4种生物源杀虫剂对分月扇舟蛾的毒力及其林间防治效果

[目的]探究分月扇舟蛾的生物控制途径。[方法]测定了1%苦皮藤素乳油、0.3%印楝素乳油、苏芸金杆菌(Bt)和分月扇舟蛾颗粒体病毒对分月扇舟蛾幼虫的毒力及林间防治效果。[结果]1%苦皮藤素乳油1 000倍液、1.26×107芽孢/ml Bt悬液和1.36×108颗粒体/ml颗粒体病毒悬液对分月扇舟蛾3龄幼虫的校正死亡率分别为92.17%、92.53%和91.07%。林间防治试验结果表明,1%苦皮藤素乳油1 000倍液和1.26×107芽孢/ml Bt悬液的校正死亡率分别达83.53%～86.59%和84.05%～86.13%,1.52×108颗粒体/ml颗粒体病毒的校正死亡率达89%以上。[结论]为分月扇舟蛾种群数量的生物调控提供了参考。     

我国宠物饲料行业概况及发展趋势

宠物饲料行业近年来在我国发展呈现持续高增长趋势。结合农业农村部的相关数据及笔者前期调研成果，本文从我国目前宠物饲料行业整体情况、存在问题及未来发展趋势进行总结分析，旨在给宠物饲料相关企业及行业从业人员提供参考。 [关键词] 宠物饲料|行业现状|发展趋势     

气相色谱法同步测定饲料中的4种香味物质

建立了用气相色谱-氢火焰离子化检测器(gas chromatography-flame ionization ditector,GC-FID)同时测定饲料样品中香芹酚、百里香酚、丁香酚、肉桂醛等4种香味物质含量的分析方法。通过对样品前处理方法和色谱分离条件进行优化,确立了较优的检测方法。饲料样品先经去离子水润湿,加入乙醇超声提取2次,提取溶液合并后定容,得到的样品溶液使用HP-Innowax毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm×0.25μm)进行分离测定。基于该法对不同饲料样品进行测定,4种香味剂在15 min内可实现基线分离,在1.0～500μg/ml时线性关系良好(R~2≥0.999),定量限为20 mg/kg,平均回收率为75.9%～108.5%,RSD≤8.1%。通过对实际样品分析,并将结果与现有文献报道方法比较,发现所建立的方法操作简单,结果准确可靠,灵敏度高,可对饲料香味剂产品进行质量评价。     

猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂的筛选

为筛选猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂,将5种佐剂(聚合物佐剂、矿物油佐剂ISA 201 VG、蜂胶佐剂、弗氏佐剂、铝胶佐剂)分别与3株猪丹毒丝菌株(AEr21、AEr31和AEr32)制备成15种灭活疫苗,经物理性状检验、无菌检验、安全检验合格后分别免疫小鼠,应用ELISA方法检测小鼠血清中IgG抗体水平和细胞因子含量(IL-4、IL-10、TNF-β、IFN-γ、MCP-1)。通过腹腔注射和灌胃2种方式对免疫后小鼠进行攻毒,计算免疫保护率。结果显示,5种佐剂与3株猪丹毒丝菌株制备的灭活疫苗均可刺激小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫,矿物油佐剂ISA 201 VG疫苗免疫组诱导小鼠产生的IgG抗体水平和细胞因子含量最高,与铝胶佐剂、弗氏佐剂疫苗免疫组差异显著(P<0.05),与聚合物佐剂、蜂胶佐剂疫苗免疫组差异不显著(P>0.05);矿物油佐剂ISA 201 VG疫苗免疫组在攻毒后的免疫保护率最高,对腹腔注射和灌胃攻毒小鼠的免疫保护率分别为80%、80%、60%和100%、100%、80%。试验结果表明,矿物油佐剂ISA 201 VG可作为猪丹毒丝菌灭活疫苗制备的候选免疫佐剂。     

青霉素结合蛋白在β-内酰胺类抗生素受体分析法中的应用

青霉素结合蛋白是一类广泛存在于细菌细胞膜表面的蛋白,是β-内酰胺类抗生素的主要作用靶位。本文简要阐述了青霉素结合蛋白的发现与分类及其制备方法,分析比较了几种基于青霉素结合蛋白的β-内酰胺类抗生素受体分析法的优缺点,并探讨了未来可能的研究方向。     

网纹瓜去皮与否对网纹瓜白兰地香气物质的影响

将去皮或整体网纹瓜进行粉碎、发酵、蒸馏得到网纹瓜白兰地,采用顶空固相微萃取(HS-SPME)和GC-MS方法,对其白兰地中挥发性香气成分进行分析。结果表明,整体网纹瓜白兰地的香气成分显著高于去皮网纹瓜白兰地香气成分;萜烯类和甾类戊二烯类、醛酮类和芳香类物质含量具有极显著性差异;总酸和酯类物质含量有显著性差异;乙酸异戊酯、己酸乙酯、9-十六烯酸乙酯、4-萜品醇和糠基乙醚这5种成分有极显著性差异;1-丁醇、糠醛和a-萜品醇这3种成分无显著性差异。     

