原花青素影响Aβ25-35诱导PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制

目的探讨原花青素（Proanthocyanidins,PAC）对β-淀粉样肽（25—35）[β amyloid peptide-（25—35）,Aβ25-35]诱导体外血清饥饿培养的PCI2细胞周期异常与凋亡保护作用的可能机制。方法种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用血清饥饿培养使细胞同步于岛期,30mg／L的PAC预处理血清饥饿培养的PC12细胞,加入终浓度为25μmol／L Aβ25-35处理0～20h,通过RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测细胞周期蛋白依赖性激酶4（Cyclin—dependent kinase-4,CDK4）、磷酸化的视网膜纤维母细胞瘤蛋白（phosphorylated Retinoblastoma protein,pRb）、腺病毒E2启动子结合因子1（Adenovirus E2 factor-1,E2 F1）、B细胞淋巴瘤／白血病关联X蛋白（B-cell lymphoma／leukemia-2 Associated X protein,bax）基因表达的变化。结果与Aβ25—35诱导组比较,CDK4、E2F1、bax mRNA表达和CDK4、pR6、Bax蛋白表达降低。结论PAC可能通过下调CDK4、pRb、E2F1的表达,从而降低bax的活化,对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期异常与凋亡起保护作用的。     

过氧化氢诱导原代大鼠睾丸间质细胞氧化损伤模型的建立

为了建立体外模拟氧自由基诱导的细胞氧化损伤模型,本试验采用Percoll密度梯度离心法纯化原代大鼠Leydig细胞,并鉴定特异性蛋白3β-HSD;采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位、ROS以及O·-2含量,比色法测定·OH、MDA的含量以及抗氧化物酶SOD、CAT和POD的活性。结果显示:特异性蛋白3β-HSD鉴定后,荧光显微镜观察到大部分细胞呈现特异性荧光。MTT测定结果显示,300~1 000μmol·L-1H2O2处理细胞均可极显著降低细胞活力(P0.01);300μmol·L-1H2O2处理可显著提高Leydig的凋亡率以及增加ROS含量(P0.05)和·OH含量(P0.01),但可显著降低线粒体膜电位(P0.05)。H2O2处理对Leydig细胞内SOD、CAT和POD的活性无显著影响(P0.05),但可显著提高细胞内MDA的含量(P0.05)。结论:300μmol·L-1H2O2处理Leydig细胞8 h可以诱导细胞氧化损伤从而建立体外模拟氧自由基诱导细胞氧化损伤模型。     

过氧化氢诱导原代大鼠睾丸间质细胞氧化损伤模型的建立

为了建立体外模拟氧自由基诱导的细胞氧化损伤模型,本试验采用Percoll密度梯度离心法纯化原代大鼠Leydig细胞,并鉴定特异性蛋白3β-HSD;采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位、ROS以及O·-2含量,比色法测定·OH、MDA的含量以及抗氧化物酶SOD、CAT和POD的活性。结果显示:特异性蛋白3β-HSD鉴定后,荧光显微镜观察到大部分细胞呈现特异性荧光。MTT测定结果显示,300~1 000μmol·L-1H2O2处理细胞均可极显著降低细胞活力(P0.01);300μmol·L-1H2O2处理可显著提高Leydig的凋亡率以及增加ROS含量(P0.05)和·OH含量(P0.01),但可显著降低线粒体膜电位(P0.05)。H2O2处理对Leydig细胞内SOD、CAT和POD的活性无显著影响(P0.05),但可显著提高细胞内MDA的含量(P0.05)。结论:300μmol·L-1H2O2处理Leydig细胞8 h可以诱导细胞氧化损伤从而建立体外模拟氧自由基诱导细胞氧化损伤模型。     

獐牙菜苦苷对H2O2诱导大鼠心肌细胞凋亡的保护作用

[目的]观察獐牙菜苦苷对氧化应激引起的大鼠心肌细胞凋亡的保护作用,初步探讨獐牙菜苦苷抗心肌细胞氧化应激的保护作用机制。[方法]用差速贴壁法培养SD乳鼠心肌细胞,检测不同给药组中SD乳鼠细胞心肌细胞存活率以及培养液中超氧化物岐化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量;用免疫细胞化学检测心肌细胞的相关凋亡蛋白bcl-2、Bax表达;用吖啶橙荧光染色检测细胞的凋亡情况。[结果]3种不同浓度獐牙菜苦苷均能提高心肌细胞存活率和细胞上清液中SOD含量,且能降低MDA含量,与H2O2刺激组比较有显著性差异（P〈0.05;P〈0.01）。[结论]獐牙菜苦苷对H2O2诱导损伤的心肌细胞有保护作用,其作用机制可能是通过影响氧化系统以及调控特异性蛋白来抑制心肌细胞凋亡。     

