菊花叶片离体高效再生体系的建立

本文报道了以菊花叶片为外植体，诱导植株再生，建立高效植株再生体系。获得诱导愈伤组织、芽和根的最佳培养基。在有6-BA、NAA的MS培养基上获得较高的愈伤组织诱导率，在有2，4-D的培养基上其愈伤组织诱导率很低。带有愈伤组织的外植体转移到有6-BA、NAA的MS培养基上催化芽的产生，并筛选出能直接诱导芽再生的培养基(MS 6-BA(3mg／L) NAA(1mg／L))。AgNO3可明显提高芽的再生率。茎段在1／2MS和有IBA或NAA的1／2MS培养基上诱导生根。生根的小苗在温室里生长良好。     

菊花茎叶外植体再生体系的研究

以地被菊‘矮黄’、‘玉龙’和传统菊花‘金背大红’的叶盘和茎段为外植体进行再生培养 .实验结果表明 ,不同品种对相同激素水平的反应是不同的 :传统的大菊‘金背大红’的愈伤诱导率和分化率都远远低于两种地被菊 ;在相同条件下以茎段为外植体诱导愈伤率高于叶盘 ,但是叶盘的直接分化率高于茎段 .‘玉龙’和‘矮黄’的最适再生培养基组成为MS +NAA 0 .1mg/L + 6 BA 1mg/L和MS +NAA 0 .2mg/L + 6 BA 2mg/L ,‘金背大红’为MS +NAA 1mg/L + 6 BA 5mg/L     

丽格海棠组织培养外植体再生体系建立关键技术的研究

以丽格海棠的叶、茎、花茎、叶柄等营养器官作为外植体进行组织培养,着重研究丽格海棠的最佳外植体,最佳培养基配方及接种模式的关键技术。研究表明初代培养基本培养基为MS,激素配比为6-BA0 5mg/L+NAA0 1mg/L,培养30d可获得较多的不定芽。外植体分化能力的研究表明丽格海棠的不同类型外植体能力大小为:叶>茎>花茎>叶柄;从叶片的不同部位来看,叶中>叶侧>叶边缘;从不同叶龄来看,中等成熟叶>幼叶>完全成熟叶>芽叶。叶片的接种模式:反放比正放好。     

木薯初生体细胞胚发生及植株再生的影响因素

分别采用不同培养基（MS、1/2MS、GD和SH）、外植体（茎尖、幼嫩茎段、嫩叶和老叶）、0～100.00mg/LNAA和不同基因型木薯品种对木薯初生体细胞胚发生及植株再生的影响进行研究。结果表明,与其他3种培养基（1/2MS、GD、SH）相比,在MS培养基上,木薯品种GR911初生体细胞胚及植株再生的发生率最高,分别为36.0%和8.3株/外植体;以幼嫩茎段为外植体时,虽然GR911初生体细胞胚发生率及植株再生频率稍低于茎尖,但诱导效果较好且省时省工。随着MS培养基中NAA浓度的增加,GR911的初生体细胞胚发生率和植株再生频率呈先增加后降低趋势,以添加60.00mg/LNAA的诱导效果最好,可以直接诱导初生体细胞胚发生和芽的形成。此外,供试的9个木薯品种中有8个品种（GR911、SC5、SC6、SC7、SC8、SC9、南植188和SC205）可直接由茎段诱导初生体细胞胚发生和植株再生,但不同基因型木薯品种间的体细胞胚发生率和植株再生频率差异较大,以SC8最高,SC7最低。     

菊花脑离体培养再生植株研究

[目的]研究菊花脑离体培养再生植株技术。[方法]以菊花脑叶片、叶柄、茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究了不同激素组合对其不定芽诱导率的影响。[结果]叶片外植体诱导率最高,叶柄次之,茎段最低。菊花脑叶片生芽的最佳培养基是MS＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA;叶柄生芽的最佳培养基为MS＋0.5mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA;茎段生芽的最佳培养基是MS＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA。[结论]建立了菊花脑叶片、叶柄、茎段直接诱导不定芽的组织培养技术。     

