甘蔗组培绿苗的分化及游离氨基酸库变化

甘蔗品种仙游79/83的心叶愈伤组织在 N_6培养基中能100%一次诱导成完全苗.诱导分化绿苗过程中,不同培养基从诱导分化的第1天开始,氨基酸总量不断增加,到第18天达最大值.一次诱导分化成的完全苗,不论游离氨基酸的组分或含量都比无根苗的少.组氨酸和色氨酸并不是绿苗分化所必需的氨基酸.此外,不同质量的愈伤组织其氨基酸组分和含量都有差异,说明绿苗的分化可能与氨基酸库有密切关系.     

芦笋高效花药培养技术体系的建立

以芦笋品种"Gijnlim"为试验材料,研究花药预处理、培养基附加物、培养方式等对愈伤组织类型、诱导率和绿苗分化率的影响,探讨愈伤组织类型与染色体倍性比例间的关系。结果表明,芦笋花药在4℃低温下冷藏5～7d后接种于含有NAA2.0mg·L-1、6-BA1.0mg·L-1及6%蔗糖的1/2MS培养基上对愈伤组织的诱导最为有利;接种后进行32℃的高温处理5d,有利于提高愈伤组织的诱导率;培养基中加入水解酪蛋白(CH)300mg·L-1有利于提高愈伤组织的诱导率;愈伤组织的类型和日龄影响绿苗的分化率,致密型愈伤组织的分化率高于松散型愈伤组织,30～40d日龄的愈伤组织分化率最高。镜检结果表明,致密型愈伤组织分化的单倍体多于松散型。     

内源激素对水稻不同外植体培养力的影响

利用HPLC法对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有差异的几个水稻品种的不同外植体(花药、幼穗、幼胚和成熟胚)及其愈伤组织的内源激素含量进行测定分析。结果表明,内源激素的含量和配比是影响愈伤组织诱导和绿苗分化的关键因素之一。不同外植体中的内源激素对愈伤组织诱导率的表现为:Z ZR呈负效应,IAA呈正效应,GA除成熟胚外呈负效应。愈伤组织中内源激素对绿苗分化率的影响表现为:IAA和GA呈负效应,ABA、Z ZR呈正效应。内源激素的配比对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有一定作用,表现为:IAA/Z ZR对愈伤组织诱导率有一定的正效应,Z ZR/IAA、ABA/IAA对绿苗分化率呈显著正相关。     

水稻体细胞培养与无性系变异——Ⅰ,不同基因型不同外植体的培养

对水稻5个品种的种胚和11个品种的幼穗在含不同激素浓度的MS培养基上培养,诱导愈伤组织并再生绿苗。品种间在愈伤组织诱导率、绿苗分化率和对激素的诱导效应表现了基因型差异。幼穗愈伤组织诱导率和绿苗分化率高于种胚。种胚的盾片愈伤组织分化能力高于胚轴,胚芽鞘的未分化得绿苗。去分化培养基添加2,4—D2mg/1+KT0.5mg/1,诱导愈伤组织的效果甚佳,并促进绿苗分化。选择胚性愈伤组织继代培养,种胚的培养270天,幼穗的培养210天,仍有部分品种保持较高的绿苗分化率。     

氮素对小麦幼胚培养的影响

以小麦幼胚为外植体,研究了培养基中无机氮含量及不同铵态氮和硝态氮比例对幼胚愈伤组织诱导、胚性愈伤组织形成和绿苗分化的影响。结果表明,改变铵态氮和硝态氮的比例均显著提高了胚性愈伤组织的诱导率,增加铵态氮含量有利于绿苗分化。     

粳稻花药培养几种培养基试验报告

我们在1990～1991年作了两年的诱导培养基和分化培养基的对比试验。结果表明,N_6基本培养基附加NAA的N_6-1诱导培养基和附加NAA和2,4-D的N_6-2诱导培养基的愈伤组织诱导率分别为30.3％和25.3％,它比附加2,4-D的常用的N_6。诱导培养基(愈伤组织诱导率为20.5％)高出47.8％和23.4％。NAA和2,4-D混用的N_6-2去分化培养基所诱导出的愈伤组织的器官分化率为最高,其绿苗分化率为57.4％,它比常用的N_5培养基(绿苗分化率为44.8％)高出28.0％。器官分化率最低的是单用NAA的N_6-1培养基,其绿苗分化率为36.4％,比N_6培养基低18.7％。附加NAA的N_6-1和N_6-2培养基的出愈速度和器官分化速度明显快于附加2,4-D的N_5培养基。N_6-1培养基和N_6-2培养基花药接种后18天就能看到愈伤组织,出愈速度要比N_5培养基提早3～5天。在N_6培养基上的形成的愈伤组织转移后10天只有部分绿苗出现,但N_4-1和N_6-2培养基上形成的愈伤组织转移后10天,可分化出1/3的绿苗,甚至转移后3天可以看到不少绿点分化。分化培养基来看,MS培养基的植物体分化效率明显高于N_6培养基,其绿苗率提高到2.5倍。     

基因型及培养基种类对不结球白菜一代杂种花药培养的影响

对10个基因型的不结球白菜杂种F1花药进行了离体培养,并分析了不结球白菜基因型、培养基种类对花药愈伤组织诱导和分化的影响.结果表明:供试的10份材料均能在3种诱导培养基中发生愈伤组织.但愈伤组织的分化较为困难;有4份材料能在分化培养基上分化出绿苗,但发生率低,平均绿苗分化率最高的仅为1.515%,另6份材料未发现绿苗产生.     

