麦芽配比对麦芽汁品质的影响

麦芽汁品质的好坏会直接影响黑啤酒的质量。麦芽配比是影响麦芽汁品质的重要因素之一。从制取黑麦芽入手,选取不同品种的麦芽进行配比,分析其对麦芽汁品质的影响。试验结果表明:以普通麦芽、焦香麦芽、黑麦芽按92::6:2的比例混合糖化,得到的麦汁浸出物含量较高。     

麦芽配比及酵母对全麦黑啤酒品质的影响

在黑啤酒的酒酿造中,焦香麦芽和黑麦芽的添加量对黑啤酒的品质和风味有显著影响。为提高黑啤酒的产品质量,对不同麦芽配比及发酵菌种与黑啤酒的品质关系进行了研究。试验结果表明:以普通麦芽、焦香麦芽、黑麦芽按92∶6∶2的比例混合糖化后,加入0. 8%的宝啤酵母,于14℃下发酵4 d,并经过0～4℃下贮酒30 d后,所得到的黑啤酒色泽黑亮,泡沫细腻持久,麦芽香气浓郁,苦味适中,口感醇厚柔和,品质最好。     

改变啤酒酿造中锌离子含量的方法

麦芽是啤酒生产的主要原料,麦汁中的锌主要来源于麦芽.测定了5种大小麦麦芽及不同大小麦麦芽配比的麦汁中的锌离子含量.本试验在80kg大麦麦芽中加入10 kg小麦麦芽即可使麦汁中锌离子含量达到0.200mg·L~(-1)的正常范围.表明小麦麦芽中的锌离子含量比大麦麦芽高.因此在糖化时加入-定比例的小麦麦芽可提高麦汁中的锌离子含量.     

硒处理对麦芽及啤酒硒含量的影响

麦芽制作过程中，用硒溶液进行一次浸麦处理，以此麦芽酿造富硒啤酒，麦芽制作的优化试验表明，在第三次上水时用２００μｇ／ｍＬ硒溶液在２３℃下浸麦，发芽９６小时和三次上水时用３００μｇ／ｍＬ硒溶液在２０℃下浸麦，发芽９６小时，效果最好，前者麦芽含硒１０．８３μｇ／ｇ啤酒含硒０．１７μｇ／ｍＬ，后者麦芽含硒１０．４３μｇ／ｇ，啤酒含硒０．２０μｇ／ｍＬ，同时研究了硒处理对麦芽，麦汁。     

超高麦芽糖浆生产工艺的探讨

麦芽糖浆是淀粉糖中的一个重要品种。人们对麦芽糖浆的喜爱是由于麦芽糖具有热稳定性高,吸湿性低,防腐作用强,在体内吸收不受胰岛素控制等优点。因此,麦芽糖浆中麦芽糖的含量直接关系着麦芽糖浆优良性能的发挥。麦芽糖浆也称为饴糖浆,其生产在我国有着悠久的历史,但古老的生产方法所得制品的麦芽糖含量较低,不足45％。随着酶技     

大麦发芽的化学调控及其在麦芽生产中的应用

用乙烯利、赤霉酸作为麦芽添加剂,在浸渍过程中处理大麦种子,结果表明：1.0ppm赤霉酸、5.0ppm乙烯利,尤其是二者结合处理,能促进发芽种子的根芽生长和呼吸作用,加速种子贮藏物质的分解和转化;1000ppm左右的高浓度乙烯利强烈抑制发芽种子的根芽生长、呼吸作用和种子贮藏物质的分解和转化;用高浓度乙烯利与赤霉酸结合处理,虽然也显著抑制发芽种子的根芽生长和呼吸作用,但却能使种子贮藏物质的分解和转化达到或超过对照水平。这样,在麦芽工业上就能在保证麦芽品质的条件下,提高麦芽产量。研究表明,低浓度乙烯利及其与赤霉酸结合处理,能缩短麦芽制造时间,有被开发利用的可能性;高浓度乙烯利与赤霉酸结合处理,作为麦芽添加剂,在麦芽生产上,尤其是非啤酒用麦芽生产上及发芽饲料工业等行业上的应用,是值得深入研究的。     

