SPA在免疫学上的研究

SPA(葡萄球菌A蛋白)是多数金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分，它能与正常人和多种哺乳动物IgG(免疫球蛋白G)呈非特异性(先天遗传比较初级的识别功能)结合出现沉淀“假免疫反应”。与之结合的IgG仍保持抗体。SPA生物学活性十分广泛，包括与IgG的FC(可结晶片段)结合，固定补体激活B(囊依赖淋巴)细胞，抑制K(荚膜抗原)细胞的ADCC(抗体依赖性细胞介异细胞毒)。     

应用酶标记葡萄球菌A蛋白“ELISA”检测猪囊虫抗体的研究

作者进行了酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪囊虫抗体的研究,发现该法具有很高的敏感性和良好的特异性,少量假阳性主要由细颈囊尾蚴所致,可由细颈囊尾蚴液抑制而消除。以HRP-SPA代替HRP-兔抗猪γ球蛋白,对同一批猪血清进行了ELISA测定,发现两种结合物检测的结果一致,HRP-SPA完全可以代替HRP-兔抗猪γ球蛋白。SPA能与多种动物的IgG结合,而以与猪的IgG亲和力最强,同时它亦能与人的IgG结合。猪囊虫病为人猪共患的疾病,实验室只需准备HRP-SPA一种结合物,即可同时检测人和猪的囊虫病抗体,满足人医和兽医开展ELISA诊断囊虫病的需要。     

HRP—SPA在兽医临床诊断上的应用

葡萄球菌A蛋白(SPA)具有与人和多种哺乳动物血清中IgG分子Fc段高度亲和的特异性。可用同位素、荧光素、铁蛋白、过氧化物酶标记SPA,而不影响天然蛋白质的生物学特性。国外自1977年开始将辣根过氧化物酶(HRP)标记的SPA(简称HRP—SPA)用于间接免疫酶染色以来,引起了许多医学工作者的极大兴趣。他们把抗原抗体的免疫反应和酶的高效催化     

SPA与鸭IgG的结合性研究

金黄色葡萄球菌细胞壁中的A蛋白(staphylo-coccal protein A,SPA)能与多种动物的γ-球蛋白发生非特异性结合反应,而且IgG的Fc片段与SPA结合后并不影响Fab片段的免疫活性,因此在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,常用SPA与辣根过氧化酶(HRP)交联而成SPA-HRP结合物,用于抗原、抗体的定量测定及组织切片中抗原或抗体的定位、免疫复合物的检测等[1].     

葡萄球菌蛋白A(SPA)的性质与应用

葡萄球菌蛋白 A(StaphylococcalProtein A,简称 SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁所特有的一种成分。它具有能与人及多种哺乳动物血清中 IgG 的 Fc 段发生非特异性结合,且不影响抗体与抗原相互反应的特性。由于 SPA 的此种特性,近年来,国内外在细菌、病毒等病原的快速诊断与分型和肿瘤的研究以及免疫学基础理论研究方面,均有广泛应用。一是以 SPA 作载     

葡萄球菌A蛋白及其在免疫学中的应用

葡萄球菌A蛋白(StaphylococcalProtein A,简称SPA)是多数金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白成分,至今未发现其和致病性有明显的关系,具有与人及多种哺乳动物IgG的Fc段非特异性地结合的特性,这就弓f起了医学及生物科学界的极大重视。现在以SPA为指示系统建立了许多特异、敏感、快速的检测抗原或抗体的方法,应用范围也日益扩大。一、SPA的性质:SPA首先由Ver-wey     

SPA/SPG融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达

葡萄球菌A蛋白（SPA）和链球菌G蛋白（SPG）的IgG结合区编码基因融合后，克隆到大肠杆菌表达载体PGEX，SPA／SPG融合蛋白（SPAG）得到高效表达。可溶性SPAG～GST产物可被谷胱甘肽亲和柱一次性纯化。用琼扩和ELISA试验测定了表达产物与不同种属动物血清反应的性能。SPAG—GST与所有SPA、SPG各自反应的动物IgG结合，对小鼠IgG的反应优于SPA或SPG。在所测试的23种动物血清中，融合蛋白与大部分哺乳动物Ig反应。     

