禽副粘病毒Ⅰ型鹅源分离株YG97和鸡源分离株Y98在体外培养细胞中的形态发生

用禽副粘病毒Ⅰ型鹅源分离株YG97和鸡源分离株Y98的鸡胚尿囊液毒感染原代CEF，制作超薄切片，运用透射电镜观察，结果显示，2株病毒引起CEF细胞器肿胀等轻微的超微结构改变，但不引起细胞的皱缩和裂解。结果表明鹅源YG97分离株和鸡源Y98分离株与NDV强毒株F48E8在致细胞病变特性上的差异。透射电镜观察结果还表明：鹅源分离株YG97鸡源分离株Y98在培养细胞上的形态发生与鸡新城疫病毒F48E8强毒株相似，是由细胞核复制的“纤丝样”结构出核孔在细胞浆内发育而成的。     

禽副粘病毒型鹅源分离株YG_(97)和鸡源分离株Y_(98)在体外培养细胞中的形态发生

用禽副粘病毒型鹅源分离株YG97和鸡源分离株Y98的鸡胚尿囊液毒感染原代CEF,制作超薄切片,运用透射电镜观察,结果显示,2株病毒引起CEF细胞器肿胀等轻微的超微结构改变,但不引起细胞的皱缩和裂解。结果表明鹅源YG97分离株和鸡源Y98分离株与NDV强毒株F48E8在致细胞病变特性上的差异。透射电镜观察结果还表明鹅源分离株YG97、鸡源分离株Y98在培养细胞上的形态发生与鸡新城疫病毒F48E8强毒株相似,是由细胞核复制的“纤丝样”结构出核孔在细胞浆内发育而成的。     

禽副粘病毒I型结构蛋白分析

鹅副粘病毒 YG97分离株、鸡源 V98分离株以及新城疫病毒 (NDV)F48E8、 LaSota和 C30毒株，鸽副粘病毒 YZPNF2分离株经鸡胚增殖纯化后，进行 SDS-PAGE电泳，结果显示 YG97和 Y98 2个毒株在 56kD处比另外 4个毒株多出一个条带。用单抗 2010株进行 Western blot转印，结果该单抗只对 YG97和 Y98 2个毒株的 56kD条带反应，证明这 2株病毒的结构蛋白与经典的新城疫病毒有着一定的差异。     

鹅副黏病毒病灭活苗与新城疫灭活苗免疫保护效果的比较

鹅副黏病毒病自1997年流行以来,在短短的几年内,已传播到全国许多省、市的鹅群,不但南方和中部多个省、市有此病的发生,东北和西北许多鹅群也暴发流行,该病已成为养鹅业危害较大的传染病之一,影响养鹅业的健康发展.由于鹅副黏病毒和鸡新疫病毒均属于禽副黏病毒Ⅰ型,被认为是鹅的新城疫,部分地区养殖户采用鸡新城疫Ⅰ系活苗和油乳剂灭活苗进行免疫,效果不太理想,用新城疫Ⅰ系活苗免疫鹅群还常导致不同程度的发病和死亡.本研究在成功研制鹅副黏病毒病灭活疫苗(YG97株)的基础上,进行了鹅副黏病毒病灭活疫苗(YG97株)与新城疫灭活苗(La Sota株)免疫保护效果的交叉比较试验,旨在为临床上该病的免疫预防提供一定的理论依据.     

一株鹅副黏病毒的初步分离及鉴定

试验从疑似鹅副黏病毒感染的雏鹅肝、脾中分离到一株病毒,经鸡胚培养试验、血清学检测、特异性试验、RT-PCR测定,初步证明该分离株为鹅副黏病毒。该毒株的成功分离为鹅副黏病毒病的进一步研究奠定基础。     

鹅副黏病毒的分离与鉴定

从鹅体内分离到一株副黏病毒（DG01株），该病毒具有血凝活性且血凝活性能被新城疫标准阳性血清和鹅副黏病毒阳性血清所抑制，能使SPF鸡胚、非免疫鸭胚和鹅胚100％死亡。电镜观察见病毒颗粒呈多形性，多为圆形有囊膜，直径在200nm左右；ELD50为10^8.6／ml，MDT为56h，ICPI为1．94。对DG01株通过RT-PCR方法，扩增出F基因，鉴定为基因Ⅶ强毒株，测序结果与CH2000同源率为91．8％，因此确定DG01株属于禽副黏病毒Ⅰ型（APMV-1）的基因变异强毒株。动物接种试验表明DC01株对鸭无致病性，对鹅、鸡、鸽具有100％的发病率和致死率。     

