菠萝皮中黄酮类物质的提取工艺研究

[目的]为菠萝皮的开发利用提供依据。[方法]以烘干后粉碎的菠萝皮为原料,乙醇为提取剂,采用超声波辅助法提取其中的黄酮类物质,通过单因素试验研究料液比、提取剂浓度、提取温度和超声时间对黄酮提取率的影响,并通过正交试验对提取工艺条件进行优化。[结果]单因素试验结果表明,黄酮提取率随料液比、提取剂浓度、提取时间的增加呈先升高后降低趋势,最佳料液比、提取剂浓度、提取温度和超声时间分别为1∶20,70%,75℃和40min;4个因素对黄酮提取率的影响依次为提取温度〉提取剂浓度〉料液比〉超声时间,最佳提取条件为料液比1∶25、提取剂浓度70%、提取温度70℃、超声时间40min,此条件下黄酮的提取率达0.543%。[结论]该研究确定了超声波辅助法提取菠萝皮中黄酮类物质的最佳工艺。     

香樟叶中黄酮类化合物的提取工艺

为了开发利用香樟叶资源,对超声波辅助提取香樟叶黄酮类化合物的工艺条件进行了研究,以乙醇为溶剂,考察乙醇浓度、料液比、超声时间、超声功率及温度对提取效率的影响,用L9(34)正交试验,确定了从香樟叶中提取黄酮的最佳工艺条件为超声时间40 min,乙醇浓度60%,料液比1∶20,超声温度70℃,超声功率400 W.此条件下提取的黄酮含量为10.437 mg/g.     

超声提取广西白木香叶黄酮的工艺研究

探讨白木香叶中黄酮的提取工艺,以广西白木香叶为原料,通过单因素试验,研究不同提取时间、超声功率、乙醇浓度以及料液比对白木香叶黄酮提取率的影响,并采用正交试验优化超声提取白木香叶黄酮的工艺条件参数。结果表明,超声提取白木香叶黄酮的最佳工艺条件为提取时间25 min、超声功率250 W、乙醇浓度80%、料液比1:40,在此条件下提取率为6.3096%;超声提取工艺优于常规提取工艺。     

构树叶中黄酮提取分离工艺的优化

[目的]研究干构树叶中黄酮的提取和分离工艺。[方法]采用超声波辅助乙醇提取构树叶中黄酮,在单因素试验基础上进行了正交试验,并对黄酮提取物进行了分离纯化。[结果]各因素对黄酮提取率的影响从大到小次序为料液比、超声时间、乙醇浓度、超声温度。在超声频率40 k Hz下,最佳提取工艺条件为料液比1∶30(g∶ml)、超声时间40 min、乙醇浓度50%、超声温度50℃,黄酮提取得率可达4.01%。在最佳条件下提取构树叶,减压浓缩提取液后加入石油醚萃取,水相用盐酸酸化至p H=2,再加入乙酸乙酯萃取,酯相减压回收溶剂得到提取产物,产物得率为5.94%,其中黄酮质量含量为35.36%。[结论]该工艺简单易行、稳定性好,提取物中黄酮含量较高。     

滨海白首乌黄酮超声辅助提取工艺优化

采用超声波协同有机溶剂提取了滨海白首乌中的总黄酮。首先,利用单因素试验研究了乙醇浓度(60%～100%)、液料比(10∶1～50∶1)、超声温度(30～70℃)、超声时间(10～50 min)以及超声功率(240～400 W)等因素对黄酮提取量的影响。在此基础上,采用正交设计优化了白首乌总黄酮的提取工艺。结果表明:乙醇浓度对黄酮提取量的影响最大,其次为液料比、超声时间和超声温度;最佳提取工艺组合为乙醇浓度90%、超声时间30 min、液料比20∶1、超声温度40℃。在该组合条件下,白首乌中黄酮提取量达到3.95 mg/g。     