β淀粉样肽25-35对PC细胞p53和bcl-2基因表达的影响

目的：观察β淀粉样肽25-35（β-amyloidpeptide25-35,Aβ25-35)诱导PC12细胞凋亡和对p53及bcl-2基因表达的影响。方法：采用终浓度分别为0、5、10、20μmol／L Aβ25-35处理PC12细胞24h,用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变,DNA电泳观察梯状条带(DNA-Ladder),RT-PCR和Western blot检测p53和bcl-基因表达变化。结果：随着Aβ25-35剂量的增加,PC12细胞存活率降低,凋亡明显增加,p53基因表达增加,bcl-2基因表达降低。结论：Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡可能与上调p53基因,下调bcl-2基因有关。     

玫瑰花对β-淀粉样蛋白诱导PC12神经细胞毒性的抑制作用

[目的]研究玫瑰花提取物对β-淀粉样蛋白（Aβ25-35）诱导的损伤PC12细胞的保护作用。[方法]PC12细胞加入Aβ25-35共同孵育后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测PC12细胞活力,比色法检测细胞内丙二醛（MDA）含量,酶联免疫法检测细胞内Nf-κb水平。[结果]玫瑰花提取物对PC12无显著细胞毒性,可以显著抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞毒性。与模型组相比,添加玫瑰花乙酸乙酯萃取物的样品组能降低PC12细胞内MDA浓度和Nf-κb表达。[结论]玫瑰花提取物对β-淀粉样蛋白致PC12细胞损伤具有一定的抑制作用,其作用机理可能与降低Aβ25-35所致的PC12细胞内的氧化应激有关。     

不同β-胡萝卜素添加水平对荷斯坦种公牛精液品质和血清指标的影响

选取20头荷斯坦种公牛,单因子试验设计,随机分为4组,分别饲喂基础日粮（对照组）和β-胡萝卜素添加水平为25mg／kg、50mg／kg、100mg／kg的试验13粮（按日粮风干物质计）,试验期为6个月,观察不同β-胡萝卜素添加水平对种公牛精液品质和血清指标的影响。结果表明：①添加β-胡萝卜素可极显著地提高种公牛血清β-胡萝卜素含量（P〈0．01）,而血清和精清中睾酮的浓度随β-胡萝卜素添加水平的提高呈先上升后下降趋势。②日粮中添加50mg/kg β-胡萝卜素,种公牛的射精量和鲜精活力显著高于对照组（P〈0．05）,精液密度极显著高于对照组（P〈0．01）,但与100me／kg添加组间差异不显著（P〉0．05）;而冻后活力、畸形率和顶体完整率3项指标各组间均无显著差异（P〉0．05）。③不同β-胡萝卜素添加水平对荷斯坦种公牛血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）和总抗氧化能力（T-AOC）的影响极显著（P〈0．01）,而对血清过氧化氢酶（CAT）无显著影响（P〉0．05）。综合分析表明：种公牛日粮中β-胡萝卜素的适宜添加量为50mg／kg。     

二苯乙烯苷和三七总皂苷配伍对Aβ25-35致PC12细胞损伤影响的研究

目的 探讨二苯乙烯苷(TSG)和三七总皂苷(PNS)配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的影响。方法 PC12细胞采用Aβ25-35诱导建立阿尔茨海默病的损伤模型,被随机分成空白组、模型组、多奈哌齐组（10 μmol/L）、TSG（100 mmol/L）组、PNS组（50 mg/L）、TSG-PNS配伍组（TSG100 mmol/L+PNS50 mg/L)。取细胞上清液测各组的乙酰胆碱酯酶（AchE）及超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量。结果 与模型组比较,TSG组、PNS组、TSG-PNS配伍组可降低AchE活力、MDA含量及提高SOD活力(P<0.05)。且TSG-PNS配伍组的效应比TSG或PNS单用组效应更好(P<0.01)。结论 TSG和PNS配伍对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与胆碱能系统及氧化应激有关。     

