温莎甜荞再生体系建立的研究

为了荞麦的进一步研究和转基因体系的建立以及农杆菌介导转化的研究奠定基础,为基因工程改良荞麦芦丁生物合成提供了理论依据及技术保证。以温莎甜荞为研究材料,建立组织培养再生体系,以子叶和下胚轴为外植体,基本培养基为MS,添加不同浓度的生长素和细胞分裂素,设计不同激素配比组合,在相同的培养条件下,研究温莎甜荞子叶和下胚轴愈伤组织诱导和生长特征,筛选出诱导温莎甜荞愈伤组织的最适培养基,为基因工程提供参考和理论依据。研究表明：温莎甜荞子叶产生愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.4 mg/L。诱导芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.3 mg/L。下胚轴诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D 3 mg/L+6-BA 0.1 mg/L。诱导芽的最佳培养基为MS+6-BA 3 mg/L+IBA 0.5 mg/L。生根的最佳培养基为1/2 MS。     

红江橙与柠檬愈伤组织诱导的研究

以MT为基本培养基,采用L9(34)正交设计法,研究了不同培养基配方对红江橙和柠檬不同外植体愈伤组织诱导的影响。结果表明,上胚轴、下胚轴、子叶均能诱导出愈伤组织,但不同外植体在形成愈伤组织的时间和过程上有差别;红江橙上胚轴、下胚轴、子叶愈伤组织诱导的最佳实验培养基配方分别为MT 2,4-D 1.00 mg/L 6-BA0.50 mg/L 蔗糖30 g/L、MT 2,4-D0.50 mg/L 6-BA0.50 mg/L 蔗糖40 g/L、MT 2,4-D 0.50mg/L 6-BA1.00 mg/L 蔗糖20 g/L,此时愈伤组织诱导率均为100%;柠檬上胚轴、下胚轴愈伤组织诱导的最佳实验培养基配方分别为MT 2,4-D1.00 mg/L 6-BA0.50 mg/L 蔗糖30 g/L、MT 2,4-D1.00 mg/L 6-BA2.00 mg/L 蔗糖20 g/L,此时愈伤组织诱导率分别为55%、29%。     

霞晖6号桃离体快繁及叶片愈伤诱导技术

以霞晖6号春季嫩梢为外植体材料,通过消毒获得无菌苗,比较不同基本培养基及激素种类浓度对桃增殖、生根的影响,并筛选叶片愈伤诱导条件。结果表明:最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+2.0%蔗糖+5.0 g/L琼脂粉,其平均增殖倍数可达5.2棵/月;适宜生根培养基为MS(大量元素减半)+IAA 2.0 mg/L+2.0%蔗糖+5.0g/L琼脂粉,直接光照培养生根;叶片愈伤诱导最佳培养基为MS+TDZ 5.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+2.0%蔗糖+5.0 g/L琼脂粉,其诱导率可达100%;加入PVP具有较好的抗氧化作用。     

霞晖6号桃离体快繁及叶片愈伤诱导技术

以霞晖6号春季嫩梢为外植体材料,通过消毒获得无菌苗,比较不同基本培养基及激素种类浓度对桃增殖、生根的影响,并筛选叶片愈伤诱导条件。结果表明:最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+2.0%蔗糖+5.0 g/L琼脂粉,其平均增殖倍数可达5.2棵/月;适宜生根培养基为MS(大量元素减半)+IAA 2.0 mg/L+2.0%蔗糖+5.0g/L琼脂粉,直接光照培养生根;叶片愈伤诱导最佳培养基为MS+TDZ 5.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+2.0%蔗糖+5.0 g/L琼脂粉,其诱导率可达100%;加入PVP具有较好的抗氧化作用。     

萝卜诱导愈伤组织较适外植体及激素的筛选

以萝卜无菌苗的子叶和下胚轴为试验材料,比较了不同浓度的6-BA、NAA、2,4-D和IBA组合时,子叶和下胚轴的愈伤组织诱导率和质量,结果表明:子叶诱导愈伤组织的效果比下胚轴诱导愈伤组织的效果好,子叶是萝卜组织培养的较佳外植体;子叶和下胚轴为外植体诱导愈伤组织的最适培养基一致,均为MS 3 mg/L 6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖。     

苦豆子愈伤组织诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以苦豆子子叶和胚轴为材料,对苦豆子愈伤组织诱导和继代增殖的最佳培养条件进行研究,旨在建立苦豆子悬浮细胞体系。结果发现,子叶和胚轴为愈伤组织生成的最佳外植体,愈伤组织最佳诱导培养基是MS+0.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;最佳继代增殖培养基是MS+1.0 mg/L NAA+4.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L2,4-D。以胚轴诱导的愈伤组织是细胞悬浮培养的理想材料,初始接种量10%~20%,添加3%蔗糖,有利于悬浮细胞体系的生成。     

萝卜诱导愈伤组织的影响因素

以萝卜种子为试材,研究了不同外植体、不同激素、不同激素浓度及继代培养对萝卜外植体形成愈伤组织的影响.结果表明:(1)诱导萝卜愈伤组织最好的外植体为子叶.(2)不同的生长素诱导效果不同,诱导效果为NAA＞2,4-D＞IBA;(3)萝卜子叶和下胚轴诱导愈伤组织的最佳初代培养基均为MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂.(4)继代培养能促进愈伤组织的形成,子叶和下胚轴的最佳继代培养基分别为:MS+6 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂和MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂.     

