水牛牛巴贝斯虫体外培养的研究：Ⅱ.冷冻血清的应用和筛选

应用冷冻血清对１株采自自然感染的水牛牛巴贝斯虫进行了长达７２ｄ的体外连续培养，共继代２０次，培养７２ｈ红细胞染虫率最高达１４．１％，平均为８％～１０％。培养２０ｄ和３０ｄ的牛巴贝斯虫经液氮保存复苏后，接种于去脾水牛犊均引发了严重的牛巴贝斯虫病，从而说明已建立了水牛牛巴贝斯虫的体外连续培养，且经培养后的牛巴贝斯虫致病力没有改变。本试验利用６头份的冷冻健康水牛血清同时进行培养，结果发现，并非所有的健康水牛血清均适合于体外培养牛巴贝斯虫。这一发现对建立水牛牛巴贝斯虫的体外培养和研究水牛牛巴贝斯虫病均具有重要意义     

人血清用于体外培养牛巴贝斯虫

在牛巴贝斯虫（Ｂａｂｅｓｉａｂｏｖｉｓ）的培养中，使用不同含量人血清（Ａ型ＲＨ阳性）和牛血清混合物，如：２０％＋２０％（培养液Ⅰ）、３０％＋１０％（Ⅱ）、４０％＋０％（Ⅲ）、０＋４０％（Ⅳ）以及１９９培养液。牛巴贝斯虫稳定株接种给小犊牛，在染虫率６％时使用。培养液每隔２４小时更换一次。每间隔２４小时培养液的颜色白鲜红变为深咖啡色，红细胞染虫率的增加在２４－２８小时内最大。同时也观察到红细胞染虫率在１：２稀释明显高于１：１稀释。在培养液Ⅰ中，５０％牛血清被人血清替代，红细胞染虫率增加最高，然而，该寄生虫不能进一步培养或保存。在微气静相培养中，５０％被替代是最佳选择。该结果也表明牛巴贝斯虫在。牛血清混合物微气静相培养系统中至少能增殖４８小时，这也与巴贝斯虫属人畜共患性相一致。     

人血清用于体外培养牛巴贝斯虫

在牛巴贝斯虫的培养中，使用不同含量人血清和牛血清混合物，如：２０％＋２０％，３０％＋１０％，４０％＋０％，０＋４０％以及１９９培养液。牛巴贝斯虫稳定株接种给小犊牛，在染虫率６％时使用。培养液每隔２４小时更换一次，每间隔２４小时培养液的颜色由鲜红变为深咖啡色，红细胞染虫率的增加在２４－２８小时内最大。同时也观察到红细胞染虫率在１：２稀释明显高于１：１稀释。在培养液Ⅰ中，５０％牛血清被人血清替代，红细     

双芽巴贝斯虫体外培养技术初探

应用双芽巴贝斯虫染虫血和液氮保藏株,进行体外培养技术初步研究,获得了生长、增殖和保种效果。双芽巴贝斯虫在牛红细胞内带虫率达５％,低染虫率的连续培养已超过２５ｄ。奠定了双芽巴贝斯虫培养技术应用基础。     

巴贝斯虫体外培养技术及其应用的研究进展

体外培养巴贝斯虫的工作起始于1978年，由Frp等采用悬浮培养（Suspensionculture，又称旋转培养SpinnerflaskmethodSFM）成功地进行了牛巴贝斯虫的体外培养，但培养中红细胞染虫率不高。1980年，Levy等仿照Trager（1976）培养恶性疟原虫的技术建立了微气静相培养技术（MicroaerophilousstationaryphasecultureMASP），实现了牛巴贝斯虫的体外连续培养并得到了理想的结果。之后，该方法被迅速应用于双芽巴贝斯虫、分歧巴贝斯虫、大巴贝斯虫、犬巴贝斯虫、隐藏巴贝斯虫、马巴贝斯虫等多种巴贝斯虫的体外培养均获成功。目前，该方法已被…     

牛巴贝斯虫PCR检测及体外培养试验

本试验通过PCR方法检测出牛巴贝斯虫单一感染的牛全血样本,并探讨了牛巴贝斯虫病患牛全血体外培养方法及培养条件。试验结果表明,PCR检测结果显示检测方法效果较好,单一感染样本的新鲜血液中虫体在含40%牛血清的完全培养液和37 ℃、5% CO₂的条件下能建立起牛巴贝斯虫的体外培养,虫体可以连续培养14 d,传代13次,最高染虫率可以达到12.5%,平均染虫率为4%。     

