特异抗体标记金黄色葡萄球菌No.1800株在炭疽病诊断上的应用

自从Forsgren等发现金黄色葡萄球菌的细胞壁成分A蛋白(简称SPA)能和人及某些哺乳动物的IgG的Fc段发生非特异性结合以来,在国內外对SPA及其在免疫学和血清学方面的应用已进行了广泛的研究,但多限于医学方面,在兽医学领域尚少报道。家畜炭疽病的诊断一直应用细菌学检验、动物接种及沉淀反应等方法。这些方法     

HRP—SPA在兽医临床诊断上的应用

葡萄球菌A蛋白(SPA)具有与人和多种哺乳动物血清中IgG分子Fc段高度亲和的特异性。可用同位素、荧光素、铁蛋白、过氧化物酶标记SPA,而不影响天然蛋白质的生物学特性。国外自1977年开始将辣根过氧化物酶(HRP)标记的SPA(简称HRP—SPA)用于间接免疫酶染色以来,引起了许多医学工作者的极大兴趣。他们把抗原抗体的免疫反应和酶的高效催化     

SPA与鸭IgG的结合性研究

金黄色葡萄球菌细胞壁中的A蛋白(staphylo-coccal protein A,SPA)能与多种动物的γ-球蛋白发生非特异性结合反应,而且IgG的Fc片段与SPA结合后并不影响Fab片段的免疫活性,因此在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,常用SPA与辣根过氧化酶(HRP)交联而成SPA-HRP结合物,用于抗原、抗体的定量测定及组织切片中抗原或抗体的定位、免疫复合物的检测等[1].     

葡萄球菌蛋白A(SPA)的性质与应用

葡萄球菌蛋白 A(StaphylococcalProtein A,简称 SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁所特有的一种成分。它具有能与人及多种哺乳动物血清中 IgG 的 Fc 段发生非特异性结合,且不影响抗体与抗原相互反应的特性。由于 SPA 的此种特性,近年来,国内外在细菌、病毒等病原的快速诊断与分型和肿瘤的研究以及免疫学基础理论研究方面,均有广泛应用。一是以 SPA 作载     

葡萄球菌A蛋白及其在免疫学中的应用

葡萄球菌A蛋白(StaphylococcalProtein A,简称SPA)是多数金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白成分,至今未发现其和致病性有明显的关系,具有与人及多种哺乳动物IgG的Fc段非特异性地结合的特性,这就弓f起了医学及生物科学界的极大重视。现在以SPA为指示系统建立了许多特异、敏感、快速的检测抗原或抗体的方法,应用范围也日益扩大。一、SPA的性质:SPA首先由Ver-wey     

金黄色葡萄球菌蛋白A的提取、纯化及鉴定

为了获得纯度高、活性好的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),取改良营养肉汤培养基上生长18h的金黄色葡萄球菌培养物,采用溶菌酶裂解细胞壁释放蛋白质,用磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶解后转入透析袋透析,透析物用小鼠IgG-sephrose4FF亲和层析柱纯化,采用二喹啉甲酸(BCA)法测蛋白质浓度。结果表明:SPA浓度为0.933mg/mL;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果在42ku处有明显的电泳条带,蛋白免疫印迹(Western-blot)进一步证实小鼠IgG与SPA在42ku处发生较强的反应;以SPA为抗原,提纯的小鼠IgG为样品进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,结果小鼠IgG稀释到1∶25600时仍能与SPA结合,说明提取的SPA活性较高。     

SPA诊断鸡传染性支气管炎

SPA是金葡萄菌细胞壁抗原的主要成分。目前已知在90%以上的金葡萄菌中均含有这种成份。但不同菌株产生SPA的量相差十分悬殊,且只有金葡萄菌含之,表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌不含SPA。SPA能同人类和多种哺乳类动物的IgG产生沉淀反应。SPA具有天然地和人类及其它一些哺乳动物IgG分子Fe段结合的能力,而不影响该抗体与抗原的反应性。应用这一特性,我们对标准毒株:IBV_(M_(41))、IBV_(M_(21))周、IBV_(H_(52)_、IBV_(H_(120))分别作试验,其结果均为阳性。对照组均为阴性。本试验和IBV在鸡胚内对B(NDV—B)干扰试验,电镜观察,对流免疫电泳实验结果取得一致。一、材料与方法一、标准毒株来源:(一)IBV_(H_(120))、IBV_(H_(52))由上海农科院畜牧兽医研究所引入。     