细胞分裂素对蝴蝶兰体细胞胚诱导及大分子代谢研究

以含6 BA、2,4 D培养基诱导蝴蝶兰外植体。6 BA可从嫩茎切块诱导出胚性愈伤组织,细胞富含淀粉粒,而2,4 D或2,4 D加6 BA诱导得到的愈伤组织不能分化。6 BA易于从嫩叶切片诱导胚性愈伤组织,进行体细胞胚发生过程的显微观察。在6 BA诱导嫩叶切片外植体期间,DNA含量前期平缓上升,第25d后急剧上升。RNA含量开始诱导就上升,第11~18 d达到高峰。水溶性蛋白含量上升启动稍晚,在第25 d达到高峰。     

麦芽糖对小麦花粉愈伤组织诱导和分化的影响

通过在小麦花药培养基中添加麦芽糖的试验,发现含有麦芽糖的诱导培养基对小麦花粉愈伤组织的诱导有明显的影响,这种影响不依赖于培养基中麦芽糖的绝对含量,而取决于培养基中蔗糖与麦芽糖的配比(Su/Ma),麦芽糖与9％蔗糖的最适配比浓度为1％～2％,诱导率比对照高126％～138％.诱导、分化培养基中同时附加一定量的麦芽糖,小麦花粉愈伤组织的绿苗分化率明显提高,在本研究的最优组合中,绿苗分化率比对照提高了22.5个百分点。     

沙地云杉体细胞胚胎发生过程中蔗糖酶活性变化研究

本文以沙地云杉成熟合子胚为材料,在LP培养基上附加2,4-D、6-BA和KT进行愈伤组织诱导和增殖培养,在LS培养基上附加ABA和PEG进行分化培养.测定了沙地云杉体细胞胚胎发生过程中不同阶段,各类型愈伤组织蔗糖酶活力的变化.结果表明:在诱导和增殖阶段,蔗糖酶活力的变化趋势相同.在第0d～6d蔗糖酶活力逐渐增加,到第6d时达到最高峰,第7d～12d蔗糖酶活力下降,12d后又有所回升;分化培养基上的愈伤组织蔗糖酶活力变化稳定.     

麦芽糖对小麦花粉愈伤组织诱导和分化的影响

通过在小麦花药培养基中添加麦芽糖的试验，发现含有麦芽糖的诱导培养基对小麦花粉愈伤组织的诱导有明显的影响，这种影响不依赖于培养基中麦芽糖的绝对含量，而取决于培养基中蔗糖与麦芽糖的配比（Su/Ma)，麦芽糖9%蔗糖的最适配比浓度为1%-2%，诱导率比对照高126%-138%。诱导、分化培养基中同时附加一定量的麦芽糖，小麦花粉愈伤组织的绿苗分化率明显提高，在本研究的最优组合中，绿苗分化率比对照提高了22.5个百分点。     

小麦幼胚离体培养的研究初报

[目的]筛选适宜小麦幼胚培养的培养基和转基因受体材料的优良基因型,为小麦转化、遗传等提供依据.[方法]以7个春小麦品种(系)的幼胚为材料,取开花后12～16 d的幼胚进行培养,20 d后统计幼胚一步成苗数和愈伤组织绿苗分化数.[结果]小麦幼胚在C17、MS和YP三种培养基上都能诱导一次成苗,其中YP培养基一次成苗率最高(75;),其次是MS(33.13;),最低的是C17(23.34;),YP培养基一次成苗的效果明显优于其它两种培养基,不同基因型间的愈伤组织绿苗分化率差异明显.[结论]筛选出适宜小麦幼胚培养一次成苗的YP培养基和一次成苗和愈伤组织分化绿苗率都较高的材料新春9号,此材料可作为幼胚培养和转基因受体材料的优良基因型.     