鹅Ⅰ型禽副黏病毒F基因重组质粒的构建及其DNA免疫

通过RT-PCR扩增出鹅Ⅰ型禽副黏病毒GPMV／QY97-1株F蛋白基因的cDNA，并将F基因cDNA克隆到含CMV启动子的pCI载体上，构建这一基因的真核表达质粒pC-GPMVF，以此质粒肌肉注射3周龄非免疫鸡，并分别于免疫后第2、4、6周通过ELISA方法检测抗体水平。结果证明，用重组质粒pC-GPMVF免疫鸡，能刺激机体产生抗Ⅰ型禽副黏病毒的特异性抗体和免疫应答。     

F一Ⅶ型鹅源禽副黏病毒的分离及其特性研究

从辽宁省某鹅场雏鹅体内分离到1株副黏病毒，该分离毒株具有血凝活性且血凝活性能被NDV标准阳性血清和鹅副黏病毒阳性血清所抑制，能使SPF鸡胚、非免疫鸭胚和鹅胚100％死亡；电镜观察见病毒颗粒呈多形性，多为圆形，有囊膜，直径200nm左右；ELD500为10^8.6／mL，MDT为56h，ICPI为1．94。通过RT—PCR扩增出F基因，鉴定为基因Ⅶ型强毒株，测序结果为HBS209，与CH2000的同源率为91．8％，从而确定分离毒株属于禽副黏病毒Ⅰ型(APMV—Ⅰ)的基因变异强毒株。动物接种试验表明，该毒株对鸭无致病性，对鹅、鸡、鸽的致病率和致死率均达100％。     

1株B亚型禽偏肺病毒的分离与鉴定

从山东省多个地区的商品肉鸡养殖场采集64份疑似病料,通过RT—PCR方法检测出37份禽偏肺病毒阳性病料,以此作为病毒分离材料接种SPF鸡胚,盲传至第7代时鸡胚生长明显迟滞。取阳性尿囊液在CEF中培养,呈现禽偏肺病毒典型细胞病变（CPE）：细胞变圆、悬浮,有合胞体形成。将分离株接种于Veto细胞及DF-1细胞均出现类似病变。对分离株F基因进行测序,并与GenBank中发表的部分代表序列比较。结果显示,与B亚型禽偏肺病毒的核苷酸同源性最高,为97．4％～99．3％;与A亚型禽偏肺病毒核苷酸同源性较低,为77．4％～78．1％;而与C亚型禽偏肺病毒核苷酸同源性最低,为69．5％～69．7％。基因分型显示分离株为B亚型禽偏肺病毒,将该毒株命名为禽偏肺病毒SDWF株。     

禽脑脊髓炎病毒HMM08株的分离鉴定及生物学特性研究

为明确禽脑脊髓炎(AE)病毒自分离流行毒株的生物学特性,以用于禽脑脊髓炎灭活疫苗的研制,以发病雏鸡脑组织为材料,进行SPF鸡回归试验、PCR检测、SPF鸡胚分离培养有限稀释纯化、特异性试验等,得到一株禽脑脊髓炎病毒,命名为HM08株,对该分离毒株的生物学特性进行研究的结果表明:该毒株纯净、无外源病毒污染,E1代病毒含量达到10~(5.56)EID_(50)/0.2 mL,E2代至E15代病毒含量稳定在10~(7.0)EID_(50)/0.2 mL以上;100倍稀释的E1代毒种,经卵黄囊途径接种6日胚龄SPF鸡胚,12 d内,引起AE特征性病变的病变率达100%;用E1代毒按照500 EID50/只对1日龄、7周龄的SPF鸡脑内接种,出现AE特征性病变的病变率达100%;以该毒制成的疫苗0.3 mL/羽份免疫鸡,能获得100%保护。表明HM08株是一株较好的AE疫苗候选毒株。     

MYNN基因在猪不同组织及肌肉中的表达规律

试验旨在研究myoneurin（MYNN）基因在猪不同组织中的表达特征及其在肌肉（背最长肌、股二头肌和腰大肌）、小脑、肝脏、胰脏、肾脏、胃、脾脏、肺脏组织中的发育性表达规律。采用实时荧光定量PCR技术研究猪MYNN mRNA在90日龄大白猪和马身猪的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小脑、小肠、胰脏、胃、股二头肌及脂肪共11个组织中的表达谱,以及在大白猪和马身猪1、90、180日龄3个发育阶段的肌肉、小脑、肝脏、胰脏、肾脏、胃、脾脏、肺脏组织中的发育性表达规律。结果表明,MYNN在猪的各种组织中广泛表达,且各组织间表达差异显著或极显著（P < 0.05;P < 0.01）;MYNN在大白猪和马身猪的肌肉、小脑、肝脏、胰脏、肾脏、胃、脾脏、肺脏组织中的不同发育阶段表达差异显著或极显著（P < 0.05;P < 0.01）,并具有特定规律,由此推测其可能在猪的这几种组织中发挥重要作用。MYNN基因的表达与组织、日龄及品种的遗传背景有关。本试验为研究猪MYNN基因的生物学功能提供了依据,但还需要深入的研究来探索其作用的具体机制,尤其是在骨骼肌发育中的调节机制。     

