鸡减蛋综合症——新城疫二联苗的研制与应用

用减蛋综合症（ＥＤＳ‘７６）ＡＶ－１２７和新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ毒株，分别接鸭胚和鸡胚，收获尿囊液，福尔马林灭活，用白油佐剂乳化成二联灭活疫苗。本苗接种产量鸡后１４天产生ＮＤ和ＥＤＳ’７６抗体，１个月持续升高，而ＮＤＨＩ抗体产生时间略早。二联苗物单苗有相同的免疫效果，两者无干扰性，免疫剂量以０．５ｍｌ／只为宜。接种后９个月ＨＩ抗体仍维持在较高水平，并能经受强毒的入击，疫苗在４－８℃条件下贮存１     

鸡新城疫和减蛋综合症异源二联油乳剂灭活疫苗的研制

将鸭源鸡新城疫（ＮＤ）病毒Ｄ１０株和鸡减蛋综合症（ＥＤＳ－７６）病毒ＧＣ２株同时接种于同一鸭胚内复制，增殖 ９６ ｈ收取尿囊液，用甲醛灭活后加白油佐剂制成 ＮＤ和 ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗。简化了生产工艺、降低了制苗成本。经试用表明，该疫苗可有效地预防ＮＤ和ＥＤＳ－７６的发生。     

新城疫病毒和减蛋综合征病毒同鸭胚增殖的研究

鸭源新城疫病毒（ＮＤＶ－Ｄ１０）和减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）可以在鸭胚中同时良好增殖，两种病毒的血凝价分别与单独接种时一致；同胚增殖病毒对鸭胚或ＳＰＦ鸡胚的感染能力和致病性分别与单独接种组无显著差异；利用同鸭胚增殖病毒的尿囊液制备的二联油乳剂灭活疫苗接种免疫鸡可以分别抵抗ＤＮＶ强毒和ＥＤＳＶ强毒的攻击。     

鸭源新城疫病毒和减蛋综合征病毒在同一鸭胚中增殖的观察

用鸭源新城疫病毒（ＮＤ）Ｄ１０株和减蛋综合征（ＥＤＳ—７６）病毒ＧＣ２株同时在同一鸭胚中复制增殖．结果表明：（１）两种病毒同时感染同一鸭胚后，鸭胚平均死亡时间（ＭＤＴ）７３．６ｈ，死亡率８８．２％（１５／１７）．胚体皮肤出血、淤血，绒毛尿囊膜水肿、增厚，尿囊液能凝集人和鸡红细胞．（２）尿囊液感染鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞，致细胞病变（ＣＰＥ），证实尿囊液中存在ＮＤＶ．用间接法Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ—７６病毒抗原，结果为阳性．（３）电镜观察经提纯浓缩后的尿囊液，可见到两种病毒粒子：ＮＤＶ形态不一，多数直径约１２０～１３０ｎｍ或更大．有囊膜；ＥＤＳ—７６病毒呈圆形，直径约７０ｎｍ，有囊膜．（４）用血凝试验（ＨＡ）测定两种病毒．其生长规律与单独接种时一致．（５）接种灭活的含毒尿囊液的雏鸡，在血清中出现抗两种病毒的ＨＩ抗体及抗ＥＤＳ－７６病毒的中和抗体，对ＮＤＶ强毒攻击有坚强的免疫力。     

减蛋综合征油佐剂灭活疫苗的研制

减蛋综合征（ＥＤＳ）病毒南京毒株（ＮＥ４）在鸭胚中增殖后，用甲醛灭活，加入７号白油，制成ＥＤＳ油佐剂灭活疫苗，抗原量为每头份５０００血凝（ＨＡ）单位。经１２００万只鸡的试用表明，该苗能够有效地预防ＥＤＳ的发生。     

鸡新城疫、产蛋下降综合症病毒血凝抑制试验抗原的研制

新城疫病毒（ＮＤＶ）鸡胚尿囊液和产蛋下降综合症病毒（ＥＤＳＶ）鸭胚尿囊液在不同保护剂和保存条件下血凝（ＨＡ）试验结果表明，以１０％甘油做保护剂制备的抗原，在－１８℃、４～８℃和常温条件下可保存一年，其ＨＡ效价稳定。抗原制备方法简单，成本低廉，适合基层生产单位使用。     

