伊维菌素 酸微球的研制及其体外释药试验

以生物可降解材料聚乳酸为载体,用乳化溶剂挥发法制备含伊维菌素的聚乳酸微球,采用Ｌ１８（３＾７）正交设计,以微球粒径分布为主要优选指标,筛选出最佳制备条件。     

贝尼尔聚乳酸微球的制备及体外药物释放

以生物可降解材料聚乳酸（PLA）为载体,用溶剂挥发法的原理制备含贝尼尔（Diminazene Acetrras）的聚乳酸微球。制得的微球平均粒径为（74.82±3.78）μm;贝尼尔含量为（35.53±1.6233）％;微球的收得率为（70.86±4.414）％,贝尼尔的利用率为（50.26±2.1535）％;平均回收率为99.751±1.0917;利用转蓝法研究了微球的体外释药规律,贝尼尔原料药达峰时间为2h,贝尼尔聚乳酸微球的累积释放率在12h时为46.67％,微球无明显突释现象,可缓慢地释药。     

贝尼尔聚乳酸微球的体外释药研究

试验就贝尼尔聚乳酸微球的体外释药进行了研究，分别考察了相对分子质量不同的聚乳酸、贝尼尔聚乳酸微球中的药物含量不同对体外释药的影响。结果表明：高相对分子质量的聚乳酸微球中的药物释药速度明显慢于低相对分子质量的聚乳酸微球；贝尼尔聚乳酸微球中的药物含量越高，体外释药速度越快。通过体外释药试验的结果可以看出贝尼尔聚乳酸微球具有明显的缓释作用。     

伊维菌素聚酯酸酐微球的制备

将2种聚酯酸酐（P（SA：RA20：80）,P（SA：RA30：70））分别与伊维菌素溶于三氯甲烷中作为有机相,以聚乙烯醇水溶液为水相,用乳化溶剂挥发法制备出2种伊维菌素聚酯酸酐微球。采用光学显微镜考察所制备微球的形态及粒径,紫外分光光度法测定载药量和包封率。结果显示,制备出的P（SA：RA30：70）／IVM微球的平均粒径为（72．240±24．747）μm,载药量为19．67％,包封率为87．70％。P（SA：RA20：80）/IVM微球的平均粒径为（64．18±26．14）μm,载药量为17．72％,包封率为87．27％。这表明采用乳化溶剂挥发法成功制备出2种伊维菌紊聚酯酸酐微球。     

恩诺沙星分子印迹聚合物的制备及表征

为了制备恩诺沙星分子印迹聚合物,以恩诺沙星（ENRO）为模板分子,甲基丙烯酸（MAA）为功能单体,采用沉淀聚合法合成了ENRO分子印迹聚合物（MIPs）纳米微球,优化了模板与功能单体的比例、溶剂种类及溶剂用量,并对MIPs进行了表征。结果表明,MIPs微球粒径（190—290nm）大于非印迹聚合物（NIPs）微球粒径;同时Scatchard分析表明,在研究的浓度范围内MIPs存在两个不同的结合位点,其离解平衡常数Kd-0最大表观结合量Qmax分别为Kd1=0．2313g／L,Qmax1=34．7540mg／g,Kd2=0．5841g／L,Qmax2=57．4298mg／g;与环丙沙星和氧氟沙星相比,MIPs对ENRO表现出更强的特异性吸附能力。     

玉米醇溶蛋白微球制备条件的探索以及体外释药行为研究

以玉米醇溶蛋白（zein）为原料，采用相分离法制备微球，探讨了乙醇的浓度，zein的浓度以及第二溶剂（水）加入的速度对蛋白微球大小的影响；采用压片方法获得了包被模型药物（伊维茵素IVM）的蛋白微球片剂，研究了该微球片剂的体外释放动力学以及释放后微球结构的变化。结果表明：微球粒径大小与乙醇及玉米醇溶蛋白的最终浓度、第二溶剂的加入速度有关。迅速加入第二溶剂才能获得粒径比较均匀的蛋白微球；乙醇的最终浓度在40％时可以获得粒径1μm左右的微球；微球的大小随着zein的最终浓度的增加而增大。该蛋白微球新剂型改善了载药微球悬浮液的稳定性。抑制了释药初期的突释现象。     