奶牛巴贝斯虫病的诊断与治疗

牛巴贝斯虫病是由巴贝斯属（Babesia）的多种寄生虫寄生于牛红细胞内所引起的血液原虫病。我国已报道的牛巴贝斯虫有3个种：双芽巴贝斯虫（B．bigemina）、牛巴贝斯虫（B．bovis）和卵形巴贝斯虫（B．ovata）。前2个种流行广泛,传播媒介为微小牛蜱和镰形扇头蜱,危害较大;后1个种只在河南局部地区发现,传播媒介为长角血蜱,危害较小。     

动物巴贝斯虫病及其防治

动物巴贝斯虫病是一种新发现的人兽共患病,是由寄生于哺乳动物红细胞内的巴贝斯虫引起的动物原虫病。病程急、发病率高、死亡率高,呈世界性分布。对人类和动物都有较大的危害。 巴贝斯虫属于血孢子虫目、巴贝斯科、巴贝斯属的原生动物。巴贝斯虫主要有4种.即牛巴贝斯虫、分支巴贝斯虫、马巴贝斯虫和微小巴贝斯虫。巴贝斯虫寄生于红细胞的中央或边缘。最长虫体不超过红细胞半径。     

巴贝斯虫病水牛血清钙镁浓度变化与染虫率的关系

自水牛巴贝斯虫病非疫区购买的无任何血液原虫寄生的健康水牛犊２头，人工摘除脾脏后，用从疫区采集的饥饿镰形扇头蜱叮咬感染，观察巴贝斯虫的消长与血清钙、镁浓度的变化，结果发现二者关系密切，其中钙离子浓度与红细胞染虫率呈负相关，镁离子浓度与红细胞染虫率呈正相关，这一发现为进一步研究水牛巴贝斯虫病及在体内外研究巴贝斯虫的生长繁殖均具有重要意义。     

牛巴贝斯虫TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种灵敏、特异、快速的牛巴贝斯虫检测方法,针对牛巴贝斯虫Rap-1a基因设计引物进行PCR扩增,然后构建重组质粒制作标准品,经过优化反应体系、绘制标准曲线,建立了牛巴贝斯虫TaqMan荧光定量PCR方法,并进行灵敏度、特异性及稳定性检测,同时利用该方法对37份田间样品进行检测。结果显示：建立的牛巴贝斯虫TaqMan荧光定量PCR检测方法的标准曲线方程式为y=-3.362×Log（X）+43.32,相关系数R2=0.999,扩增效率为98.4%。该方法的灵敏度为1.0×102 copies/μL,是普通PCR（1.0×104 copies/μL）的100倍。该方法对牛双芽巴贝斯虫、大巴贝斯虫、卵形巴贝斯虫等7种常见的牛梨形虫病检测结果均为阴性,组内和组间重复试验的变异系数均小于2.5%,37份田间样品的阳性检出率为67.5%。结果表明,本试验建立的牛巴贝斯虫TaqMan荧光定量PCR灵敏度高,且特异、稳定,适用于牛巴贝斯虫的诊断,从而为其流行病学调查提供了快速有效的检测方法。     

循化县岗察乡暖棚养羊试验浅析

通过示范户与对照户暖棚养羊试验,对养羊农户暖棚内进行温度、湿度、牲畜保膘、繁活率等指标的测定,并进行对比分析,其结果表明:暖棚饲养比敞棚饲养,绵羊的产肉量、产毛量有不同程度的提高,死亡率下降。     

RSS培养基体外培养结肠小袋纤毛虫的效果观察

目的利用实验生态学的方法,研究了结肠小袋纤毛虫在RSS培养基中种群生长情况。方法在不同米粉含量,不同血清含量,不同PH值的RSS培养基中接种相同量的结肠小袋纤毛虫滋养体,以及在同样的RSS培养基中接种不同量的结肠小袋纤毛虫,进行培养观察,计算其种群自然增长率及世代时间。结果米粉含量为20mg组的种群自然增长率最高;血清含量对种群自然,增长率影响不大,但在最高峰时,20％～25％血清组虫体密度最大;培养基在PH值为7．0和7．5条件下,虫体密度均在d4达到高峰,之后下降。结论培养基中适宜的米粉含量为20-30mg／安瓿,血清含量为20％～25％,最适宜的pH值范围为7．0～7．5。     