ND-EDS-76异源二联油苗田间试验研究

鸭源ＮＤＶ－Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２每株混合接种同一鸭胚，培养９６ ｈ收集尿囊液，制成ＮＤ－ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗，然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群，在 １０，２０，３０，１８０，３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较，结果差异不显著。在免疫后 ３０，１８０，３６０ ｄ随机取鸡各 ６０只为 １组，用 ＮＤＶ－Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较，结果表明两种疫苗在 ３０，１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％，３６０ ｄ对ＮＤ和ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２％和８７％以上．对临床２００万只开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ－ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗，可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６强毒的攻击。     

鸡新城疫马立克氏病二联冻干苗的研究：I.生产工艺

用引进标准的鸡新城Ｌａｓｏｔａ系弱毒和鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒，分别接种鸡胚组织细胞，在恒温条件下培养，按科学方法收毒制成原苗，再将原苗配制成新城疫Ｌａｓｏｔａ系弱毒单苗和鸡马立克氏病弱毒单苗以及鸡新城疫（ＮＤ）尿囊液和鸡马立克氏病（ＭＤ）细胞二联苗和ＮＤ、ＭＤ细胞二联苗，将二联苗、单苗冻干，生产出符合标准的冻干苗。共生产出：ＮＤ尿囊液单菌１００瓶（１万羽份）；ＮＤ细胞单苗１００瓶（１万羽份）；Ｍ     

ND—EDS-76异源二联油乳剂疫苗与普通二联疫苗田间对比试验研究

鸭源ＮＤＶ—Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２毒株混合接种同一鸭胚,培养 ９６ ｈ后收集尿囊液,制成ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗。然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群,在 １０ ｄ、２０ ｄ、３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较,结果差异不显著。在免疫后３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ,随机取鸡各 ６０只为一组,用 ＮＤＶ—Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较,结果两种疫苗在 ３０ ｄ、１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％,３６０ ｄ对 ＮＤ和 ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２ ％和８７ ％以上,差异不显著。对开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗,可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６自然强毒的攻击,是一种理想的生物防疫制剂。     

鸡减蛋综合症病毒（EDS—76）的分离与鉴定

采取新疆五家渠某鸡场发病鸡病料，接种鸭胚，分离病毒，病料在鸭胚中盲传至第５代，鸭胚尿囊液ＨＡ效价达２１７，ＨＡ可被ＥＤＳ－７６标准阳性血清抑制。免疫电镜观察到了病毒颗粒，表明该病是由ＥＤＳ－７６病毒所致     

鸽新城疫油佐剂灭活苗的研制与应用

利用当地分离的鸽新城疫病毒研制出鸽新城疫油佐剂灭活苗,疫苗接种试验鸽无不良反应,实验室小批试验免疫后20 d抗体水平达到高峰,强毒攻击的保护率为100;,抗体水平在5 log2以上可维持120 d以上,表明初步研制的鸽新城疫病毒油佐剂灭活苗可使鸽产生较高水平的抗体,有较长的免疫持续期.为保证疫苗免疫持续期达到6个月以上和油佐剂灭活苗的稳定性,工厂化生产中增加了疫苗中的抗原含量,同时改进了制苗工艺.35日龄的童鸽,按照传统习惯在断乳后仅免疫一次,鸽群免疫后180 d抗体水平仍然在7 log2以上.大量的田间试用,效果理想,对鸽新城疫的防制起到了免疫预防的作用.     