载副猪嗜血杆菌PLGA Omp16蛋白微球的制备及其免疫效果的初步研究

为研究载副猪嗜血杆菌(H. parasuis)外膜蛋白Omp16 PLGA微球的生物学特性,本研究以H. parasuis外膜蛋白Omp16为芯材,聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为壁材,通过复乳溶剂挥发法制备PLGA微球疫苗。通过扫描电镜测定微球的形态、激光粒径仪测定微球的粒径分布。结果显示,PLGA微球呈球性,表面圆整,粒径分布较窄,平均粒径为5.2μm;采用BCA法测定微球的包封率和载药率,结果显示,微球的包封率为70.5%,载药率为5.78%;以透析释药法测定微球的体外释放特性,结果显示,微球体外释放42 d累计释放抗原95.3%。用该微球0.2 mg/次,免疫小鼠二次(间隔14 d)后,采用ELISA法测定小鼠抗H. parasuis IgG水平,结果显示,微球佐剂组小鼠H. parasuis IgG抗体水平显著高于灭活疫苗组(p0.01);腹腔注射H. parasuis LY02株(血清5型)进行攻毒保护试验,结果显示,微球佐剂组小鼠攻毒保护率(81.8%)显著高于灭活疫苗组(63.6%)(p0.05)。以上试验结果表明,制备的PLGA微球具有良好的缓释性能,能增强小鼠体液免疫应答,提高H. parasuis攻毒保护率。本研究为H. parasuis亚单位微球疫苗的制备奠定基础。     

蟾酥总内酯聚乳酸微球的制备、缓释性能及其临床药效评价

为获得具有缓释性能的蟾酥总内酯微球,以75%乙醇及二氯甲烷提取蟾酥粉,获得蟾酥总内酯;以聚乳酸(PLA)为包材,采用乳化-溶剂挥发法制备了蟾酥总内酯PLA微球。以扫描电子显微镜观察微球的形貌及颗粒大小,采用分光光度法测定该微球的包封率及载药量,采用动态透析法考察该微球的体外药物释放过程。采用高效液相色谱-质谱/质谱分析方法,获得了蟾酥总内酯溶液剂及PLA微球皮下注射大鼠后蟾毒灵的药代动力学参数。采用蟾酥总内酯PLA微球分别与泰乐菌素及氟苯尼考配伍,肌肉注射治疗临床猪喘气病,考察微球的协同疗效。结果显示,蟾酥总内酯在蟾酥中的含量为30.1%;制得的蟾酥总内酯PLA微球呈完整的圆球型,大部分微球粒径在1~10μm,微球平均载药量为23.4%,平均包封率为31.5%。在体外微球中蟾酥总内酯24 h释放30%,10 d释放67%,具有明显的药物缓释效果。大鼠皮下注射蟾酥总内酯PLA微球后,蟾毒灵的达峰时间(T_(max))、消除半衰期(t_(1/2))和平均滞留时间(MRT)分别是皮下注射蟾酥总内酯溶液剂的4.0,18.5,2.5倍,微球给药后蟾毒灵的血浆峰浓度值只有溶液剂的23.9%,表明PLA微球具有明显的药物缓释效果,可延长药效作用时间并减少药物毒性。蟾酥总内酯PLA微球与泰乐菌素及氟苯尼考联用治疗临床猪喘气病具有良好的协同作用。     

黄体酮聚乳酸微球制备及其体外释药特性研究

本试验旨在制备黄体酮聚乳酸微球,并考察其体外释药性能。以包封率、载药量为主要评价指标,考察制备黄体酮微球的主要影响因素,筛选出最佳工艺条件。扫描电子显微镜观察微球形态,紫外—可见分光光度法测定微球的包封率、载药量和体外释药特性。最佳工艺所制备的微球光滑、圆整、均匀、分散性好,包封率为(80.60±1.00)%,载药量为(10.63±0.05)%,在7 d内累积释药率达53.41%。制备微球包封率和载药量高,具有明显的缓释效果,能有效地延长药物作用时间。     