热管换热器在麦芽干燥过程中的应用

计算表明与传统单层水平干燥炉相比，热管换热器应用于绿麦干燥可以节能，每吨麦芽的煤、水、电消耗分析降低０．１３ｔ，２ｔ和１０．５ｋＷ．ｈ；麦芽生产成本可降低６４．４元／ｔ。     

谷氨酸棒杆菌麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因的克隆与表达

从谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)基因组中克隆到麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因(treZ),将其插入大肠杆菌表达载体pRSET-B并转化宿主菌E.coli BL21(DE3)pLysS获得重组基因工程菌。经IPTG诱导表达,得到麦芽寡糖基海藻糖水解酶,溶解表达的目的蛋白约占胞内总蛋白的40%,有部分目的蛋白形成包涵体。经薄层层析与离子色谱共同检测证实,该麦芽寡糖基海藻糖水解酶(MTHase)与麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)共同作用于糊精溶液,可得到产物海藻糖,具有工业应用前景。     

海藻酸钙固定麦芽寡糖基海藻糖水解酶的研究

研究了一种用海藻酸钙包埋麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltooligosyltrehalosetrehalohydrolase,MTHase)的固定化新技术,比较了原酶与固定化酶的最适反应温度、最适反应pH值和热稳定性。结果显示:固定化酶的最适反应温度和稳定温度都由原酶的60℃提高到65℃;固定化酶的最适反应pH值较原酶的5.5降低到5.0。表明MTHase的固定化能有效地提高它的耐热性及耐酸性。这对在未来的海藻糖工业生产中,降低微生物的污染和增加淀粉的溶解度,在更高的反应温度条件下进行海藻糖的合成,提供了一个新思路。     

海藻酸钙固定麦芽寡糖基海藻糖合酶的研究

比较麦芽寡糖基海藻糖合酶(MTSase)与其固定化酶的最适反应pH值、pH稳定性、最适反应温度和热稳定性。结果表明,固定化酶的最适反应pH值(5.5)较原酶(6.0)低,最适反应温度(65℃)较原酶(60℃)高,pH稳定性和热稳定性均较原酶高。     

植物乳杆菌亚油酸异构酶基因在大肠杆菌中的表达和功能鉴定

应用基因重组表达技术将一个推定的植物乳杆菌亚油酸异构酶基因(pli18)克隆到pET-30a载体的T7启动子的下游,构建pET30-pli原核表达载体。经IPTG诱导和低温培养20h后,在其宿主菌E.coliBL21(DE3)中成功表达了可溶性的PLI18重组蛋白。通过Ni-NTA亲和层析纯化和酶反应产物的气相色谱检测表明,PLI18重组蛋白具有亚油酸异构酶活性,从而证明pli18基因为1个新的亚油酸异构酶基因。为亚油酸异构酶的进一步研究及其在农产品加工中的应用打下了基础。     

Cloning and Expression of One Fibrinolytic Enzyme from Bacillus sp. zlw-2

The gene encoding fibrinolytic enzyme from Bacillus sp. zlw-2 was cloned and sequenced （accession no. EU734749）, which was 1146 bp, encoded 381 amino acids and had 99% homology with Nattokinase YF308 and NAT. The genes encoding pre-pro-fibrinolytic enzyme （including signal peptide, propeptide, and mature peptide） and fibrinolytic enzyme （including mature peptide） were cloned into pET28a vector respectively and then transformed into Escherichia coli BL21 （DE3）. The recombinant ofpre-pro-fibrinolytic enzyme showed enzyme activity of 183 U mL^-1, while no detectable enzyme activity could be found from the recombinant of the mature peptide.     

刚地弓形虫GJS株微线体蛋白基因MIC3的克隆与原核表达

根据Genbank中编码MIC3的已知基因序列设计并合成一对引物,应用PCR技术对刚地弓形虫GJS株微线体蛋白基因MIC3进行克隆、表达及鉴定.结果表明:克隆的MIC3基因的开放阅读框与Genbank收录的MIC3基因在核菌酸和氨基酸水平上高度一致,说明弓形虫MIC3蛋白的高度保守性;构建的原核细胞表达质粒PET-MIC3表达产物分子量为46 ku,且经Western-blot显示可被猪抗弓形虫免疫血清识别.     