超声波辅助热提艾蒿黄酮工艺优化

以乙醇为提取溶剂,先用超声波处理再加热提取,以黄酮提取率为指标,研究加热温度、加热时间、料液比、乙醇浓度、超声波功率、超声提取时间对艾蒿黄酮得率的影响,利用正交试验优选其提取条件。结果表明:超声波辅助热提艾蒿黄酮的最佳工艺条件为:加热温度为55℃,加热时间为50 min,料液比为1 g∶10 m L,乙醇浓度为50%,超声功率为250 W,超声提取时间为15 min。在此优化条件下,艾蒿中黄酮提取率达6.581%。超声波辅助热提艾蒿黄酮提取效果较好,该方法具有较好的应用前景。     

商洛连翘果实汉黄芩素提取方法研究

以商洛连翘果实为原料,采用甲醇法和乙醇法并以超声辅助提取,分光光度法检测汉黄芩素含量,正交试验确定优化提取工艺条件。实验表明:甲醇法提取汉黄芩素的最佳条件为甲醇浓度60%,料液比1:15,提取温度50℃,得率为0.537 mg.g~(-1),且影响得率的因素次序为:甲醇浓度料液比提取温度;而乙醇法提取汉黄芩素的最佳条件为乙醇浓度70%,料液比1:20,提取温度60℃,得率为0.189 mg.g~(-1),且影响得率的因素次序为:料液比乙醇浓度提取温度。本研究中甲醇提取法的效果明显优于乙醇提取法,结果可作为商洛连翘果实中汉黄芩素提取的技术参考。     

超声波辅助提取苹果皮中类黄酮的研究

以苹果为材料,乙醇溶液为溶剂,采用超声波辅助提取法提取苹果皮中类黄酮,考察超声温度、乙醇浓度、料液比、超声功率对苹果皮中类黄酮提取效果的影响,利用正交试验对类黄酮的提取工艺进行优化。结果表明:影响类黄酮提取效果的主次因素顺序为:超声功率超声时间乙醇浓度料液比。最佳工艺条件为:超声时间40min,料液比1∶25(g/m L),乙醇浓度60%,超声功率350W。     

正交试验优化超声波辅助法提取赤小豆黄酮技术研究

以赤小豆黄酮的提取率为指标,采用单因素和正交试验对超声波辅助提取工艺条件进行优选。结果表明:赤小豆黄酮最佳提取工艺条件为料液比1∶50(g·m L-1),乙醇的体积分数70%,超声时间70 min,超声功率100W,在此条件下黄酮提取率为0.581%,4个因素对赤小豆黄酮提取效果的影响大小为乙醇体积分数料液比超声功率超声时间。     

荷叶总黄酮的提取工艺研究

[目的]为荷叶的大规模开发利用提供技术保证。[方法]采用超声波辅助萃取法对荷叶总黄酮进行提取,并用分光光度法测定其含量,通过单因素及正交试验确定最佳提取工艺。[结果]当乙醇浓度达到60％时,总黄酮收率最大;液料比在10：1-30：1时,黄酮的收率随液料比的增大而增加较快,当液料比大于40：1后,黄酮收率趋于恒定;当作用时间为35min时,黄酮收率最大,但此时与30min相比,仅略微增加;提取时适宜的温度应为40℃;影响荷叶总黄酮收率的主次因素顺序为乙醇浓度〉超声时间〉液料比〉超声温度。[结论]荷叶总黄酮最佳提取工艺：将荷叶干粉按35：1的液料比加入浓度60％乙醇水溶液,浸泡24h,在超声波清洗槽中超声提取35min,超声温度35℃。在该条件下,荷叶总黄酮收率为13．68％。     