菊花离体叶片快繁体系的建立

以菊花叶片为外植体,诱导植株再生,建立高效植株再生体系。结果在MS 2mg/LBA 0.2mg/LNAA的培养基上诱导出愈伤组织,在MS 3mg/LBA 0.1mg/LNAA的培养基上诱导出芽,并在1/2MS 0.6mg/LNAA的培养基上诱导出根,从而获得再生完整植株,生根的小苗在温室生长良好。     

‘小黄’菊遗传转化再生体系的建立

以‘小黄’菊茎段、叶盘为外植体 ,选用MS培养基为基本培养基 ,附加激素 6 BA和NAA ,通过研究不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导及不定芽分化的影响 ,建立了较好的遗传转化再生体系 .试验结果表明‘小黄’菊茎段、叶盘最适分化培养基分别为MS +6 BA 2mg L +NAA 1mg L和MS +6 BA 1mg L +NAA 0 1mg L ;小苗的最佳生根培养基为 1 2MS +NAA 0 1mg L ,生根率可达 10 0 % ;4 0mg L卡那霉素可以抑制茎段的分化 ,10mg L卡那霉素可以抑制叶片的分化 ,2 0mg L卡那霉素可以抑制分化小苗的生根 .     

茶菊再生体系及其卡那霉素筛选体系的建立

[目的]建立高效的茶菊再生体系和卡那霉素筛选体系。[方法]以茶菊叶盘和茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同浓度的6-BA和N从设计不同的培养基,研究茶菊叶盘和茎段的最适分化条件,并进行卡那霉素敏感性试验,研究其对不定芽诱导和生根的影响。[结果]茶菊叶盘和茎段直接分化不定芽的最适培养基分别为MS＋6．BA1．0mg／L＋NAA0．3mg／L和MS＋6．BA2．0mg／L＋NAA0．1mg／L,茶菊生根较容易,在5种培养基上生根率均可达100％;茶菊对卡那霉素反应较为敏感,20．0mg／L卡那霉素即可抑制叶盘的分化,40．0mg／L的卡那霉素可抑制茎段的分化,30．0mg／L卡那霉素可抑制小苗的生根。6cm左右长的生根无茵苗经炼苗和移栽后成活率为100％。[结论]该试验为茶菊的进一步遗传转化提供了基础。     

松果菊根外植体植株再生能力的评价

为了评价松果菊Echinacea purpurea L.根外植体的再生能力,将从松果菊无菌小苗得到的根外植体和叶片以及叶柄外植体接种到含有不同种类和浓度的细胞分裂素和生长素的培养基上,诱导不定芽的再生.结果表明,在多数情况下,根外植体的再生能力显著高于叶片,和叶柄类似.0.3 mg/L的苄基腺嘌呤和0.01 mg/L的萘乙酸是诱导根外植体不定芽再生最合适的激素种类和质量浓度组合.根外植体培养的不定芽再生频率为100%,每个根外植体得到再生芽1.75个.当把这些由根再生的不定芽从母体组织切开并转移培养到含有0.01 mg/L萘乙酸的培养基后,很容易生根并成为完整的植株.可见根是组培快繁松果菊理想的外植体材料.     

不同质量浓度抗生素对菊花‘绿鹦哥’茎段组织培养的影响

研究确定了选择标记抗生素卡那霉素(Kanamycin:Kan)对菊花‘绿鹦哥'茎段分化和无茼苗生根抑制的最适质量浓度,并探讨了除菌抗生素头孢噻肟钠(Cefotaxime:Cef)对‘绿鹦哥'茎段分化影响的安全质量浓度.试验结果表明,30 mg·L~(-1)的卡那霉素能够完全抑制菊花茎段的分化,10 mg·L~(-1)的卡那霉素可以完全抑制无菌苗的生根;700 mg·L~(-1)的头孢噻肟钠不影响菊花茎段外植体不定芽的再生,随着头孢噻肟钠质量浓度的升高,菊花茎段不定芽出现玻璃化现象.     

