeze addition of cysteine hydrochloride and reduced glutathione in semen of crossbred Jersey bulls on sperm parameters and conception rates

This study was aimed to assess the effect of pre-freeze addition of cysteine hydrochloride and glutathione (GSH) on post-thaw sperm functional parameters and field fertility. The experimental bulls (n = 6) aged 4-6 years were used for this study. A total of 36 ejaculates (six ejaculates per bull) were collected and divided into three groups, group I (control), group II (5 mm cysteine hydrochloride) and group III (5 mm GSH). The extended semen samples with and without additives were filled in mini straw using automatic filling and sealing machine and cryopreserved in liquid nitrogen. Post-freeze seminal traits were recorded after thawing at 37°C for 30 s. The curvilinear velocity (VCL) and amplitude of lateral head displacement values were significantly (p < 0.05) higher in GSH than the cysteine and control groups. Post-thaw plasmalemma integrity was significantly (p < 0.01) higher in GSH group when compared to cysteine and control groups. The loss of acrosomal integrity was significantly (p < 0.01) lower in GSH than in cysteine and control groups. Addition of GSH non-significantly (p = 0.1) improved mitochondrial membrane potential (MMP) (per cent) than control group. This study indicates that the addition of cysteine and GSH suggestive (p = 0.08) of reducing lipid peroxide levels. The conception rate (%) in glutathione group was significantly (p < 0.05) higher than that in cysteine (68 vs 58) and control (49) groups. The post-thaw sperm progressive forward motility (r = 0.4) had moderate, but no significant correlation with conception rate. However, post-thaw straight-line velocity (r = 0.7), loss of acrosomal integrity (r = -0.8) and MMP (r = 0.9) had significant (p < 0.05) correlation with field fertility. This study indicates that the use of glutathione as semen additive may be used for improving post-thaw semen quality and overall augmentation of pregnancy in cows.     

镉对PC12细胞的氧化损伤及α-硫辛酸的保护效应

为研究α-硫辛酸（α-lipoid acid,α-LA）对镉致PC12细胞氧化损伤的保护效应,通过不同浓度的醋酸镉染毒PC12细胞,并用100μmol/Lα-LA联合作用,测定PC12细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量。结果表明：与对照组相比,10μmol/L醋酸镉处理24h组细胞MDA含量和CAT活性极显著升高（P〈0.01）,SOD和GSH-Px活性极显著降低（P〈0.01）;不同浓度镉处理组细胞内MDA含量和CAT活性显著或极显著升高（P〈0.05或P〈0.01）,10和20μmol/L组SOD和GSH-Px活性极显著降低（P〈0.01）。α-LA保护组与相应染毒组相比,MDA含量和CAT活性显著降低（P〈0.05）,SOD和GSHPx活性有升高趋势,但组间差异不显著（P〉0.05）。说明镉可致PC12细胞发生氧化应激,α-LA可以提高PC12细胞的抗氧化能力,对镉引起的氧化损伤有一定的保护作用。     

不同冷冻方法对甘肃高山细毛羊精液冷冻效果的研究

为了研究甘肃高山细毛羊种公羊精液冷冻保存的效果.将液氮熏蒸距离按1.5、2.0、2.5 cm分为三个组合,每个组合用6.5、7、7.5 min三种时间进行熏蒸处理,对细毛羊种公羊冻精进行对比试验.熏蒸距离为2 cm,熏蒸时间为6.5 min、7 min和7.5 min处理组精子活率分别为24.91±3.31、42.33±3.96和32.83±2.08,与其它各组精子活率相比较好,组间差异显著（P＜0.05）.试验表明,细毛羊种公羊冻精熏蒸距离越近,熏蒸时间应减短,熏蒸距离越远,熏蒸时间应延长.最佳熏蒸距离为2 cm和熏蒸时间为7min,精子活率42.33±3.96.液氮熏蒸细管冷冻法的精子活率（42.33±3.96）,高于液氮熏蒸颗粒法（33.75±5.32）,而二者差异显著（P＜0.05）.液氮颗粒法的顶体完整率（33.75％）和细管法的顶体完整率（39.08％）差异不显著（P＞0.05）.通过调整细毛羊精液稀释液成分、pH值、渗透压,利用简易的液氮熏蒸方法可以完成甘肃高山细毛羊精液冷冻保存.     

稀释液中添加棉子糖对冻融后绵羊精液品质的影响

本试验目的是研究稀释液中添加不同浓度的棉子糖对冻融后绵羊精液品质的影响。选用10只健康乌珠穆沁种公羊,采集精液经检验合格在37 ℃下混匀,精液样品平均分成5份,用含有0、5、10、15、20 mmol/L的不同浓度棉子糖稀释液稀释。采用0.25 mL细管法冷冻,将冷冻后的细管精液置于37 ℃水浴锅中解冻15 s后进行相关指标评价及酶(SOD、GSH、MDA、GSH-Px和CAT)的测定。结果表明,当棉子糖的添加量为15 mmol/L时精子活率显著高于对照组(P＜0.05),畸形率显著低于对照组(P＜0.05),弯尾率显著高于对照组(P＜0.05),SOD活力显著提高(P＜0.05),MDA也显著低于对照组(P＜0.05)。     

奶牛性控精液与常规精液抗氧化物酶活性比较分析

通过比较常规精液和性控精液在活力、顶体完整率及精浆中四种抗氧化酶类活力的差异,对性控精液的品质进行综合评定。对用流式细胞仪分离后的性控精液和常规精液细管解冻(37.5℃,30s),分别分析精子活力和精子顶体完整率,并测定精浆中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、谷胱甘肽还原酶(GR)和过氧化氢酶(CAT)的活性。结果表明性控精液精子在活力显著低于常规精液,且精浆中四种抗氧化酶类的活力也都显著低于常规精液。     

波德代种公羊精液品质的分析

选取健康、体况良好、体格大小相近的波德代种公羊6只,分为运动与不运动两组,试验期6d,研究运动状态对绵羊精液品质的影响.结果表明：波德代种公羊平均每次采精量为1.33土0.08 mL,平均精子活率84.24±1.76,平均密度为38.06±2.55亿个/mL,精子畸形率平均为2.64±0.23％.在公羊运动与不运动状态下活率之间差异显著（P＜0.05）,而射精量、畸形率、密度之间差异不显著（P＞0.05）;对精液品质特性进行相关性分析发现精子密度与畸形精子率呈显著负相关（P＜0.05）,其他指标之间相关性不显著（P＞0.05）.