四川省食品动物源大肠杆菌mcr-1与ESBLs基因共转移分析

为了解四川省食品动物源大肠杆菌mcr-1耐药基因流行情况,及其与超广谱β-内酰胺酶基因(ESBLs)共存和共转移的特征,采用微量肉汤稀释法检测菌株对不同抗菌药物的敏感性;采用PCR检测菌株mcr-1,以及mcr-1阳性菌株中ESBLs基因类型;采用质粒接合转移试验分析了mcr-1与ESBLs基因共转移的耐药机制。结果显示:190株大肠杆菌的mcr-1检出率为36.84%,75.71% mcr-1阳性菌株中同时检出ESBLs基因,主要以blaTEM-1、blaCTX-M-55和blaCTX-M-14为优势基因;mcr-1阳性菌对氨曲南(ATM)、头孢噻肟(CTX)和多黏菌素E(COL)耐药率极显著高于mcr-1阴性菌(P<0.01);质粒转移率为47.14%,其中获得mcr-1和ESBLs基因共转移的接合子表现出与供体菌相同的耐药表型及耐药基因。综上,在四川省食品动物源大肠杆菌中,mcr-1与ESBLs基因共存现象广泛存在,且耐药基因易发生水平传播,对菌株多重耐药性的产生具有重要意义。     

青稞转录因子HvnANT1基因的克隆与表达分析

为探究HvnANT1基因在青稞粒色形成过程中的基因表达模式,以紫粒青稞‘涅如姆扎’和白粒青稞‘昆仑10号’为试材,利用简化基因组GBS(Genotyping-by-Sequencing)对青稞紫粒进行基因定位,克隆到HvnANT1基因,对其进行生物信息学分析。结果表明:1)在7H染色体的84.30—86.00 cM获得1个MYB类转录因子,命名为HvnANT1。2)该基因长1 033 bp,其完整开放阅读框为762 bp,编码253个氨基酸。HvnANT1蛋白分子量为27.14 kU,是亲水性的不稳定碱性蛋白且不存在跨膜结构,无信号肽。该蛋白的二级结构主要是由无规卷曲、α-螺旋、延伸链和β-转角组成,具有2个SANT结构域(分别位于第13—第63个;第66—第114个氨基酸)。3)同源比对与系统进化分析表明:青稞HvnANT1蛋白与大麦、乌拉尔图小麦、高梁、玉米、二型花、小米、水稻、土瓶草、车轴草和杨梅10种植物的ANT1蛋白序列相似性分别为100.00%、88.85%、54.64%、60.95%、60.82%、58.46%、57.61%、37.76%、36.05%和36.33%;这些序列都具有2个高度保守的2个SANT结构域;与大麦的亲缘关系最近,其次是与乌拉尔图小麦,与水稻最远。4)亚细胞定位结果表明,该基因定位在细胞核内。5)实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示:与籽粒颜色形成的乳熟早期和乳熟晚期相比,软面团期的HvnANT1基因在‘涅如姆扎’中表达量极显著上调,而在‘昆仑10号’中各时期的表达量较低且差异不显著;且软面团期的‘涅如姆扎’籽粒HvnANT1基因的表达量极显著高于‘昆仑10号’(P<0.01)。花青素合成相关的结构基因HvnCHI、HvnANS和HvnDFR与该基因表达量模式相似。综上,青稞HvnANT1蛋白结构中的SANT结构域在物种进化过程中比较保守;该基因定位在细胞核内,符合转录因子特性;HvnANT1基因表达模式与结构基因HvnCHI、HvnANS和HvnDFR相似,在籽粒颜色形成的软面团期表达量极显著升高。     

干旱胁迫下不同品种小麦4种功能基因的表达模式及相关生理指标分析

采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)对干旱胁迫下脂质转移蛋白基因(TaLTP1)、膨胀素基因(TaEXPB23)、水通道蛋白基因(TaAQP7)和果聚糖6-果糖基转移酶基因(Ta6-SFT)在4种小麦叶片中的表达情况进行分析;通过测定相对水分质量分数和果聚糖质量分数来判断小麦生长发育状况。结果显示:干旱胁迫48h内,4种基因在不同抗旱性小麦叶片中的表达模式不同,干旱敏感型小麦中4种基因的相对表达量先上升后下降,恢复到正常水平;干旱耐受型小麦中4种基因的相对表达量先上升后下降,但仍维持较高表达水平;干旱耐受型小麦具有较高的相对水分质量分数和果聚糖累积量。以上结果表明,4种基因参与小麦干旱胁迫应答,4种基因的表达模式可以作为鉴定小麦抗旱的分子指标。本研究可为准确快速地鉴定小麦品种抗旱性提供重要分子依据。     