应用SPA—ELISA法检测猪血清弓形体抗体的报告

1979年 Madore 开始把葡萄球菌 A 蛋白用于酶联免疫吸附试验(SPA—ELISA),现已广泛应用于血清学诊断,由于 SPA 具有与人及多种哺乳动物血清 IgG 的 Fc 段非特异相结合的特性,在 ELISA 中代替第二抗体,但它与多种哺乳动物各种属的亲和力不同,其中与猪的 IgG 亲和力最强,我们应用 SPA-ELISA 检测猪血清弓形体抗体,并与间接血凝法(IHA)进行比较结果满意,现报道如下。     

海藻硫酸多糖和中药复方对鸡胚接种H9N2亚型禽流感病毒的作用

为探讨海藻硫酸多糖(sulfated polysaccharide from algae,SPA)及中药复方提取液(compound extracts of Chinese medicine,CECM)对H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的作用,将SPA及CECM以3种不同加药方式作用于接种了H9N2亚型AIV的10日龄SPF鸡胚中,无菌收集鸡胚尿囊液,测定血凝效价,检测2种药液对H9N2亚型AIV的预防、治疗及直接灭活作用。结果显示,SPA及CECM的最大安全浓度分别为50和200mg/mL;3种不同加药方式下,不同浓度SPA及CECM均能极显著降低鸡胚尿囊液中H9N2亚型AIV的血凝效价(P0.01),以直接灭活作用组的血凝效价降低幅度最大,预防作用组和治疗作用组次之。预防作用组,CECM高剂量组(200mg/mL)的抗病毒效果显著优于SPA各剂量组(12.5、25和50mg/mL)及CECM低、中剂量组(50和100 mg/mL)(P0.05);治疗作用组,SPA高剂量组(50 mg/mL)及CECM中、高剂量组(100和200mg/mL)抗病毒效果显著优于SPA低剂量组(12.5mg/mL)(P0.05);直接灭活作用组,SPA及CECM的抗病毒效果均佳,CECM各剂量组的抗病毒效果与SPA各剂量组差异极显著(P0.01)。结果表明,SPA和CECM对10日龄鸡胚几乎无毒副作用;SPA及CECM均能显著抑制H9N2亚型AIV在鸡胚尿囊液中的增殖,以直接灭活作用组的抗病毒效果最佳,其抗H9N2亚型AIV作用的强弱与药物浓度、用药和病毒的感染时间顺序密切相关。     

沙特阿拉伯：禁止从黎巴嫩进口果蔬

正2021年4月中旬,沙特阿拉伯(以下简称沙特)宣布禁止从黎巴嫩进口果蔬,理由则是沙特认为果蔬货运中有走私毒品。据沙特通讯社(SPA)消息,毒贩正利用运输果蔬产品之际向沙特境内走私毒品。在黎巴嫩当局充分保证已采取必要措施防止走私之前,该禁令将一直有效。     

特异抗体标记金黄色葡萄球菌No.1800株在猪丹毒猪肺疫猪副伤寒及猪败血性链球菌病区别诊断上的初步应用

金黄色葡萄球菌 A 蛋白(简称 SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分。早在1940年 Verwey 首先描述了金黄色葡萄球菌的某些菌株的一种抗原成分,能与人的正常血清在双相琼脂扩散试验中出现沉淀线。1958年 Jensen 也报导了类似结果,并发现葡萄球菌的这种抗原成分是细胞壁的组成部分。1964年,Grov 等称葡萄球菌的这种细胞壁成分为 A 蛋白。1966年,Forsgren 等发现 SPA 能与人正常血清的 IgG 的 Fc 段发     

应用“协同凝集试验”检验盐湿皮张炭疽病皮的实验报告

我所与遵义医学院微生物教研室合作,采用国内外比较先进的金黄色葡萄球菌A蛋白免疫技术的协同凝集试验法,检验炭疽病皮张。此方法具有特异性商、敏感性强、反应显现快、操作简便、不受器械、场地的限制、快速、易于推广等优点。经我所结合进口皮张和少量其他畜产品(山羊尾、马皮、马身毛)的检疫进行小批量试验,获得了满意的结果。国内开展金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)的研究始于1979年。几年来应用SPA的免疫学特性,根据抗原抗体的特异性,以高度免疫的相应抗血清进行协同凝集试验(CoA),已被广泛应用于细菌、病毒、螺旋体、立克次氏体等病原的鉴定和某些传染病的早期快速诊断,但在兽医方面报道甚少。近来我所闲CoA法检验盐湿皮张和一些畜产品的炭疽病皮,还是初步尝试。     