桑葚多糖提取方法的比较

[目的]比较不同提取方法对桑葚多糖提取的影响。[方法]以桑葚多糖得率为考察指标,比较酶提取、超声辅助提取及2种方法联合提取效果的优劣,并采用正交试验优化桑葚多糖的酶提取及超声提取条件。[结果]3种提取工艺中,酶-超声联合提取多糖得率最高,酶辅助提取次之,超声提取最低。[结论]酶-超声联合提取方法是一种高效的提取方法,可用于桑葚多糖的提取。     

猪丹毒丝菌灭活疫苗制备及其对小鼠免疫效力的评价

为制备猪丹毒丝菌灭活疫苗并评价其对小鼠的免疫效力,将3株受试菌株(AEr21、AEr31和AEr32)培养至稳定期,经终质量浓度为2 mg/L甲醛灭活后,用矿物油佐剂ISA 201 VG制备成猪丹毒丝菌灭活疫苗,并与商品化疫苗分别免疫小鼠。应用ELISA方法检测小鼠血清中IgG抗体水平和细胞因子含量(IL-4、IL-10、MCP-1、TNF-β、IFN-γ),流式细胞术测定CD4~+/CD3~+、CD8~+/CD3~+ T细胞亚群百分比,采用灌胃和腹腔注射方式测定免疫保护率,并采集小鼠脏器(肺脏、肝脏、脾脏、肾脏)制备病理组织切片,观察病理变化。结果显示,AEr21、AEr31、AEr32全菌体灭活疫苗组和商品化弱毒疫苗组、灭活疫苗组二次免疫小鼠后的血清IgG抗体效价分别为1∶3 200、1∶6 400、1∶1 600、1∶6 400、1∶3 200(以全菌体超声裂解物为包被抗原)和1∶3 200、1∶6 400、1∶3 200、1∶25 600、1∶6 400(以重组SpaA为包被抗原);商品化弱毒疫苗组诱导小鼠产生的细胞因子水平和CD4~+/CD3~+、CD8~+/CD3~+ T细胞比例最高,与灭活疫苗组差异显著,各灭活疫苗组间差异均不显著;AEr21、AEr31、AEr32全菌体灭活疫苗组和商品化弱毒疫苗组、灭活疫苗组对灌胃和腹腔注射攻毒小鼠的免疫保护率分别为80%、100%、100%、100%、100%和80%、100%、60%、100%、100%;AEr21和AEr32全菌体灭活疫苗组的病理组织变化较AEr31全菌体灭活疫苗组和商品化弱毒疫苗组、灭活疫苗组更显著。表明受试菌株(AEr31)与矿物油佐剂ISA 201 VG制备成的猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫小鼠后不仅可产生较高水平的细胞免疫和体液免疫,还可完全抵抗强毒株的攻击。     

猪丹毒丝菌CbpB基因的克隆表达及其间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

利用表达纯化的猪丹毒丝菌(ER)胆碱结合蛋白B(CbpB)建立一种检测ER抗体的间接ELISA方法。克隆扩增ER的CbpB基因并与原核表达载体pGEx-6P-1连接,经PCR、双酶切及测序鉴定,将阳性重组质粒转入E.coil BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blot鉴定产物。以纯化重组CbpB蛋白作为包被抗原,通过一系列反应条件优化,建立检测ER抗体的间接ELISA方法(CbpB-ELISA),并用于临床猪血清样品检测。建立该方法的最适条件:包被抗原浓度为1.0 μg·mL^-1,4 ℃过夜;5%脱脂奶粉于37 ℃封闭2 h;血清稀释度为1:100,37 ℃孵育60 min;酶标二抗稀释度为1∶1 000,37 ℃作用45 min;显色时间为37 ℃作用10 min。该方法可特异性地检测ER抗体,与其他猪病原阳性血清均无交叉反应性;阳性血清稀释至1:12 800时仍可检出;批内及批间变异系数均小于10.00%;与全菌体-ELISA、SpaA-ELISA、商品化ELISA试剂盒及Western-blot比较,该方法总符合率分别为91.67%、93.33%、86.67%和90.00%,其中阳性符合率分别为92.45%、94.55%、88.89%、90.91%,阴性符合率分别为85.71%、80.00%、66.67%、80.00%。对进行和未进行ER免疫的猪血清样品检测,免疫抗体阳性率为86.67%,感染抗体阳性率为30.50%。该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性以及临床应用的可靠性,为ER的免疫监测和流行病学调查提供了技术手段。     

玉米干全酒精糟氨基酸的近红外检测研究

玉米干全酒精糟(Distillers's Dried Grains with Solubles,简称DDGS)是一种重要的蛋白质饲料原料,因乙醇生产设备和工艺类型存在较大差异,不同来源和批次玉米DDGS中氨基酸含量的差异较大。通过采集国内外不同工艺、年份和产地的具有代表性的110份玉米DDGS样品,依据国家标准方法测定氨基酸含量,并借助光栅型光谱仪采集近红外漫反射光谱,构建了18种氨基酸的定量分析模型。研究结果显示:天冬氨酸、谷氨酸等10种氨基酸定量分析模型的决定系数在0.85～0.95,苏氨酸、丝氨酸等7种氨基酸定量分析模型的决定系数在0.73～0.82,赖氨酸定量分析模型的决定系数(0.62)最低,模型的RMSEP在0.03～0.19,可用于玉米DDGS中氨基酸含量的快速获取。