苏州近郊4种不同森林群落稳定性研究

稳定性是一个评价群落结构与功能的指标,一直是生态学研究的热点。本文依据林分地上部分指标建立稳定体系,对苏州近郊4种人工林分,应用数学生态学方法,分析冬青针阔混交林、栎树针阔叶混交林、湿地松林和木荷林的林分稳定性。结果表明,多样性并不完全能够代表稳定性;4种林分群落稳定性主要因林分密度不同而异;稳定性依次为湿地松林＞冬青湿地松林＞栎树湿地松林＞木荷林。其中湿地松林可能会发展成为针阔混交林;木荷林中在生长过程中会因竞争产生限制,可能演替形成栎树—木荷混交林;2种针阔混交林在未来演替也可能向落叶阔叶、常绿阔叶混交林发展;该地区木荷林密度过大,稳定性较弱,应采取适当的抚育措施,提高其林分稳定性。     

绣线菊内生真菌的分离及对植物病原菌的抑制作用

采用组织分离法,以PDA培养基为分离培养基,从绣线菊的根、茎和叶中分离获得39株内生真菌。平板对峙结果表明, 21株活性菌株对6种植物病原菌（辣椒疫霉病原菌、番茄枯萎病原菌、苹果腐烂病原菌、苹果炭疽病原菌、葡萄灰霉病原菌、小麦赤霉病原菌）有不同程度的抑制作用,其中菌株XXT10对苹果腐烂病原菌、苹果炭疽病原菌、番茄枯萎病原菌、小麦赤霉病原菌的抑制率分别达到73.2%、72.5%、39.5%和42.7%。通过测得的ITS rDNA 序列与GenBank数据库中已知序列比对后该菌为链格孢属菌。生物学特性试验表明,该菌株在28～32℃时,选择PDA培养基,分别以乳糖和蛋白胨作为碳、氮源,酸碱度中性的条件下,菌落的生长状况最佳。     

小立碗藓PpLBD20基因敲除载体的构建及功能研究

LBD(Lateral organ boundaries domain)是植物中特有的基因家族.前期研究发现灰霉菌处理小立碗藓导致配子体中的PpLBD20上调表达,但PpLBD20的功能尚不明确.因此提取小立碗藓DNA,PCR扩增PpLBD20基因的上下游片段,依次插入PTN182载体,利用同源重组原理构建敲除表达载体,酶切和测序验证插入序列的正确性.通过工作浓度为20％的PGE 6000介导小立碗藓原生质体转化,筛选鉴定得到敲除PpLBD20后的突变体植株,观察到敲除后小立碗藓不形成茎叶体结构且配子体成丝状.结果为深入探究PpLBD20在小立碗藓的形态建成调控病原菌侵染的抗性作用奠定基础.     

TmFAD2和BnFAD3双基因载体的构建及转化株脂肪酸分析

必需脂肪酸亚油酸(18∶2)和亚麻酸(18∶3)在植物中的合成过程一直备受研究者的关注。本研究利用旱金莲中合成亚油酸的油酸脱饱和酶基因TmFAD2及甘蓝型油菜中合成亚麻酸的亚油酸脱饱和酶基因BnFAD3,在pRD400骨架载体的基础上,构建同时表达TmFAD2和BnFAD3的串联双价载体pSFF。通过农杆菌介导的花序浸蘸法完成pSFF对拟南芥哥伦比亚野生型的转化,观察发现转基因植株的第1对真叶有不同程度的畸形。按照畸形程度将其划分为4个等级,气相色谱分析4个等级叶片及其后代种子中脂肪酸的组成及含量,发现随着畸形程度的增高,叶片和种子中亚麻酸C18∶3含量都呈现降低的趋势。     