磁场预处理对花椰菜花药培养的影响

本试验采用磁场预处理提高花椰菜花药培养诱导率，结果表明，磁场预处理可以明显提高诱导率，在均匀磁场中预处理30min，磁场强度以300mT效果较好，提高诱导率27．33％，经过磁场预处理后两种不同培养基的愈伤组织诱导率的差异比未预处理的对照明显缩小，即经磁场预处理的材料对培养基的选择性降低。在同一种诱导培养基上，经磁场预处理后产生的愈伤组织绿苗分化率比对照高4．1％－13．2％，在两种不同培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率的差异更明显，M2培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率比M1培养基上的愈伤组织平均高13．4％－28．4％。     

玉米自交系幼胚培养体系的建立

以重庆地区常用的8个玉米自交系幼胚为外植体,研究不同基因型和培养基对玉米幼胚愈伤组织诱导率的影响.结果表明:自交系082在N6B5培养基的愈伤诱导率最高,达到98%,Hy04未诱导出愈伤组织,不同基因型愈伤诱导率的差异具有高度统计学意义.海09042在G1继代培养基的胚性愈伤组织呈颗粒状分散、结构松软、淡黄色,愈伤接种在加KT或加NAA的分化培养基中,以加NAA的绿苗数多.     

人参粉对小麦和小黑麦花药培养的影响

小麦花药培养中愈伤组织诱导率和绿苗分化率低一直是悬而未决的问题.本试验表明,在NT_5-1培养基中附加1.5g/1人参粉后,能显著提高普通小麦和八倍体小黑麦花粉愈伤组织诱导率.其中普通小麦花粉愈伤组织诱导率可达2.98%(对照为1.49%),出愈时间(22天)较对照早3天,唯绿苗分化率(19.21%)低于对照(28.5%);八倍体小黑麦花粉愈伤组织诱导率达15.86%(对照为8.33%),出愈时间(25天)比对照提早4天,绿苗分化率(4.26%)亦高于对照(3.33%).     

铜离子对猕猴桃愈伤组织再分化培养的研究

以秦美猕猴桃茎段为外植体,诱导愈伤组织并进行猕猴桃再分化及生根试验。在分化培养基中分别添加不同浓度的铜离子进行筛选,以确定适于猕猴桃愈伤组织分化的最佳铜离子浓度。结果表明:再分化培养基中添加1.0 mg.L-1的铜离子时,可明显提高猕猴桃愈伤组织绿苗再分化率及生根率。但当铜离子浓度超过2.0 mg.L-1时,猕猴桃愈伤组织绿苗再分化率显著降低。     

提高小麦花药培养诱导愈伤组织和分化绿苗频率的研究

小麦花药培养,旨在利用单倍体植株加倍后的纯合性,缩短杂交育种时间,随着“花培一号”、“京花一号”、“豫花一号”等小麦新品种的育成,无疑单倍体育种是小麦育种的新途径之一,但目前小麦花药培养在诱导愈伤组织和分化绿苗频率仍很低。本文研究了不同试验材料,不同培养基及试验材料采前灌水对诱导愈伤组织和分化绿苗频率的影响,为提高诱导愈伤组织和分化绿苗频率提供理论依据。     

小麦花培过程中转愈时间对绿苗分化的影响

研究了愈伤组织向分化培养基上转移时间对绿苗分化的影响，结果表明，随着药药接种时间的延长，愈伤组织的琢其分化成绿苗的能力下降、花粉愈伤组织向分化培养基上转移的时间以在接种３０－５０天内，选择颜色淡黄，结构臻密，直径在２ｍｍ 左右的愈伤组织，分２－３批转移为宜，这样可以避免愈伤组织绿苗 分化潜力的降低。     

磁场预处理对花椰菜花药培养的影响

采用磁场强度300，500，700mT预处理大部分花粉发育处于单核中期和单核靠边期的花蕾，以提高花椰菜花药培养的愈伤组织诱导率和绿苗分化率，结果表明，磁场预处理可以明显提高愈伤组织诱导率，以均匀磁场预处理30min、磁场强度为300mT的效果较好，提高诱导率28.87%；经过磁场预处理，两种不同培养基的愈伤组织诱导率的差异比对照间差异明显缩小，即经磁场预处理的材料对培养基的选择性降低；在同一种诱导出的愈伤组织绿苗分化率的差异更明显，M2培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率比M1培养基上的愈伤组织平均高13.2%-26.2%。     

不同小麦基因型及其不同外植体离体培养研究初探

以13个不同基因型、3种不同外植体为材料，选用5种不同培养基，研究了各因素对愈伤组织诱导、分化的影响，并在此基础上建立了一套可靠的小麦组培再生系统。结果表明，愈伤组织的诱导、根的分化和绿苗的再生虽然都具有显著的基因型效应，但不具备显著的相关关系；对于绿苗的再生分化，幼胚优于成熟胚，幼穗和幼胚之间不存在显著的差异；X和A培养基各自在愈僵组织的诱导和再生分化上都明显优于MSS AA／2和R培养基。成熟胚愈伤组织诱导率生根率和绿苗率平均分别可达88.9%、56.3%和8.7%；幼胚愈伤组织诱导率、生根率和绿苗率平均分别可达99.1%、53.2%和17.6%；幼穗愈伤组织诱导率、生根率和绿苗率平均达94.6%、84.8%和18.3%。