球敌的急性毒性（LD50）测定

用简化寇氏法对球敌(Diclazuril)的LD50进行了测定。以1：0．8的组间剂量比测得球敌对小鼠和雏鸡口服的LD50分别为5746mg／kg和6088mg／kg，95％可信限分别为6525～5061mg／kg和6894～5374mg／kg，符合微毒(实际无毒)标准。     

球敌的急性毒性（LD50）测定

用简化寇氏法对球敌的ＬＤ５０进行了测定。以１：０．８的组间剂量比测得球敌对小鼠和雏鸡口服的ＬＤ５０分别为５ ７４６ｍｇ／ｋｇ和６ ０８８ｍｇ／ｋｇ，９５％可信限分别为６ ５２５～５ ０６１ｍｇ／ｋｇ和６ ８９４～５ ３７４ｍｇ／ｋｇ，符合微毒（实际无毒）标准。     

表面富含环氧基团的单分散P(St-GMA)共聚物微球的制备

以苯乙烯和甲基丙烯酸缩水甘油酯为共聚单体,用分散共聚方法合成了聚(St-GMA)微球.通过扫描电镜(SEM)对P(St-GMA)微球的表面形貌进行了表征,并讨论了溶剂条件对微球粒径的影响.     

伊维菌素聚酯酸酐微球的制备

将2种聚酯酸酐(P(SA∶RA 20∶80),P(SA∶RA 30∶70))分别与伊维菌素溶于三氯甲烷中作为有机相,以聚乙烯醇水溶液为水相,用乳化溶剂挥发法制备出2种伊维菌素聚酯酸酐微球。采用光学显微镜考察所制备微球的形态及粒径,紫外分光光度法测定载药量和包封率。结果显示,制备出的P(SA∶RA 30∶70)/IVM微球的平均粒径为(72.240±24.747)μm,载药量为19.67%,包封率为87.70%。P(SA∶RA 20∶80)/IVM微球的平均粒径为(64.18±26.14)μm,载药量为17.72%,包封率为87.27%。这表明采用乳化溶剂挥发法成功制备出2种伊维菌素聚酯酸酐微球。     

流式细胞仪测定奶牛全血多形核白细胞的吞噬功能和呼吸爆发作用

试验建立了用流式细胞仪同时测定奶牛全血中多形核白细胞（PMN）吞噬功能和呼吸爆发作用的微量检测方法。奶牛全血用二氢诺丹明处理后，与直径为1．75μm的蓝色荧光乳胶微球培养，PMN内的二氢诺丹明被呼吸爆发过程中产生的还原性物质转化成发绿色荧光的诺丹明（ROD）。用流式细胞仪计数PMN，仪器可在数秒钟内计数几十万个PMN，识别PMN是否吞噬蓝色荧光微球和／或含POD，并可检测每个PMN所吞噬的微球数量。当血液中含细胞松弛素B为1、2．5、5mg/L时，PMN的吞噬功能和呼吸爆发作用均下降。     

苯巴比妥分子印迹体系模拟与吸附性能研究

采用量子化学密度泛函理论（DEF）的M062X／6—31g（d,p）方法,模拟苯巴比妥（PHN）与甲基丙烯酸（MAA）功能单体的相互作用,讨论60℃乙腈溶剂中PHN-9MAA在不同反应比例下的氢键键合情况,确定PHN与MAA的最佳反应比例为1：6,并利用吸附性实验进行了验证。然后,采用沉淀聚合法制备反应比例为1：6的苯比妥分子印迹聚合物（PHN—MIPs）,并对PHN—MIPs微球形貌、静态与动态吸附性能等进行分析。结果表明,PHN—MIPs为微球形状,分散性良好,粒径在180～360nm间;PHN—MIPs的最大饱和吸附量为8．2mg／g,非印迹聚合物（NIPs）的最大饱和吸附量为3．5mg／g。     