棉花细胞质雄性不育花药的活性氧代谢

【目的】阐述棉花细胞质雄性不育花药的活性氧产生与清除的代谢规律。【方法】以棉花细胞质雄性不育系、保持系和杂种F1的不同发育时期花药为材料，分析3个活性氧指标（超氧阴离子、过氧化氢和丙二醛）和活性氧清除酶（超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶）的含量变化，比较3种材料的活性氧产生与清除的代谢状况差异。【结果】比较分析发现，在不育系败育初期的花药中，超氧阴离子（O2•–）、过氧化氢（H2O2）和丙二醛（MDA）3个对细胞有毒性的活性氧指标均高于保持系或杂种F1的花药，同时对活性氧具有清除作用的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）3个抗氧化酶活性也随着提高，表明败育初期花药的活性氧增加对抗氧化酶有诱导作用。但在败育盛期的不育花药中，一方面O2•–、H2O2和MDA含量极显著高，另一方面SOD、CAT、POD酶活性却极显著低，导致活性氧产生与清除失去平衡，这时花粉母细胞大量凋亡。在败育后的花药中，O2•–和H2O2含量与可育花药相近，但MDA含量仍持续提高，以及SOD、CAT、POD酶活性持续降低，表明雄性细胞凋亡后活性氧对花药仍有不利影响。【结论】花药O2•–、H2O2和MDA的过量积累，以及其清除酶活性的显著降低，这一过程在棉花不育花药中是与雄性细胞凋亡同步发生的，但在恢复基因引入后的杂种F1花药中，过量产生的活性氧可被清除。     

松针原花青素对小鼠血清中SOD活性、MDA含量及脏器指数的影响

[目的]探讨针原花青素在小鼠血清中的抗氧化作用,为进一步开发和利用松针原花青素提供可靠的试验依据。[方法]采用松针原花青素对小鼠进行灌胃,比较不同浓度的原花青素对小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量及脏器指数的影响。[结果]与空白对照组比较,试验组血清中的SOD活性明显上升（P〈0.05）,MDA含量明显下降（P〈0.05）,脏器指数没有明显变化。[结论]松针原花青素具有一定的抗氧化能力。     

高良姜不同成分对人肝癌HepG2细胞的抗氧化损伤活性

目的探讨高良姜二苯基庚烷类、黄酮类、挥发油类及高良姜醇提物（组分Ⅰ-Ⅳ）对人肝癌HepG2细胞过氧化损伤的保护作用。方法采用减压硅胶柱层析（VLC）法对高良姜提取物进行分离;采用薄层色谱法（TLC）结合高效液相-质谱联用（HPLC-MS）法对各组分进行归属与鉴定;建立H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤模型,采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡。结果组分Ⅰ和模型组的细胞存活率分别为71.9%、50.3%,两组的差异具有显著性（P〈0.05）;与模型组比较,组分Ⅰ和Ⅱ均可降低细胞凋亡率（P〈0.05）,其中组分Ⅰ更明显。结论高良姜组分Ⅰ和组分Ⅱ均有一定的抗氧化活性,其中组分Ⅰ更明显。     

复方茵芩制剂血清对小鼠体外肝细胞损伤的保护作用

采用H2O2建立小鼠原代肝细胞的体外损伤模型,小鼠灌胃含复方茵芩制剂药物血清后,检测不同时期肝细胞培养上清液天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、超氧化物岐化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量的变化来研究其对体外肝细胞损伤的保护作用.结果表明：与正常细胞组相比,模型组的SOD活性低于药物血清组（P〈0.01）;模型组的MDA含量高于药物血清组（P〈0.01）;与对照组相比,模型组的AST和ALT活性高（P〈0.01）,而药物血清组变化不明显.在损伤的肝细胞中添加药物血清的第3-7天,与模型组相比,药物血清组AST活性在第3-5天均较低（P〈0.01）,第6天差异不显著（P〉0.05）;ALT活性在第3-6天均较低（P〈0.01）.可见,含药的血清可减轻H2O2对肝细胞的损伤和破坏.     

