不同基因型甜高粱愈伤组织与丛生芽诱导条件优化

【目的】探讨不同培养基类型和激素配比对不同基因型甜高粱的愈伤组织和丛生芽诱导的影响,为建立高效稳定的甜高粱遗传转化体系奠定基础。【方法】以不同基因型甜高粱辽甜三号和北甜三号的成熟种子为外植体,在MS培养基中添加不同浓度2,4-D及2,4-D与NAA、6-BA或KT配比组合,对愈伤组织和丛生芽进行诱导;分别在B5、N6、MS和1/2MS培养基中添加不同2,4-D、NAA、6-BA组合,对愈伤组织进行诱导。【结果】适宜北甜三号愈伤组织和胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2.0mg/L2,4-D＋0.1mg/LNAA,辽甜三号为MS＋2.0mg/L2,4-D＋0.2mg/LNAA,可获得质量较好的愈伤组织,愈伤组织块大且色泽鲜艳。适于两个基因型甜高粱丛生芽诱导的最佳基本培养基为MS＋1.0mg/L6-BA＋0.2mg/LNAA＋0.5mg/L2,4-D,但不同基因型的诱导率有明显差异,以辽甜三号的诱导效果较好。【结论】不同浓度2,4-D与其他激素配比对两个基因型甜高粱的愈伤组织诱导有明显影响,以对辽甜三号的诱导效果较好;在MS、B5、N6、1/2MS基本培养基中,MS可作为愈伤组织诱导的最佳基本培养基。     

杜仲愈伤组织诱导和植株再生体系的建立

【目的】研究在BA、NAA、IBA、2,4-D等激素作用下,杜仲愈伤组织诱导、愈伤组织诱导丛生芽及丛生芽诱导生根各阶段的最佳培养基配方,建立杜仲植株再生体系,为杜仲转基因研究提供基础材料。【方法】以杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段为外植体,使用BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行杜仲愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽诱导生根培养基的最佳配方,建立杜仲植株的再生体系。【结果】杜仲愈伤组织诱导的培养基分别为:成熟胚MS+BA 2.0mg/L+NAA 2.5mg/L,诱导率77.8%;幼嫩胚MS+BA 0.5mg/L+2,4-D 2.0mg/L,诱导率88.9%;叶片MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L,诱导率100%;茎段MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导率为100%。愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L,不定芽诱导率为88.9%,增殖系数为3±1;杜仲在1/4MS的基本培养基中生根最好,生根率达80%,激素的存在反而会抑制生根。【结论】杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段均可通过愈伤组织途径诱导不定芽的形成,并诱导生根,建立杜仲愈伤组织再生体系,但不定芽的增殖系数较低。     

唐菖蒲球茎芽高频再生体系的建立

将带芽的唐菖蒲子球茎切块接种在附加2,4-D 3.0 mg/L的MS基本培养基上诱导愈伤组织的发生.愈伤组织转至MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L诱导芽的分化.丛生芽继代增殖在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1mg/L上,增殖系数最高.生根培养以1/2 MS+NAA 0.1 mg/L效果最佳.     

马铃薯茎段再生的植物激素配比优化

采用正交试验设计,研究了4种植物激素(6-BA、NAA、GA3、2,4-D)的4个水平对3个马铃薯品种(陇薯3号、陇薯6号、LK99)茎段愈伤组织生长和分化的影响,筛选出了适合不同基因型的愈伤诱导和芽分化培养基.试验结果表明,诱导愈伤的最佳激素配比,陇薯3号为MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA35 mg/L+2,4-D 1 mg/L,陇薯6号为MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA32.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,LK99为MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 1 mg/L;诱导芽分化的最佳激素配比,陇薯3号、陇薯6号为MS+6-BA 3.5 mg/L+NAA 1 mg/L+GA310 mg/L,LK99为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA310 mg/L.     

波棱瓜叶片愈伤组织诱导研究初报

通过正交试验研究了6-BA、2,4-D和NAA不同激素配比的MS培养基对波棱瓜叶片愈伤组织形成的影响.结果表明,2,4-D对波棱瓜叶片愈伤组织形成的作用最显著,其次为6-BA和NAA.诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L NAA和MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L NAA,这两种培养基诱导率均达到90%.     