免疫诊断用羧化聚苯乙烯载体微球的制备

采用“无化乳剂”乳液聚合法合成了表面“清洁”的聚苯乙烯－丙烯酸胶乳微球，并对影响微球粒径、单体转化率的诸因素进行了探讨。结果表明：所合成的胶乳微球呈圆球状，粒径大小可控制在０．１～０．６μｍ范围内，且单分散性良好。调节单体的含量和亲疏水性可控制微球粒径和表面性能。将此微球分别与血清抗原共价偶联，其抗原效价高于有乳化剂的胶乳微球，这表明免疫化的无乳化剂微球具有良好的生物特异性。     

SiO2胶体微球在蚕丝织物上的重力沉降自组装条件研究

通过结构生色(物理生色)替代化学染料染色是织物染色研究的一个重要方向。以单分散SiO_2胶体微球作为自组装结构单元,在蚕丝织物上构建能生成结构色的SiO_2光子晶体,研究相对湿度、自组装温度、胶体微球浓度、组装溶剂以及组装时间对胶体微球在蚕丝织物上的自组装效果的影响,并应用扫描电子显微镜和紫外-可见分光光度计表征与分析蚕丝织物上光子晶体结构形貌和结构色变化。结果表明:在相对湿度60%、温度25℃、胶体微球质量分数(wt)为2.0%左右、以纯水或纯乙醇为组装溶剂的自组装条件下,SiO_2胶体微球可以在蚕丝织物上构建三维有序的SiO_2光子晶体结构,赋予蚕丝织物鲜艳均匀的结构色。     

堆型艾美耳球虫3-1E重组质粒微球的制备及体外释放试验

用聚乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）将鸡堆型艾美耳球虫重组表达质粒pcDNA3.1-3-1E包封,采用水包油包水（W/O/W）双重乳化方法制备pcDNA3-3-1E/PLGA微球。通过正交试验设计优化PLGA微球制备工艺,考察PLGA浓度、聚乙烯醇（PVA）浓度、超声功率、复乳搅拌时间对评价指标（即微球粒径大小、包封率、载药量）的影响,确定制备微球的最佳工艺条件。测定微球的形态、粒径、完整性、质粒DNA包封率、载药量和释放程度;进行体外模拟鸡胃液和肠液试验,观察微球体外释药效果。结果显示,当PLGA浓度为8%、PVA浓度为1.5%、超声功率为60W、复乳搅拌6h为微球制备的最佳工艺参数,在光镜下呈散在圆形,粒径小于12μm。微球的包封率、载药量分别为84.25%和4.46%,裸质粒与微球中质粒超螺旋比例差距不显著,这表明在包被过程中的超螺旋质粒未发生明显的降解。在模拟鸡的胃肠液累积释放试验中,它的累积释放能力依次为pH 3.0〉pH 7.4,载药微球在模拟鸡的胃肠液中24h释放26.8%,模拟肠液中24h释放11.2%,30d时体外累积释放率为81.7%,表明微球具有一定的缓释效果。     

聚乳酸/乳酸乙醇酸共聚物微球的研究进展

聚乳酸及其共聚物是一类可生物降解的高分子聚合材料,通过其自身降解来调节药物释放,具有良好的生物相容性。本文对微球的制备方法、释药机理、研究进展进行了概述。     

免疫微球反向凝集试验检测亲城疫病毒抗原的研究

以苯乙烯为单体，合成带有功能基的羧化聚苯乙烯微球作栽体，通过化学交联剂碳化二亚胺反应把纯化的抗体联接到微球载体上，制备成新城疫免疫微示诊断血清。对41例人工发病鸡的检测。40／41被栓出，符合率为97.5％，具有较高的敏感性、特异性和稳定性，且方法简单易行，快速准确，适用于现场检疫。