鼠李糖乳酸杆菌对Caco-2细胞抗氧化功能的影响

 【目的】研究鼠李糖乳酸杆菌（Lactobacillus rhamnosus）对氧化应激状态下Caco-2细胞抗氧化功能的影响。【方法】将培养的Caco-2细胞分为4组：对照组和氧化应激组（在培养液中加入100 µmol•L-1 H2O2）,处理组Ⅰ和处理组Ⅱ在氧化应激条件下分别添加鼠李糖乳酸杆菌（约108 CFU•mL-1）和抗氧化剂特丁基对苯二酚（TBHQ） （2.75 µg•mL-1）各1 mL。Caco-2细胞培养至12和48 h时分别测定其上清液和裂解液的抗氧化活性。【结果】添加鼠李糖乳酸杆菌减轻了Caco-2细胞氧化受损,使细胞培养上清中的总抗氧化力（T-AOC）显著高于氧化应激组：12 h时显著提高了细胞培养上清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）（P＜0.01）、过氧化氢酶（CAT）（P＜0.01）活力以及细胞裂解液中超氧化物酶（SOD）活力（P＜0.01）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量（P＜0.05）,48 h时显著提高了细胞培养上清液抗O2- (ASAFR) （P＜0.01）、GSH-Px（P＜0.01）、CAT（P＜0.01）、SOD活力（P＜0.01）和细胞裂解液中过氧化物酶（POD）活力（P＜0.01）,丙二醛（MDA）含量显著降低（P＜0.01）。添加TBHQ组12 h时细胞上清中T-AOC（P＜0.01）和CAT活性（P＜0.01）及细胞裂解液中GSH含量（P＜0.01）显著高于氧化应激组,而处理48 h后相应指标低于氧化应激组;此时,细胞培养上清液中MDA含量极显著降低（P＜0.01）,抗O2-、SOD、GSH-Px、POD活力和细胞裂解液中POD活力显著升高（P＜0.05）。【结论】在体外条件下,鼠李糖乳酸杆菌可以提高氧化应激状态下Caco-2细胞的抗氧化功能。     

两种除草剂胁迫对皇冠草生理特性的影响

本文以沉水植物皇冠草为试验材料,研究了两种除草剂（乙草胺、氯嘧磺隆）胁迫对皇冠草的丙二醛（MDA）含量、超氧化物阴离子（O2-）﹑过氧化氢（H2O2）含量﹑超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)及过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果表明：MDA、O2-、H2O2、SOD、POD、CAT活性随胁迫浓度的增加而增加;乙草胺胁迫下的各项生理指标峰值都高于氯嘧磺隆。     

磷脂酰肌醇3-磷酸对UV-B诱导蚕豆保卫细胞中过氧化氢产生和气孔关闭的影响

【目的】研究磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）催化产物磷脂酰肌醇3-磷酸（PI3P）对紫外线B（UV-B）诱导保卫细胞中过氧化氢（H2O2）产生和气孔关闭的影响,为进一步阐明植物细胞转导UV-B辐射信号的机制提供依据。【方法】以蚕豆（Vicia faba L.）表皮条为材料,采用PI3K的抑制剂沃曼青霉素（WM）和LY294002（LY）来抑制PI3P的形成,采用二苯基碘（DPI）和水杨基氧肟酸（SHAM）分别抑制H2O2形成的NADPH氧化酶途径和细胞壁过氧化物酶途径,通过气孔开度分析和激光扫描共聚焦显微镜技术,确定PI3P在0.8 W•m-2 UV-B辐射诱导蚕豆保卫细胞H2O2产生和气孔关闭中的作用。【结果】WM和LY能显著抑制UV-B诱导的保卫细胞H2O2产生和气孔关闭;外源H2O2处理能显著逆转WM和LY对UV-B诱导气孔关闭的抑制效应,但WM和LY不能抑制外源H2O2诱导的气孔关闭;UV-B诱导的保卫细胞H2O2产生和气孔关闭能被活性氧清除剂和SHAM显著抑制,但不能被DPI抑制。【结论】PI3P通过诱导蚕豆保卫细胞中产生于过氧化物酶途径的H2O2形成来介导UV-B辐射诱导的气孔关闭。     