苜蓿胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

以苜蓿5～7 d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究培养基中不同激素和浓度配比对苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L愈伤组织诱导率达100%,且愈伤组织状态良好,增殖速度快。MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L为苜蓿胚性愈伤组织诱导的适宜培养基,诱导率为37.8%。胚性愈伤组织分化成苗培养基为MS+6-BA0.2 mg/L+NAA 0.01 mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA 0.02 mg/L+蔗糖10.0 g/L。     

蒙古黄芪愈伤组织诱导及植株再生

以蒙古黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]种子萌发后的上胚轴、下胚轴和子叶为材料,采用MS培养基附加不同浓度植物生长调节剂进行愈伤组织的诱导,并诱导不定芽的发生,生根后得到完整的再生植株。在该过程中,采用正交试验分析6-BA、NAA、2,4-D、固化剂等条件对蒙古黄芪愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。结果表明,下胚轴为诱导愈伤组织的最佳外植体取材部位,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,最佳的不定芽分化培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,而固化剂采用0.1%Gelrite为最佳。     

黑芝麻愈伤组织的诱导及分化的初步研究

以黑芝麻(Sesamum indicum DC)成熟种子无菌苗的子叶、子叶节、下胚轴作为外植体,选用MS基本培养基,并设置4种蔗糖浓度作愈伤组织诱导培养基,以2,4-D、6-BA、IAA、KT组成16种生长调节剂浓度配伍的分化培养基,对愈伤组织的形成及分化进行了研究.结果表明,蔗糖浓度30 g/L时对子叶、子叶节愈伤组织诱导较为有利,蔗糖浓度40 g/L时对下胚轴愈伤组织诱导较为有利,分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L IAA 1.5 mg/L时,子叶愈伤组织的分化率达30.0%,其效果较好.     

芝麻菜愈伤组织诱导及植株再生*

 以芝麻菜(Eruca sativa Mill)无菌苗的下胚轴、子叶和子叶柄作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对其愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明,分别以MS+0.8mg／L 2,4-D,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.1mg／L 6-BA,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.2mg／L 6-BA为下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织诱导培养基时,效果较好,出愈率依次为86.3%,78.2%,97.6%;将下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织分别转移到分化培养基MS+3.0mg／L 6-BA+0.1mg／L　NAA,MS+3.0 mg／L 6-BA+0.2mg／L NAA上再生不定芽,效果最佳,不定芽再生频率分别为72.7%,63.6%,69.2%。将不定芽切下转移至1／2 MS+0.5mg／L IBA培养基上诱导生根,生根率达81％以上。     

萝卜诱导愈伤组织的影响因素

以萝卜种子为试材,研究了不同外植体、不同激素、不同激素浓度及继代培养对萝卜外植体形成愈伤组织的影响。结果表明:(1)诱导萝卜愈伤组织最好的外植体为子叶。(2)不同的生长素诱导效果不同,诱导效果为NAA>2,4-D>IBA;(3)萝卜子叶和下胚轴诱导愈伤组织的最佳初代培养基均为MS 3 mg/L 6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖 0.8%琼脂。(4)继代培养能促进愈伤组织的形成,子叶和下胚轴的最佳继代培养基分别为:MS 6 mg/L6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖 0.8%琼脂和MS 4 mg/L 6-BA 0.5 mg/L NAA 3%蔗糖 0.8%琼脂。     

6-BA、NAA对苜蓿不同外植体愈伤组织培养的影响

以新牧1号和新疆大叶两个苜蓿品种为试材,研究了7个培养基对不同无菌苗外植体愈伤组织诱导和生长影响,以及不同浓度的植物生长调节物质6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)对愈伤组织生长及分化的作用.结果表明:(1)浓度在2～8 mg/L,NAA有利于苜蓿愈伤组织的诱导,随浓度的增大呈促进作用,而在1～3 mg/L,1mg/L 6-BA有利于苜蓿愈伤组织的诱导,随浓度的增大呈抑制作用;(2)MS+2,4-D 2 mg/L+NAA 4 mg/L+6-BA 1 mg/L即MS4为新牧1号的较佳诱导培养基,MS+2,4-D 2 mg/L +NAA 8 mg/L +6-BA 1 mg/L即MS5为新疆大叶苜蓿的较佳诱导培养基;(3)以无菌苗下胚轴、子叶及叶片为外植体,确定下胚轴为诱导愈伤组织的最佳外植体.     