链球菌蛋白G的结构域重构、表达及鉴定

链球菌蛋白G(streptococcal protein G,SPG)具有与多种动物IgG结合的特性。本研究对链球菌蛋白G进行生物学分析,设计重组蛋白G的基因序列,构建重组蛋白G的原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达,得到带有GST标签的融合蛋白,通过GST亲和层析纯化蛋白。Western blot结果显示,重组蛋白具备与IgG结合的能力。ELISA测定重组蛋白与牛、山羊、兔、鼠4个物种IgG的亲和力,显示重组蛋白G的亲和力普遍高于商品化链球菌蛋白G。本研究成功重构并表达、纯化了链球菌重组蛋白G,得到其与4个物种抗体IgG的亲和力常数,有助于SPG在其他相关研究中的应用。     

SPA诊断鸡传染性支气管炎

SPA是金葡萄菌细胞壁抗原的主要成分。目前已知在90%以上的金葡萄菌中均含有这种成份。但不同菌株产生SPA的量相差十分悬殊,且只有金葡萄菌含之,表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌不含SPA。SPA能同人类和多种哺乳类动物的IgG产生沉淀反应。SPA具有天然地和人类及其它一些哺乳动物IgG分子Fe段结合的能力,而不影响该抗体与抗原的反应性。应用这一特性,我们对标准毒株:IBV_(M_(41))、IBV_(M_(21))周、IBV_(H_(52)_、IBV_(H_(120))分别作试验,其结果均为阳性。对照组均为阴性。本试验和IBV在鸡胚内对B(NDV—B)干扰试验,电镜观察,对流免疫电泳实验结果取得一致。一、材料与方法一、标准毒株来源:(一)IBV_(H_(120))、IBV_(H_(52))由上海农科院畜牧兽医研究所引入。     

DOt—ELISA对水牛体内布氏杆菌特异蛋白A反应性抗体的检测

葡萄球菌蛋白A通过与不同类及不同亚类的抗体Fc受体相结合,而非特异地与哺乳动物γ-球蛋白起作用(Kronvall等1974)。尽管在反刍动物抗体的Fc分子和蛋白A之间显示了不同的联结亲和力(Outteridge1985),但业已证明,在生理状态的离子强度和pH条件下,SPA与反刍动物IgG_2的作用会达到一个显著的水平(Langone1982)。最近,Lanman等(1984)描述     

金黄色葡萄球菌蛋白A的提取、纯化及鉴定

为了获得纯度高、活性好的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),取改良营养肉汤培养基上生长18h的金黄色葡萄球菌培养物,采用溶菌酶裂解细胞壁释放蛋白质,用磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶解后转入透析袋透析,透析物用小鼠IgG-sephrose4FF亲和层析柱纯化,采用二喹啉甲酸(BCA)法测蛋白质浓度。结果表明:SPA浓度为0.933mg/mL;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果在42ku处有明显的电泳条带,蛋白免疫印迹(Western-blot)进一步证实小鼠IgG与SPA在42ku处发生较强的反应;以SPA为抗原,提纯的小鼠IgG为样品进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,结果小鼠IgG稀释到1∶25600时仍能与SPA结合,说明提取的SPA活性较高。     

间接酶联免疫吸附测定法的第二抗体取代试验

间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)的第二抗体,根据国内外文献记载,必须与第一抗体相对应。如检测患马血清的抗体,必须制备兔抗马IgG;检测患牛血清的抗体,必须制备兔抗牛IgG。从1980年以来,我们用ELISA检测牛伊氏锥虫病抗体,发现第二抗体可用免抗马IgG;用ELISA检测马伊氏锥虫病抗体,第二抗体亦可用兔抗牛IgG,现将结果报道如下。     

协同凝结试验快速检测轮状病毒抗原

某些金色葡萄球菌具有A蛋白(SPA),能与多种动物的IgG的Fc端结合而不影响Fab端与相应抗原结合的特异性。结合有SPA的IgG与相应抗原结合形成肉眼可见的凝结块,这种试验称为协同疑结试验。我们用该法检测动物及人的轮状病毒抗原,并与     

应用葡萄球菌A蛋白协同凝集试验在多杀性巴氏杆菌分型上的研究

近年来,国内外对金黄色葡萄球菌A蛋白(简称SPA)及其在免疫学和血清学方面的应用已进行了广泛研究。SPA与IgG的Fc段结合后,有抗体活性的Fab段暴露于SPA的表面,当有特异抗原存在时,则可发生协同凝集反应。根据这一原理,在国外,已广泛应用SPA菌制剂进行细菌的分群(型)和鉴定。如Kronvall(1973)的肺炎球菌快     