鸡大肠杆菌多价灭活菌苗的研制和应用

从大肠杆菌血清型为O78标准株及O78、O119的34个地方分离株中筛选出3个强毒菌株,作为制苗基础菌株,并加入发病鸡场的自家分离株,一起作为制苗菌种。于酵母肉汤中培养18~24 h。甲醛灭活后,制成鸡大肠杆菌多价自家灭活铝胶苗。试验表明,该苗接种雏鸡0.5 ml,成鸡1 ml,无毒副作用;鸡只免疫后,对同型菌株近期攻毒后的保护率为100%;鸡只免疫后12周,血清中抗体平均凝集价为1∶33.6,高于免疫临界线1∶16,并且鸡群健康状况稳定,增重加快,饲料利用率和产蛋率增加。     

猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂的筛选

为筛选猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂,将5种佐剂(聚合物佐剂、矿物油佐剂ISA 201 VG、蜂胶佐剂、弗氏佐剂、铝胶佐剂)分别与3株猪丹毒丝菌株(AEr21、AEr31和AEr32)制备成15种灭活疫苗,经物理性状检验、无菌检验、安全检验合格后分别免疫小鼠,应用ELISA方法检测小鼠血清中IgG抗体水平和细胞因子含量(IL-4、IL-10、TNF-β、IFN-γ、MCP-1)。通过腹腔注射和灌胃2种方式对免疫后小鼠进行攻毒,计算免疫保护率。结果显示,5种佐剂与3株猪丹毒丝菌株制备的灭活疫苗均可刺激小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫,矿物油佐剂ISA 201 VG疫苗免疫组诱导小鼠产生的IgG抗体水平和细胞因子含量最高,与铝胶佐剂、弗氏佐剂疫苗免疫组差异显著(P<0.05),与聚合物佐剂、蜂胶佐剂疫苗免疫组差异不显著(P>0.05);矿物油佐剂ISA 201 VG疫苗免疫组在攻毒后的免疫保护率最高,对腹腔注射和灌胃攻毒小鼠的免疫保护率分别为80%、80%、60%和100%、100%、80%。试验结果表明,矿物油佐剂ISA 201 VG可作为猪丹毒丝菌灭活疫苗制备的候选免疫佐剂。     

仔猪水肿病多价油乳剂灭活菌苗在猪体内的免疫原性研究

用自制的仔猪水肿病多价油乳剂灭活菌苗肌肉注射20日龄未接种同类疫苗的长杂健康仔猪，14d后用攻毒菌株（湖北地方分离株及O138、O139、O1413个菌株）攻毒。结果表明每头免疫剂量为0.50mL(含30亿CFU）免疫效果最好，免疫2周后血清抗体几何凝集效价为1:640，保护率达到100%。     

中雏和大雏感染传染性法氏囊病后对新城疫疫苗免疫效应的影响

本项工作对人工感染传染性法氏囊病毒(IBDV)的中雏和大雏接种新城疫(ND)疫苗后的免疫机能变化进行了研究。结果表明,人工感染 IBDV 的雏和大雏接种 ND 疫苗后,其血清 HI 抗体滴度低于对照鸡;其血清 IgG 和 IgM含量的增高程度不如对照鸡明显;但对 NDV 攻击仍有很高的免疫保护力。     

不同基因型NDV灭活油乳苗与La Sota株灭活油乳苗的免疫效果比较

用地方分离的基因Ⅵ型和Ⅶ型代表株 (LD - 3- 0 0株和LD - 7- 0 2株 )配以传统的LaSota株所制备的灭活油乳苗与LaSota株单价灭活油乳苗进行的免疫效果比较显示 :前者在接种后各个时期所产生的HI抗体效价与LaSota株灭活苗免疫鸡所产生的HI抗体效价无明显差异 ,至接种后第 4 2天两者均具有 7.3log2 的HI效价。在对具有不同HI抗体水平的试验鸡进行的攻毒试验中 ,对F4 8E9标准强毒株的攻击 ,无论是LaSota株疫苗免疫鸡 ,还是不同基因型灭活苗免疫鸡 ,在HI抗体效价为 6log2 以上时均能 10 0 %地被保护 ;但对不同基因型野毒株的攻击 ,尤其是基因Ⅶ型野毒株的攻击 ,2种疫苗则呈现出明显的差异。在LaSota株疫苗免疫鸡HI效价为 6log2 时 ,对不同基因Ⅶ型野毒株的攻击 ,保护率只有 0～ 2 0 % ;而具有 6log2 效价的不同基因型疫苗免疫鸡则对不同基因Ⅶ型野毒株的攻击具有 6 0 %～ 70 %的保护率 ;当HI效价达 8log2 左右时 ,LaSota株疫苗免疫鸡对基因Ⅶ型野毒株的攻击也只有 80 %的保护率 ,而不同基因型疫苗免疫鸡已能 10 0 %地被保护 ;LaSota株疫苗免疫鸡只有在HI效价在 9log2 以上时 ,方可 10 0 %地抵抗基因Ⅶ型野毒株的攻击。     