小盐芥下胚轴再生体系的建立

以小盐芥下胚轴为外植体,研究了不同激素与不同浓度组合对愈伤诱导和不定芽分化的影响。结果表明,MS 6-BA 2,4-D组合能诱导出愈伤,诱导率为100%。MS 6-BA NAA组合既能诱导出愈伤又能分化不定芽,愈伤诱导率为100%,激素不同浓度不定芽分化率不同,最佳分化培养基为MS 2.5mg/L 6-BA 0.1mg/L NAA,不定芽分化率为43%。生根培养基为1/2MS,生根率为74%。     

香蕉雄花和组培苗假茎胚性愈伤组织诱导的初步研究

从外植体来源、生长调节剂种类及浓度等方面研究影响巴西蕉胚性愈伤组织诱导的因素。结果表明,以未成熟雄花为外植体,MS培养基+1 mg/L 2,4-D+1 mg/L IAA+1 mg/L NAA较适宜胚性愈伤组织诱导,26℃暗培养条件下,未成熟雄花的胚性愈伤组织诱导率为3%～4%。在MS培养基+0.7 mg/L 2,4-D+4 mg/L 6-BA中,以不同品种假茎为外植体的脱分化愈伤组织诱导率最高可达75%,但只有巴西(青杆)和海南本地米蕉可以诱导出胚性愈伤组织,诱导率分别为0.1%和0.5%.     

中华芦荟快繁技术研究

实验通过诱导愈伤组织和促进腋芽分枝能力两种途径对中华芦荟进行快繁。结果表明:在MS培养基中加入600mg/L的抗坏血酸可有效预防外植体的褐化。愈伤组织诱导途径中由叶诱导愈伤组织阶段和愈伤组织诱导芽阶段的最佳PGR种类和浓度配比分别为2mg/L6-BA+1.7mg/L2,4-D、4mg/L6-BA+0.5mg/LNAA;促进腋芽分枝能力方式中腋芽诱导丛生芽阶段的最佳PGR种类和浓度配比为2mg/L6-BA+0.5mg/LNAA;由芽诱导生根阶段最佳PGR种类和浓度配比为0.3mg/LNAA。促进腋芽分枝能力方式比诱导愈伤组织方式更适合中华芦荟的快速繁殖。     

不同基因型甜高粱愈伤组织与丛生芽诱导条件优化

【目的】探讨不同培养基类型和激素配比对不同基因型甜高粱的愈伤组织和丛生芽诱导的影响,为建立高效稳定的甜高粱遗传转化体系奠定基础。【方法】以不同基因型甜高粱辽甜三号和北甜三号的成熟种子为外植体,在MS培养基中添加不同浓度2,4-D及2,4-D与NAA、6-BA或KT配比组合,对愈伤组织和丛生芽进行诱导;分别在B5、N6、MS和1/2MS培养基中添加不同2,4-D、NAA、6-BA组合,对愈伤组织进行诱导。【结果】适宜北甜三号愈伤组织和胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA,辽甜三号为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA,可获得质量较好的愈伤组织,愈伤组织块大且色泽鲜艳。适于两个基因型甜高粱丛生芽诱导的最佳基本培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L 2,4-D,但不同基因型的诱导率有明显差异,以辽甜三号的诱导效果较好。【结论】不同浓度2,4-D与其他激素配比对两个基因型甜高粱的愈伤组织诱导有明显影响,以对辽甜三号的诱导效果较好;在MS、B5、N6、1/2MS基本培养基中,MS可作为愈伤组织诱导的最佳基本培养基。     

积雪草的组织培养与快速繁殖试验

以积雪草(Centella asiatica)的春芽作为外植体,以MS培养基为基本培养基,添加不同激素,分别组配成12种愈伤组织诱导培养基和丛芽增殖培养基进行组织培养,然后将诱导的积雪草丛芽切成单株后接入4种生根培养基,研究不同激素配比对愈伤组织的形成、丛芽的增殖及生根的影响.结果表明积雪草春芽在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.20 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L培养基上容易诱导愈伤组织,诱导率为86％.丛芽在MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+活性炭0.1 g/L培养基上的成活率为94％,增殖系数为5.9.以MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L+活性炭0.1 g/L为培养基较有利于生根培养.     

东北刺人参愈伤组织诱导和继代的研究

[目的]研究东北刺人参愈伤组织的诱导和继代方法。[方法]以取自长白山的刺人参植株为材料,研究不同外植体、培养基、激素对刺人参愈伤组织诱导的影响。[结果]叶片为刺人参组织培养的最适宜外植体;5月为外植体的最佳取材时期;以MS为基本培养基,并添加1.0 mg/L 2,4-D和1.0 mg/L 6-BA的培养基中愈伤组织诱导率最高;最佳继代培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L。[结论]东北刺人参的最适愈伤诱导培养基和继代培养基分别是:MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L。