猪伪狂犬病gB抗体快速检测试纸条的研制和评价

为了建立一种猪伪狂犬病gB抗体检测试纸,为养猪业基层工作人员提供一种快速简便的狂犬病免疫抗体评价方法。胶体金标记gB蛋白作为探针,SPA和猪抗伪狂犬病病毒多抗IgG分别作为检测线和质控线,建立了猪伪狂犬病gB抗体检测试纸。猪伪狂犬病质控血清和疫苗免疫猪血清用来评价其特异性,敏感性以及与IDEXX PRV gB ELISA试剂盒的符合率试验。试验结果显示,该试纸条具有较高的特异性和敏感性,与IDEXX PRV gB ELISA试剂盒的符合率为91.04%;该免疫层析试纸条具有快速(5min)、特异、敏感等优点,不需要专门的仪器设备和专业技术人员,适合于田间推广应用。     

SPA诊断鸡传染性喉气管炎

葡萄球菌A蛋白(SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁所特有的一种成份,它能与多种哺乳动物IgG分子Fe段发生非特异性结合,而不影响该抗体与抗原的反应性。应用这一特性,我们对标准毒株,分离毒株分别作试验,其结果标准毒株、分离毒株均为阳性,对照组均为阴性。这种方法比常规的病毒学诊断方法具有快速、简易、敏感、特异、省料、成本低优点。一、材料与方法1.标准毒株来源:ILT/B A株由北京农业部兽医药物督察所提供。2.ILT抗血清:教研组制备。3.标准菌株来源:Cowon 1株,由长春兽大提供。4.分离毒株:U_1、S_1、S_2、S_3。5.SPA试剂制备:用Cowan 1株金黄色葡萄球菌,先于琼脂斜面和肉汤各传一代。     

应用辛酸法-DEAE纤维素吸附过滤法提纯的IgG制备RIA用二抗

用辛酸沉淀法结合DEAE纤维素吸附过滤法,从兔、绵羊、驴和人血清中提取IgG,经PAGE和ID分析,其纯度和免疫活性较好.用提纯的兔IgG和人IgG制备的二抗,抗体效价高(驴抗兔IgG高达1024倍,羊抗人IgG达256倍),特异性好,抗体亲和力强,可供作RIA免疫分离沉淀试剂.     

酶联免疫吸附试验对绿脓杆菌抗体的检测和对马血清中抗体滴度的测定

用酶联免疫吸附试验(ELISA)对抗绿脓杆菌血清学的一种共同抗原(原始内毒素蛋白质)。蛋白酶和弹性蛋白酶的免疫球蛋IgM和IgG抗体的检测。对马血清中绿脓杆菌抗体滴度的测定。利用辣根过氧化物酶标记兔抗马IgM和IgG抗体作为酶标记抗体结合物。利用5氨基水杨酸(5—Aminosalicylic(?)acid)和H_2O_2作为底物。以免疫马、新生驹和72匹健康赛马的血清作为ELISA和被动血球凝集研究的抗绿脓杆菌抗体。通过ELISA,免疫马IgG抗体滴度的变化是清楚的。在新生驹中,出生后第一天,IgM和IgG抗体的数量主要是来自初乳,同时指出,新生驹的抗体水平开始低然后增加。抗绿脓杆菌原始内毒素蛋白质,蛋白酶和弹性蛋白酶的抗体,几乎存在于所有被研究的健康赛马中。     

荧光标记细毛羊睾丸免疫血清IgG抗体分子进入兔受精卵的初步观察

<正> 哺乳动物母体血清IgG抗体分子能否进入体内受精卵,是当前免疫学、组织胚胎学中尚有争论的问题。我们因细毛羊睾丸免疫血清对哺乳动物后代性别控制的实验微观需要,开展了荧光标记细毛羊睾丸免疫血清IgG抗体分子进入兔受精卵的实验。现报告如下。     

鹿流行性出血病病毒双抗夹心ELISA方法的建立

为建立鹿流行性出血病病毒(EHDV)病原学检测方法,用纯化的抗EHDV特异性单克隆抗体包被ELISA板,用兔抗EHDV IgG作为夹心抗体,IgG作为夹心抗体建立EHDV双抗夹心ELISA方法,并对该方法的特异性和敏感性进行了试验.用ELISA分别检测EHDV、蓝舌病病毒(BTV)、水疱性口炎病毒(VSV)、赤羽病病毒...