高致病性蓝耳病纯化灭活疫苗的研制(英文)

[目的]改进和提高现行高致病性蓝耳病(HR-PRRS)灭活疫苗的纯度和效价。[方法]该研究将经Marc-145细胞培养收获的HP-PRRS病毒原液超滤浓缩50倍,灭活后用Sepharose 4 Fast Flow分子筛柱层析,收集完整的病毒粒子,加油佐剂制成纯化HP-PRRS灭活疫苗。[结果]通过纯化可将HP-PRRS病毒与非病毒蛋白分开,纯化后测定病毒蛋白含量收率为76.7%~82.4%,杂蛋白含量去除率均为96%以上,且纯化疫苗的攻毒保护率达到4/5以上,血清抗体检测阳转率达86%以上,均高于未纯化灭活疫苗,差异显著。[结论]HR-PRRS病毒液经浓缩纯化制成疫苗后,增强了免疫效果,并可有效地去除杂蛋白,避免了疫苗的过敏反应和应激反应。     

新型鸭呼肠孤病毒病浓缩灭活疫苗的制备及免疫原性分析

为研制高效的新型鸭呼肠孤病毒病(NDRV)灭活疫苗,分别采用病毒尿囊液和浓缩后病毒尿囊液为抗原,经甲醛灭活处理后与常规油佐剂制成灭活疫苗,并进行种鸭免疫后血清学检测、雏鸭免疫保护及安全试验。结果表明,浓缩疫苗安全性好,能明显提高疫苗的免疫效果,高峰期抗体效价的免疫持续期比常规疫苗长;浓缩疫苗免疫雏鸭后的免疫保护性达100%。以上研究表明,NDRV浓缩疫苗安全、高效,在雏鸭上具有良好的免疫保护效果,具有良好的市场前景。     

酵母葡聚糖对金葡菌灭活苗免疫新西兰兔效果的影响

为了研究酵母葡聚糖对金黄色葡萄球菌油乳剂灭活苗免疫新西兰兔效果的影响,将其添加到金黄色葡萄球菌油乳剂灭活苗中,配制成低(5 g/L)、中(10 g/L)、高(15 g/L)3个剂量的酵母葡聚糖金黄色葡萄球菌油乳剂灭活苗,同时用不添加酵母葡聚糖的金黄色葡萄球菌油乳剂灭活苗和生理盐水作为对照,分别给每只新西兰兔皮下注射1 mL,在注射后第7、14、21、31、41和51天,分别采血检测新西兰兔淋巴细胞转化率和抗体水平。结果表明,中剂量(10 g/L)的酵母葡聚糖金黄色葡萄球菌油乳剂灭活苗能明显提高新西兰兔的淋巴细胞转换率和血清抗体水平。说明灭活苗中添加适量的酵母葡聚糖能提高疫苗的免疫效力,增强新西兰兔的免疫功能。     

GC02鸡球虫病疫苗免疫对鸡红细胞免疫功能的影响

为了研究GC02鸡球虫病疫苗免疫雏鸡对鸡红细胞免疫功能的影响,将100只1日龄肉杂鸡随机分成试验组和对照组,每组50只;试验组鸡分别于7、14日龄口服免疫8000个GC02鸡球虫病疫苗孢子化卵囊,对照组为不免疫疫苗;并分别在第21、28、35、42日龄进行试验组、对照组红细胞C3bR酵母花环(E-C3bRR)和红细胞IC酵母花环(E-ICR)率的测定.结果表明,在第7、14日龄用GC02鸡球虫病疫苗免疫雏鸡后,分别在第21、28、35、42日龄所测的试验组鸡的E-C3bRR和E-ICR率与对照组相比均无显著性差异(P＞0.05).说明GC02鸡球虫病疫苗免疫雏鸡后,对雏鸡的红细胞免疫功能影响不明显,处于正常水平.