应用多重套式PCR检测鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体

根据已发表的鸡毒和鸡滑液支原体血凝素基因序列pMGA和vlhA各设计两对引物,建立鉴别诊断两种支原体的多重套式PCR方法,对其进行温度条件、Ⅱ步模板浓度优化及特异性、敏感性实验。该方法在两步PCR后能特异性地扩增出MG(408 bp)和MS(688 bp)两个目的片段。应用于临床样品检测,与支原体分离、SPA检测比较结果PCR灵敏度高于病原分离。     

SPA在免疫学上的研究

SPA(葡萄球菌A蛋白)是多数金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分，它能与正常人和多种哺乳动物IgG(免疫球蛋白G)呈非特异性(先天遗传比较初级的识别功能)结合出现沉淀“假免疫反应”。与之结合的IgG仍保持抗体。SPA生物学活性十分广泛，包括与IgG的FC(可结晶片段)结合，固定补体激活B(囊依赖淋巴)细胞，抑制K(荚膜抗原)细胞的ADCC(抗体依赖性细胞介异细胞毒)。     

基因工程产品SPAG简介

葡萄球菌A蛋白(SPA)发现于1940年,70年代后得以广泛应用。尽管一些金黄色葡萄球菌可以分泌丰富的SPA,但其应用范围远不及链球菌G蛋白(SPG)。SPG发现于70年代,但G组链球菌难以培养,SPG的分泌量也少,而且纯化步骤复杂;此     

副鸡嗜血杆菌人工感染鸡血清凝集抗体动态观察

在检测鸡传染性鼻炎 ( IC)抗体的血清学方法中 ,血清平板凝集试验 ( SPA) ,不但操作简便快速 ,还具有较高的敏感性和特异性 ,因此是生产中较为常用的鸡传染性鼻炎抗体检测手段之一。为给本方法在疾病诊断中的应用提供进一步的参考 ,作者对A、C型副鸡嗜血杆菌人工感染鸡感染后 0～ 1 1周的血清 SPA抗体的动态变化进行了测定 ,现将试验情况报告如下。1　材料与方法1 .1　菌株与参考血清　标准株 0 0 83( A型 )、Modesto( C型 )来自美国菌种保藏中心。地方分离株 Hp8、H1 8为本实验室保存。阴、阳性对照血清 :本实验室保存 ,阴性血清采自…     

氢化可的松诱导鸡毒支原体感染模型的建立

试验旨在建立鸡毒支原体人工感染动物模型,为鸡毒支原体致病的分子机制研究提供基础。首先在7日龄时使用氢化可的松建立鸡的免疫低下模型,15日龄时在左右胸气囊分别注射0.5 m L浓度为1×109CCU/m L的鸡毒支原体R株菌液,观察鸡的临床症状并进行剖检,采集咽拭子、气囊和肺进行PCR检测,采用血清平板凝集试验(SPA)检测血清抗体,对气管和肺进行光镜检查。结果显示,攻毒4 d后,鸡表现出明显的呼吸道症状,解剖发现气囊浑浊、增厚并有黄色干酪样渗出物,PCR和SPA检测呈阳性,光镜下观察到气管中纤毛脱落,上皮细胞增生,黏膜下层淋巴细胞浸润,肺出血并有炎性细胞渗出。表明鸡毒支原体感染病理模型造模成功。     

葡萄球菌A蛋白与动物血清结合力的测定

用单向扩散、双向扩散,对流免疫电泳、微量环状沉淀试验、吸收实验和抑制实验等方法测定了SPA与四种动物血清的结合力,证明SPA与猪血清的结合力最强,可结合大部分的IgG及少量的IgM;与牛和绵羊血清的结合均只发生在IgG_2上;与马血清的结合则主要是通过IsGa、IgGb、IgGc和IgG(T)。     

SPA—固相免疫电镜快速诊断轮状病毒感染

SPA—固相免疫电镜技术(SPA—SPIEM)是将 SPA 吸附于支持膜上,和动物 IgG 的Fc 端结合,活化 Fab 端,充分暴露抗原结合位点,促进抗原体反应,大大提高了电镜敏感性的一种免疫电镜技术。国外已有人用于植物病毒,腺病毒及轮状病毒。国内动物病毒方面,王正党等用于诊断犬出血性肠炎病毒及猫泛白细胞减少症病毒的感染,我们用此技术检测轮状病毒的感染,收到良好效果,结果报告如下:     

应用酶联SPA免疫吸附试验诊断牛白血病的研究

应用酶联SPA免疫吸附试验(PPA-ELISA)、ELISA和琼脂免疫扩散(AGID)对501份牛血清样品进行了对比,证明PPA-ELISA的特异性和敏感性与ELISA一致;敏感性高于AGID。经与其他疫病牛血清做交叉试验证明,PPA-ELISA具有特异性。我们认为PPA-ELISA做为牛白血病的诊断方法是完全可行的。