尾赤桉叶片及茎段的离体培养与植株再生

以无菌生根苗的叶片和茎段为外植体进行了尾赤桉无性系DH201-2不定芽的诱导及植株再生。通过对外植体的筛选、激素种类和浓度的调整、培养条件的选择,结果表明,取自生根培养基上培养30 d植株的上部和中部的茎段在改良MS+TDZ 0.05 mg.L-1+NAA 0.50 mg.L-1的培养基中获得高达57.0%的丛生芽诱导;取在生根培养基上培养20 d的植株,顶端叶片在改良MS+TDZ 0.05 mg.L-1+IBA 0.10 mg.L-1的培养基中获得48.3%的植株再生;适合于茎段和叶片不定芽分化的Ca(NO3)2浓度为0.706 0 g.L-1。     

莱芜生姜根状茎再生植株的研究

以莱芜生姜的根状茎为外植体 ,研究了利用根状茎再生植株的适宜培养基及影响其分化率的主要因素。结果表明 ,以MS附加BA 3 0mg/L和NAA 0 6mg/L的培养基根状茎分化率最高 ,可达 6 9 4 %。用催芽 30天左右的根状茎再生率最高。外植体接种密度以 4块 /瓶为宜。     

不同激素配比对茶树苗组织培养的影响

利用茶树苗的叶片、茎段、茎尖等外植体为材料,探讨不同激素配比对叶片、茎段产生愈伤组织,以及对茎尖产生丛生芽的影响。结果表明:叶片、茎段都能产生愈伤组织,但茎段的愈伤组织诱导率较高,叶片的愈伤组织诱导率较低。叶片、茎段愈伤组织培养的最适培养基是MS+2,4-D(2mg/L)+6-BA(0.4mg/L)。     

不同浓度6-BA对菊花分枝的影响

[目的]探讨不同浓度6-BA对菊花分枝的影响。[方法]以无污染、生长健壮的菊花组培苗的茎尖、茎段为外植体,在MS培养基中分别添加0(对照)、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9 mg/L的6-BA,观察菊花的分枝情况。[结果]方差分析表明,处理间存在极显著差异(P<0.01)。多重比较分析表明,0.5 mg/L 6-BA处理与其他5个处理存在极显著差异(P<0.01)。在0~0.5 mg/L浓度范围内,菊花的分枝数随6-BA浓度的增高而增加,超过0.5 mg/L时,菊花的分枝数随6-BA浓度的增高而降低。[结论]0.5 mg/L 6-BA处理的菊花的分枝数最多,分枝效果最佳。     

反义AcInv基因转化马铃薯方法的研究

马铃薯反义AcInv基因,采用农杆菌介导法,选用生产上推广的9个普通四倍体栽培种,对影响转化的各个因素进行了优化研究。结果表明:在愈伤组织诱导过程中,卡那霉素(Km)的适宜浓度为100 mg/L;生根过程中为50 mg/L。外植体的预培养为:茎段2 d,叶盘3 d效果较好;农杆菌浓度当OD600值为0.5时对茎段和叶盘的转化效果均较佳;茎段和叶盘侵染时间分别达8 min和10 min时转化率较高;外植体与农杆菌共培养时间分别为2 d和3 d时,茎段和叶盘的转化率较高;各个品种的外植体在卡那霉素抗性培养基上均能形成愈伤组织,但只有1号(“大西洋”)最后从愈伤组织上分化成苗,形成正常植株,植株再生率为11.2 %,PCR扩增检测表明大部分转基因植株为阳性。     