日粮中添加大豆异黄酮对大鼠抗热应激能力的影响

日粮中添加大豆异黄酮,研究其对大鼠抗热应激能力的影响。将30只断乳雄性SD大鼠分为对照组（I）、热应激组（Ⅱ）和热应激＋大豆异黄酮组（Ⅲ）。结果表明,Ⅲ组较I、Ⅱ组平均增重、采食量稍有提高,料重比略有下降。Ⅱ组与I组相比,大鼠GSH—PX活性下降15．40％（P〈0．01）,MDA、血糖含量略有上升,尿素氮含量略有下降;Ⅲ组与I组相比,大鼠GSH—PX活性下降10．10％（P〈0．01）,MDA含量下降42．08％（P〈0．01）,尿素氮含量下降15．51％（P〈0．05）,血糖含量有上升趋势;UI组与Ⅱ组相比,MDA含量下降43．57％（P〈0．01）,尿素氮含量下降13．62％（P〈0．05）,GSH—PX活性、血糖含量略有上升。结果提示：大豆异黄酮可以增强大鼠抗热应激能力。     

仙人掌提取物对糖尿病小鼠血糖和氧化应激的影响

目的：观察仙人掌提取物对糖尿病小鼠血糖和氧化应激的影响。以探讨其对糖尿病的治疗机制。方法：小鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）溶液150mg／kg建立小鼠糖尿病模型。将小鼠分成4组：正常对照组、模型对照组、仙人掌小剂量组、仙人掌大剂量组。灌胃给予仙人掌提取物1．0g／kg和2．0g／kg，连续4周。实验前、第2周、第4周测空腹血糖；末次给药后2h，断头取血和肝脏组织，分别检测血清和肝脏超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA），同时测定血清总抗氧化能力（T-AOC）。结果：①空腹血糖：给予仙人掌提取物2周后，大剂量组小鼠血糖明显低于模型对照组（P〈0．05），4周后，大、小剂量治疗组均明显低于模型对照组（P〈0．05，P〈0．01）。②SOD、MDA和T-AOC变化：与高血糖模型对照组相比，大、小剂量治疗组血清和肝脏中SOD活力明显上升（P〈0．01），MDA含量均显著降低（P〈0．05，P〈0．01）。血清T-AOC增强（P〈0．01）。结论：仙人掌提取物能明显降低糖尿病小鼠血糖，且能降低糖尿病小鼠氧化应激水平。     

高胆红素血症新生儿血、尿β2－微球蛋白水平的测定及其临床意义

目的探讨高胆红素血症新生儿血、尿β2-微球蛋白（β2-MG）N定的临床意义。方法对94例新生儿高胆红素血症患儿（观察组）及30例足月健康新生儿（对照组）进行血和尿β2-MG测定。结果观察组中不同程度高胆红素血症患儿的血、尿β2－MG直随胆红素水平的升高而升高（P〈0．01）;血胆红素水平与血、尿β2-MG值呈直线正相关（r=0．63、0．57,P均〈0．01）。结论测定血、尿β2-MG可早期判断高胆红素血症对肾脏的损害程度,对新生儿高胆红素血症应积极干预,同时要避免使用肾毒性药物。     

生长激素对上海白猪生长性能和胴体品质的影响

选择日龄接近，体重在45-50kg上海白猪去势公猪30头，随机分为3组，每组各10头。对照组仅注射载体（稀释液）1ml，试验1组和试验2组分别注射1ml和2ml的rpST（基因工程猪生长激素），连续注射28d后屠宰。试验结果显示，试验组1与试验组2平均增重速度比对照组分别提高31．94％（P〈0．01）和45．75％（P〈0．01）。料肉比分别降低20．81％（P〈0．01）和26．85％（P〈0．01），脂肉比降低24．07％（P〈0．01）和33．33％（P〈0．01）。瘦肉率增加3％和5％。骨重增加21．40％（P〈0．01）和10．2％（P〈0．01）。     

超声照射对人胚肾细胞凋亡的影响

目的了解诊断超声照射对体外培养的人胚肾（HEK-293）细胞凋亡的影响。方法 HEK-293细胞用腹部超声探头（3.5 MHz、MI 0.8）照射0、10、20、30 min,再作Hoechst 33258染色,观察细胞凋亡的变化。结果超声照射10 min后,细胞凋亡率与假照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;超声照射20 min后,细胞凋亡率明显高于假照组（P〈0.05）,其中以照射30 min较为显著（P〈0.01）。结论特定剂量的超声照射可诱导人胚肾细胞凋亡增加。