猪瘟兔化弱毒株E~(rns)基因在大肠埃希氏菌中的表达、纯化

将猪瘟兔化弱毒株Erns基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,经PCR和双酶切鉴定以及序列分析,表明已成功构建了重组质粒。将重组质粒转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中进行表达,经SDS-PAGE和Western-Blot检测,结果表明,融合表达蛋白的分子量约为55kD,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的45%。表达蛋白与兔抗CSFV多抗发生特异性反应,具有良好的反应原性。利用GST亲和层析柱对Erns融合蛋白进行了纯化。     

大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的原核表达、纯化及其活性研究

使用常规PCR法以大肠杆菌菌株ATCC 25922基因组为模板,克隆到该菌株的碱性磷酸酶成熟肽基因,并将其构建到原核表达载体pET-30a(+)的Bam HⅠ、XhoⅠ之间,获得重组表达载体pET-30a-EAP。并且我们将pET-30a-EAP转化到大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS中,经IPTG诱导表达后,获得大小为52ku的目的蛋白EAP。经试验证明该蛋白以可溶形式为主。进而,高效表达的重组碱性磷酸酶经亲和层析法纯化后被用于活性鉴定。pNPP的显色反应与去磷酸化试验证实来自ATCC 25922的重组碱性磷酸酶具有催化磷酸单酯水解活性,而且酶热稳定性高、有效工作温度范围大,与其他蛋白融合表达时仍保持酶活性。以上研究结果为大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的规模化生产及在免疫酶技术领域中的应用提供了重要的参考依据。     

小鼠Nanog基因原核表达载体的构建及表达

【目的】构建小鼠Nanog基因原核表达载体并进行表达，以期得到大量GST融合蛋白。【方法】根据GeneBank中的Nanog序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物，以含有Nanog基因片段的pNA992重组质粒为模板，经PCR扩增出918 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接，转化TGⅠ大肠杆菌，筛选阳性克隆，其扩增片段测序结果与原序列一致，表明原核表达载体pGEX-KG-Nanog已构建成功。提取pGEX-KG-Nanog质粒转化到BL21（DE3）表达菌株中，经IPTG诱导后收集菌体进行SDS-PAGE电泳鉴定，并优化其表达条件。【结果】在大肠杆菌中获得Nanog基因融合表达，主要以包涵体形式存在；融合蛋白的分子量为63 kD；以IPTG终浓度为0.8 mmol•L-1，诱导5 h后融合蛋白产量最高。【结论】小鼠Nanog基因在大肠杆菌中获得了高效表达，为今后Nanog蛋白的多克隆抗体制备奠定基础。     

绿盲蝽水溶性海藻糖酶ALTre-1基因原核表达、 纯化与酶学特性

【目的】在前期克隆了绿盲蝽水溶性海藻糖酶（ALTre-1）基因的基础上,以获得具有酶活性的重组蛋白,明确酶促反应的最佳pH值及最适温度,为绿盲蝽海藻糖酶分子调控机制及其抑制剂的应用研究奠定基础。【方法】将含有绿盲蝽ALTre-1基因的T载体经Nde I和Not I双酶切,构建ALTre-1基因原核表达载体（pET28a-ALTre-1）,表达载体经诱导表达和蛋白纯化,获得ALTre-1功能区纯化蛋白。在蛋白浓度为0.3 mg•mL-1的条件下,以海藻糖为底物,对纯化得到的重组Tre-1蛋白进行活性检测,确定其酶促反应的最佳pH值和最佳温度。【结果】ALTre-1基因在大肠杆菌中BL21中能够高效表达,纯化获得的重组蛋白在试验条件下有较高的海藻糖酶水解活性（（184.83±13.39）nmol•μg-1•min-1）。重组ALTre-1蛋白活性最适pH值为7.0（酶活性为（202.04±13.76）nmol•μg-1•min-1）,表明重组ALTre-1蛋白是1个在中性环境中具有最佳活性的海藻糖酶,同时重组ALTre-1蛋白酶活性最适温度为55℃（酶活性为（228.59±4.62）nmol•μg-1•min-1）。【结论】本研究克隆得到了ALTre-1全长基因,获得了具有海藻糖酶活的重组蛋白,该重组蛋白在pH 7.0、温度55℃条件下酶活性最高。