F1大丽花组培苗快繁技术研究

用F1大丽花的种子、嫩芽及开花茎段做外植体,以MS为基本培养基,在5个分化培养基上接种诱导出芽,在4个继代培养基上扩繁增殖,在4个生根培养基上诱导生根,在4种无土基质上出瓶培养成生产用苗。得出F1大丽花组培苗速繁适用程序为:嫩芽及开花茎段为外植体→接种在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L→增殖在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+B90.1mg/L→生根在1/2MS+0.1 NAA mg/L→落叶松针叶+细沙出瓶培养。试验采用简易材料和药剂,降低了组培苗生产成本,选取可控花期的不同部位外植体,可缩短育苗周期。     

甘蔗离体培养的变异机理及筛选技术——Ⅱ.甘蔗组培苗分化过程中一些生物大分子的变化

比较5个供体的心叶和幼茎愈伤组织在 MS 和 N_6培养基中诱导分化绿苗过程 RNA,DNA 和可溶性蛋白质的动态变化.结果发现,在绿苗诱导分化的第6—9 d,核酸总量和 RNA含量均达到最高值,第9 d 后两者逐渐下降.DNA 含量从诱导分化开始即呈下降趋势,第9d 时DNA 含量最少,然后义逐渐增加.蛋白质含量在诱导分化的前3 d 增加显著,第3 d 后呈下降趋势,第9 d 后渐趋减缓.不同的培养基对生物大分子的含量变化有一定影响.本试验揭示了在甘蔗愈伤组织诱导分化绿苗过程中,生物大分子变化的不同阶段与细胞分化和器官形成的关系.     

甘薯品种南薯88的组织培养及植株再生研究

[目的]为南薯88的离体筛选及遗传转化奠定基础。[方法]以南薯88的叶片和叶柄为外植体,置于不同激素配比的培养基中,进行组织培养及植株再生,研究不同激素及外植体对南薯88植株再生的影响。[结果]单独使用6-BA、NAA诱导愈伤组织的效果不理想。过高浓度的2,4-D不利于外植体根的形成,也不利于芽的诱导。在MS+NAA1 mg/L+6-BA0.5 mg/L、MS+2,4-D0.05 mg/L+KT1 mg/L培养基中,两种外植体的出愈率均达100%,根分化率均达100%,叶片的芽分化率分别为20%、7%,叶柄的芽分化率均为7%,成功获得再生植株。相同的培养基,不同外植体的愈伤组织生长情况差异不大,器官的分化表现出一定的差异。[结论]南薯88组织培养较适宜的培养基为MS+NAA1 mg/L+6-BA0.5 mg/L、MS+2,4-D0.05 mg/L+KT1 mg/L。南薯88叶片的分化能力大于叶柄。     

葡萄砧木“F-242”离体器官再生体系建立的研究

以葡萄砧木品种"F-242"试管苗为供试材料,研究了不同外植体类型(叶片、茎段、叶柄),不同激素及其浓度配比,基本培养基、暗培养时间对不定芽诱导的影响。结果表明:不同外植体类型,不同激素及其浓度配比、基本培养基等对"F-242"不定芽诱导率的影响有显著差异。外植体以茎段的不定芽诱导率为最高,其次是叶柄。茎段再生的最适培养基为MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.05mg/L,诱导率最高可达30%。前期暗处理对不定芽的诱导影响显著,2周为最佳的暗培养时间。     

植物激素对愈伤组织形成和根芽分化的影响

以烟草叶片、西红柿叶片、菊花花瓣、大豆子叶和根茎为外植体,通过在培养基里添加NAA母液、6-BA母液不同配比的混合液,进行离体培养,了解植物激素对不同外植体生长和分化的影响.研究结果表明:烟草、菊花愈伤组织分化明显,大豆不明显,其中大豆的胚根几乎不产生愈伤组织,在4种激素配方中,NAA:6-BA为0.8:0时植物的愈伤组织主要分化为根;NAA:6-BA为1.6:0.8和0:0.8时植物愈伤组织分化最为明显,产生了大量的茎叶.