应用盐酸克伦特罗作饲料添加剂饲喂家畜对消费者的安全问题

应用盐酸克伦特罗(HCl-Clenbuterol)作饲料添加剂饲喂家畜 ,借以提高其瘦肉率和减少其脂肪率已在欧洲导致多次的消费者集体中毒事件 ,促使欧美政府明令畜牧业禁用此药。中国农业部及药品检查管理局于2000年明令禁止生产、销售和应用此药作饲料添加剂饲喂家畜。本文综述了有关此药导致消费者集体中毒的事件和检验该药在肉品中残留量的精确方法及选择供检验该药残留量的合宜的畜体器官与组织标样等情况 ,借以提高国人认识应用此药作饲料添加剂对人的危害性 ,从而全力支持、拥护、贯彻执行我国政府的禁令 ,达到保证人民健康的目的     

美国高尔夫球场狗牙根草坪杂草防除研究进展

根据文献报道,介绍了美国高尔夫球场狗牙根草坪杂草防除地进展,狗牙根草坪杂草防除的难点是禾本科杂草。用甲胂钠,阿特拉津或西玛津防除鼠尾粟,用费赛特及费赛特加灭草喹防除铺地黍,用甲胂钠及ｄｉｔｈｉｏｐｙｒ除草通,恶草灵,圃草定,黄草消防防马唐,用禾草灵,圃草定ｄｉｔｈｉｏｐｙｒ,除草通,恶草灵防除牛筋草;用灭草喹防除野草,供试狗牙根草坪品种为普通狗牙根,Ｔｉｆｗａｙ和Ｏｒｍｏｎｄ。还介绍了禾草灵,西玛     

2010年国内部分省份猪场常见病毒性疾病的病原学调查

随着规模化养猪业的发展,传染性疾病越来越多,混合感染或多重感染十分普遍,给疾病的诊断和预防带来很大困难。本文将我们实验室2010年分别采自福建、广西、河南、上海、内蒙、浙江、江苏和山西等地发病猪场的185份病料,通过RT-PCR和PCR方法对其进行猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）、猪繁殖障碍的猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）、猪圆环病毒2（Porcine circovirus type 2,PCV2）、猪细小病毒（Porcine parvovirus,PPV）、猪伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）、细环病毒2（Torque teno virus 2,TTV2）等病毒检测。结果表明在所检的病料中PRRSV、PCV2和TTV2的阳性率比较高,分别为49.2%、62.2%和95.1%。有些地方TTV2的阳性率高达100%;同时,还存在很普遍的PRRSV与PCV2、PRRSV与TTV2、PCV2与TTV2等混合感染,混合感染率分别为27.6%、45.4%、58.4%;以及PRRSV、PCV2与TTV2的三重感染率为24.9%。同时对部分PRRSV阳性病料的PRRSV GP5和nsp2基因分别进行测序,分析测序结果表明病料中的PRRSV的GP5和nsp2序列与PRRSV HuN4株的相应序列的亲缘关系分别在98.2%和96.2%以上,且在nsp2区域都存在30个不连续氨基酸的缺失,说明现在临床中所流行的PRRSV可能仍是与高致病性PRRSV基因型相似的病毒。通过本文可以及时了解当前养猪场的病毒性疾病的流行情况,为猪场病毒性疾病的防控提供依据。     

奶牛离体PBMC和体内免疫应答的个体差异及其机理的研究

检测１５头奶牛离体外周血单核细胞和体内产生抗体免疫应答的结果表明，１．０μｇ／ｍｌ的ＰＷＭ或ＳＥＢ使ＰＢＭＣ增殖达最高值，但在分泌Ｉｇ中却表现出不同作用，还发现在群体内离体细胞增殖强度的变异程度小于分泌的Ｉｇ量的变异程度。     

THE USE OF AMITRAZ IN THE CONTROL OF AN OUTBREAK OF SARCOPTIC MANGE IN A COLONY OF KOALAS

SUMMARY: An outbreak of sarcoptic mange in a colony of koalas was effectively controlled by the topical application of amitraz as a 0.025% aqueous suspension. Several koalas died in the 9 months preceding treatment, with lesions suggestive of Sarcoptes scabiei ; however, no further deaths occurred following treatment and there was complete recovery of all affected animals.     

家禽脂类代谢调控机理的研究进展

利用营养和分子生物学手段来调控家禽脂类代谢 ,有赖于对其机理的深入了解。本文详细讨论了脂蛋白转运体系在家禽脂类代谢中的作用。通过营养因素和激素水平调控脂蛋白的合成、组装、转运和降解可影响机体脂肪沉积及蛋黄的形成。低密度脂蛋白LDL -受体基因家族在家禽脂蛋白代谢的调控过程中发挥着至关重要的作用