食用菊花花瓣组织培养初探

研究了食用菊花花瓣组织培养过程中不同植物生长调节剂和基因型对愈伤组织诱导和植株再生的影响,结果表明:附加2,4-D2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L的MS培养基愈伤组织诱导率较高,愈伤组织只在MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L培养基上诱导出不定芽。不定芽转移到无植物生长调节剂的MS培养基上,可以得到再生植株。     

落新妇组培快繁技术研究

以落新妇种子作为外植体进行组培快繁,结果表明:以嫩叶形成愈伤组织诱导芽的方式,实现丛生芽的再生。适宜诱导分化的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,最适增殖的培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,形成的植株转接到1/2MS+NAA 0.5mg/L,生根率达90%以上。     

轮钟花组织培养的最佳外植体及培养基筛选

建立轮钟花的组织培养方法,为轮钟花进一步开发利用提供依据,以轮钟花茎段、叶及种子为外植体,通过添加不同浓度的6-BA、NAA和2,4-D于MS或1/2MS培养基中,筛选轮钟花组织培养繁殖的最适培养基及最佳外植体。结果表明:诱导茎段、叶形成愈伤组织的最适培养基为1/2MS+1.0 mg/L6-BA+1.0mg/L 2,4-D,诱导率为80.0%;诱导种子形成愈伤组织的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2,4-D,诱导率为80.0%;诱导茎段愈伤组织继代培养的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2,4-D;种子愈伤组织继代培养的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L2,4-D;诱导种子不定芽的最适培养基为MS+0.2mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA,分化率为80.0%;种子是诱导轮钟花不定芽的最佳外植体。     

耧斗菜的组织培养

以耧斗菜幼嫩叶片及叶柄为外植体,研究了不同生长调节物质对外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,在培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L上诱导叶柄产生愈伤效果最好,诱导率为80.5%;在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L上叶片愈伤诱导效果最好,诱导率为92.7%。继代培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L。在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中分化芽;分化的芽在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中增殖。生根培养基为1/2 MS+NAA0.1 mg/L或1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。     

丹参组织培养及快速繁殖

以丹参叶片为外植体,将其接种在MS基本培养基上,探索不同激素种类和浓度配比对丹参愈伤组织诱导、愈伤组织分化为芽的影响。结果表明,MS+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D是丹参叶片诱导愈伤的最佳培养基;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA是诱导愈伤组织分化为芽的最佳培养基。单独使用6-BA不利于诱导芽,与一定浓度的NAA配合使用能高效率地诱导芽。     

不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响

[目的]寻求代替ZT提高猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的最佳激素组合。[方法]以美味猕猴桃离体茎段为外植体,以MS为基本培养基,附加2,4-D0.5、1、2.0mg/L和NAA0.1、0.3、0.5mg/L与6-BA0.5mg/L分别组成诱导愈伤组织的6个激素组合,并以同样浓度的2,4-D和NAA与6-BA1.0mg/L分别组成分化芽的6个组合激素,研究不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响。[结果]6种不同浓度的激素组合对猕猴桃茎段愈伤组织均有一定的诱导作用,其中2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L的组合有利于愈伤组织诱导,诱导率达86.1%;绿色愈伤组织在MS培养基附加激素2,4-D+6-BA组合中芽的分化率很低,而在附加NAA+6-BA组合中芽的分化率较高,其中,NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L的组合有利于芽分化,芽分化率为75.2%。[结论]2,4-D与6-BA组合对猕猴桃绿色愈伤组织的芽分化有一定抑制作用。     

猫须草组织培养研究

[目的]研究猫须草离体培养的最佳激素配比和最佳培养基。[方法]以猫须草幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,比较不同浓度和不同种类的生长激素对茎段腋芽萌发、愈伤组织增殖及丛生芽生根的影响。[结果]6-BA可促进腋芽萌发,分化丛生芽。随着6-BA浓度的增加,萌发腋芽的数量反而减少,当6-BA的浓度大于2.5 mg/L时,茎段便不再长出腋芽,而是在其顶端出现愈伤组织。在一定浓度范围内,随着2,4-D浓度的增加,愈伤组织的生长就越旺盛,当2,4-D浓度为2.0 mg/L时,愈伤组织增殖效果最好。NAA浓度为1.0 mg/L时诱导茎段生根效果最好,生根率达到100%。[结论]适宜的诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L,适宜继代增殖培养基为MS+2,4-D2.0 mg/L,茎段生根的适宜培养基为MS+NAA1.0 mg/L。     