摘除眼柄与注射眼柄粗提物对凡纳滨对虾性腺发育相关基因表达的影响

利用荧光定量PCR技术,检测了眼柄粗提物对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)性腺发育相关基因(DMC1、VASA和VTG)表达的影响,探讨性腺抑制激素(GIH)在性腺发育过程中的调控机制,结果表明:DMC1和VASA只在凡纳滨对虾精巢和卵巢中表达;摘除眼柄后,精巢和卵巢中DMC1表达量均显著性降低(P0.05),而注射眼柄粗提物后精巢和卵巢中DMC1表达显著增高(P0.05);相反,摘除眼柄后,精巢和卵巢中VASA以及卵巢中VTG基因表达量显著增高,但注射眼柄粗提物后性腺中的VASA和卵巢中的VTG表达量显著降低。结果表明眼柄粗提物通过影响生殖相关基因的表达影响凡纳滨对虾的性腺发育。     

乌梅等20种中药对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性研究

【目的】观察乌梅Fructus mume等20种中药的体外抗胸膜肺炎放线杆菌Actinobacillus pleuropneumoniae活性.【方法】通过乙醇回流、水煎煮和超声波等方法对20种中药进行提取,采用二倍稀释法测定其对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性;并研究抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌活性.【结果和结论】乌梅、黄连Rhizoma coptidis、诃子Terminalia chebula、秦皮Cortex fraxini、地榆Sanguisorbae officinalis、虎杖Polygonum cuspidatum 6种中药提取物对胸膜肺炎放线杆菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)范围是6.25~50.00 mg/mL;大青叶Isatis indigotica、茵陈Artemisia capillaris、甘草Glycyrrhiza uralensis和白鲜皮Dictamnus dasycarpus 4种中药提取物的MIC范围是50.00~100.00 mg/mL;黄柏Phellodendron amurense、杜仲Eucommia ulmoides、金银花Lonicera japonica、柴胡Bupleurum chinense、蒲公英Taraxacum mongolicum、板蓝根Baphicacanthus cusia、栀子Gardenia jasminoides和黄芪Astragalus membranaceus等10种中药提取物的MIC100.00 mg/mL.联合抑菌试验结果表明,乌梅、黄连、诃子和虎杖两两联合抑菌指数(FICI)≤1,乌梅、虎杖分别与秦皮的FICI2.乌梅、黄连、诃子、虎杖、秦皮、地榆对胸膜肺炎放线杆菌均具有较好的体外抗菌活性;乌梅、黄连、诃子和虎杖两两联合为相加、协同作用;秦皮分别与乌梅、虎杖为拮抗作用.     

宁夏小麦Glu-A3与Glu-B3位点等位变异组成分析

低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)与小麦品质密切相关。为给宁夏小麦的品质改良提供参考,应用STS分子标记,对宁夏98份小麦品种Glu-A3和Glu-B3位点的等位基因变异类型组成进行检测和分析。结果表明,宁夏98份小麦品种Glu-A3位点存在Glu-A3a(4.0%)、Glu-A3b(2.0%)、Glu-A3c(55.1%)、GluA3d(10.1%)和Glu-A3e(28.5%)5种等位变异;Glu-B3位点存在Glu-B3a(2.0%)、Glu-B3b(8.1%)、Glu-B3c(5.0%)、Glu-B3d(7.1%)、Glu-B3f(21.4%)、Glu-B3g(2.0%)、Glu-B3h(15.3%)和Glu-B3i(13.3%)8种等位变异。宁夏参试品种共存在23种等位变异组合形式,其中引黄灌区存在18种组合类型,Glu-A3c/Glu-B3j(17.7%)和Glu-A3e/Glu-B3f(16.2%)组合类型较为普遍;宁南山区存在13种组合类型,以Glu-A3c/Glu-B3i(20.0%)组合类型为主。在参试的宁夏小麦品种中,对同一地区不同来源品种而言,改良品种的LMW-GS遗传多样性明显较引进品种和地方品种更丰富。