越南紫薯胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎形成

【目的】越南紫薯〔Ipomoea batatas（L.）Lam〕品质优良,薯块均匀,商品性好,但产量偏低,产量性状亟待遗传改良,体细胞胚胎发生是快速繁殖和保持种性稳定的基础,对紫薯的遗传改良有重要意义。采用激素处理越南小紫薯外植体,研究越南紫薯的体细胞胚胎再生途径,为通过体细胞无性系变异筛选紫薯高产优质新材料提供新方法。【方法】以市场销售的越南紫薯为材料,以叶片和茎段作外植体,探讨植物生长调节物质种类（6-BA、NAA、2,4-D、ABA）及配比对越南紫薯培养的影响,建立越南紫薯体细胞胚胎发生及再生植株体系。【结果】叶片和茎段诱导愈伤组织培养基相同,难易程度一致,诱导配方为 MS+6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L;在普通愈伤组织诱导形成胚性愈伤组织过程中,2,4-D 起重要作用,其他激素起辅助作用,较好的诱导配方为 MS+6-BA 0.1 mg/L + 2,4-D 2.0 mg/L;在胚性愈伤组织诱导产生体细胞胚过程中,ABA 起着重要作用,并进一步发育和分化的适宜的培养基为 MS+6-BA 0.1 mg/L + NAA 0.2 mg/L + ABA 0.5 mg/L。【结论】叶片和茎段愈伤组织诱导最佳培养基为 MS+6-BA 1.0 mg/L+0.2 mg/L NAA,愈伤组织转化为胚性愈伤最佳培养基为 MS+6-BA 0.1 mg/L +2,4-D 2.0 mg/L;胚性愈伤形成体细胞胚胎最佳培养基为 MS+6-BA 0.1 mg/L + NAA 0.2 mg/L + ABA 0.5 mg/L。     

花花柴组织培养与植株再生体系的优化

【目的】探讨植物生长调节剂、外植体及NaCl等因子对花花柴愈伤组织诱导、分化与植株再生的影响,并优化花花柴的再生植株体系,建立直接从茎端诱导丛生芽的植株再生体系。【方法】对生长约为2个月的花花柴植株进行不同的处理。采用不同浓度组合的细胞分裂素6-BA(6-Benzylaminopurine)和生长素NAA(α-Naphthaleneacetic acid)的MS(Murashige and Skoog)培养基(0.8%(w/v)琼脂粉)。【结果】最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.6 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA2.0 mg/L;从外植体直接诱导不定芽的最佳培养基是MS培养基;诱导根的最佳培养基是1/2MS+NAA mg/L。【结论】花花柴叶片是愈伤组织形成的最佳材料,NaCl胁迫对愈伤组织的诱导有一定的抑制作用。     

粉葛种苗离体繁殖技术初步研究

为获得粉葛的离体繁殖技术,以地理标志火山粉葛嫩枝为外植体,通过调整基本培养基、生长调节剂种类和配比,选出适合的诱导、继代增殖和生根培养基配方。结果显示,粉葛嫩茎尖是诱导愈伤组织的最佳材料。培养基MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L有利于粉葛茎段侧芽的萌发,而MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L则能高效诱导茎段产生愈伤组织。但在对粉葛嫩茎尖的诱导试验中,培养基MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L体现出促进芽萌发、愈伤组织形成并高效分化丛生芽的综合特点。培养基MS+NAA 0.5 mg/L能较好地诱导粉葛试管苗形成不定根。     

婆婆纳组织培养再生体系的建立

以婆婆纳(Veronica didymaTenore)的叶片、茎节、茎段、顶芽为外植体,接种在附加2,4-D、6-BA、NAA等不同质量浓度和组合的培养基中进行离体培养,并比较了不同培养基上不同外植体的诱导率。结果表明,诱导愈伤组织的最佳外植体是叶片,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L,愈伤组织诱导率为100%。诱导愈伤组织分化的最适培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA0.75mg/L+NAA1.75 mg/L,分化率为90%。诱导生根的培养基为l/2MS+NAA0.2 mg/L,生根率为90%。     

苜蓿高频再生组织培养体系的优化

以3个品种紫花苜蓿7日龄无菌苗的下胚轴为外植体,以MS培养基为基础培养基,研究不同浓度激素配比对紫花苜蓿离体再生体系中愈伤组织的形成、不定芽诱导以及生根的影响。结果表明:金皇后、甘农1号、阿尔冈金愈伤组织诱导的最佳培养基分别为MS+2,4-D 2.5 mg/L+6-BA 0.5mg/L、MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L、MS+2,4-D 3.0 mg/L+KT 1.0 mg/L;不定芽诱导的最佳培养基分别为MS+6-BA 2.0 mg/L+CH 0.5 g/L、MS+NAA 0.3 mg/L+KT 0.5 mg/L、MS+KT 1.2 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg/L。     

福建柏组织培养体系的建立及优化

【目的】探究福建柏不同外植体再生过程中最适激素配比，为建立福建柏组织培养体系提供技术支持。【方法】以福建柏鳞叶和茎段作为外植体，在饱和洗衣粉液浸泡20 min和体积分数75%酒精浸泡30 s条件下，研究体积分数0.1% HgCl₂浸泡不同时间(5,8,10,12,15 min)后的消毒效果；以福建柏鳞叶和茎段为材料，通过单因素试验,研究生长素（NAA和2,4-D）对不同外植体愈伤组织诱导的影响，再通过正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA不同配比对外植体愈伤组织诱导的影响；以福建柏愈伤组织为材料，采用正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA、KT对愈伤组织继代增殖的影响；以福建柏带芽茎段为材料，研究细胞分裂素6-BA对芽诱导和萌发的影响；以福建柏分化苗为材料，采用正交试验研究6-BA、2,4-D、KT对分化苗继代生长的影响；以福建柏无根苗为材料，研究无根苗扩增繁殖的效果。【结果】（1）福建柏鳞叶最适消毒配方为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1% HgCl₂ 10 min，污染率为16.67%；茎段为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1% HgCl₂ 15 min，污染率为23.33%。（2）鳞叶愈伤组织诱导最适配方为MS培养基+NAA 2.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L，诱导率为81.67%；诱导出的愈伤组织白色近透明，长势良好。而茎段为MS培养基+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L，诱导率为78.33%，诱导出的愈伤组织淡绿色，长势良好。（3）愈伤组织最适增殖配方为MS基本培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L，增殖质量为1.984 g，褐化率23.33%。（4）芽诱导萌发最适配方为MS基本培养基+6-BA 2.0 mg/L，平均诱导芽数2.05个，平均萌动数1.70个，分化率100%。（5）分化苗生长和扩繁的最适配方为1/2MS基本培养基+2,4-D 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L，平均生长长度为2.241 cm，无褐化，扩繁成活率为95.50%，扩繁系数为3.18。【结论】福建柏以带芽茎段作为芽增殖再生途径外植体，鳞叶作为愈伤组织再生途径的外植体进行组织培养效果最佳，长势好且稳定。     

玉米湘农3号幼胚愈伤组织诱导及再生体系建立

以玉米品种湘农3号幼胚为外植体,以MS为基本培养基,研究2,4-D与NAA浓度配比对愈伤组织诱导、KT与IBA浓度配比对愈伤组织分化、NAA与6-BA浓度配比对试管苗生根的影响。结果表明:愈伤组织诱导的最适培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L;愈伤组织分化的最适培养基为MS+KT 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L;生根的最适培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.6 mg/L。     

大花萱草‘香宝’再生体系的建立

以萱草‘香宝’的花托为外植体,用正交试验法研究了不同激素及其不同浓度对愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、不定芽诱导和不定根诱导的影响.结果表明:6-BA是影响‘香宝’愈伤组织诱导的主要因素,各因素影响的主次关系为6-BA>2,4-D>NAA>KT,最适愈伤诱导的培养基为MS+6-BA 2mg/L+2,4-D 2mg/L+NAA0.3mg/L,愈伤诱导率为81.28%;6-BA是影响愈伤增殖的主要因素,各因素影响的主次关系为6-BA>NAA>KT>2,4-D,愈伤组织增殖的最佳配方为MS+6-BA 1 mg/L+KT 1 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+NAA0.05mg/L,愈伤增值倍数为5.271;GA是影响不定芽诱导的主要因素,各因素影响的主次关系为GA>6-BA>NAA,最适不定芽诱导的培养基为MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.1mg/L+GA 0.5mg/L,不定芽诱导率为78.21%;IAA是影响不定根诱导的主要因素,因素影响的主次关系为IAA>MS>蔗糖>NAA,最适不定根诱导的培养基为1/2MS+NAA 0.3mg/L+蔗糖20g/L,不定根诱导率为94.4%.