The Expression Characteristics of MYNN Gene in Different Tissues and Muscles of Pig

This study was aimed to investigate the expression characteristics of myoneurin (MYNN) gene in different tissues and its developmental expression in muscles (longissimus dorsi, biceps femoris and psoas major), cerebellum, liver, pancreas, kidney, stomach, spleen and lung tissues of pigs. The expression characteristics of MYNN mRNA in 11 different tissues including heart, liver, spleen, lung, kidney, cerebellum, small intestine, pancreas, stomach, biceps femoris and fat of Large White pigs and Mashen pigs at the age of 90 days and the developmental expression patterns in muscle, cerebellum, liver, pancreas, kidney, stomach, spleen at three strages (1, 90, 180 days) of Large White pigs and Mashen pigs were studied by Real-time PCR. The results showed that MYNN was widely expressed in various tissues of pigs, and there was significant difference among the tissues(P < 0.05; P < 0.01); The expression of MYNN in muscle, liver, pancreas, cerebellum, kidney, stomach, spleen, lung tissues were significant difference at three development stages of Large White pigs and Mashen pigs(P < 0.05; P < 0.01), and also had a specific rule, which indicated that it may play an important role in these pig tissues. The expression of MYNN gene could related to the tissue, age and the genetic background of breeds. The results of this study provided a better understanding of the biological functions of pig MYNN. Further studies are required to determine its molecular mechanisms, especially in the regulation of skeletal muscle development.     

猪PPARs基因组织表达特性的研究

以成年母猪为研究材料,采用RT-PCR半定量法对猪PPARα、β/δ和γ基因组织表达特点进行了研究。结果表明:在检测的18种组织中除胰腺组织外,3种PPAR亚型在其他17种组织中均有表达。表达量高低依次为PPARα,子宫绒毛膜>皮下脂肪>卵巢>大肠>脾脏>大脑>肾上腺>心脏>肺>小肠>脊髓>子宫蜕膜>胃>肝脏>背最长肌>膀胱>肾脏;PPARδ,子宫绒毛膜>卵巢>大肠>脾脏>肝脏>胃>皮下脂肪>大脑>肺>肾上腺>子宫蜕膜>脊髓>背最长肌>心脏>肾脏>小肠>膀胱;PPARγ,背最长肌>皮下脂肪>卵巢>脾脏>肺>大肠>膀胱>子宫绒毛膜>子宫蜕膜>心脏>胃>肝脏>肾脏>大脑>脊髓>肾上腺>小肠。3种亚型PPAR在卵巢和/或子宫绒毛膜中都有较高的表达,提示它们与猪的繁殖性能相关。     

佳米驴β-防御素aBD-1组织表达

为检测aBD-1mRNA在佳米驴体内可能的表达器官,根据已知aBD-1cDNA的全长序列设计一对预计扩增产物为266bp的引物,以佳米驴舌背表面、食管、胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、气管、胰腺、膀胱、子宫、心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏、淋巴结、卵巢组织中提取的总RNA为模板,采用反转录PCR（RT—PCR）技术检测佳米驴的上述器官内aBD-1mRNA的表达情况,同时以β-肌动蛋白（β-actin）基因作为内参。结果显示：aBD-1mRNA在佳米驴的舌、盲肠和结肠内有强的表达,在食管、胃、十二指肠、空肠、回肠、直肠、气管内有比较强的表达,在膀胱和子宫内有弱的表达,而在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、淋巴结、卵巢等实质性器官组织内无表达。     

鸭肝炎自然病例与鸭肝炎病毒人工发病病例组织病理学观察

到目前为止，对鸭肝炎I型作组织病理学研究的工作可分为下列几种：鸡鸭肝炎I型标准毒株人工发病雏鸭肝、脾、脑等多种器官作组织病理学观察；对鸭肝炎I型野外病例肝、脾、脑等作组织病理学观察；对鸭肝炎I型人工感染鸡胚肝脏等几种脏器作组织病理学观察等。国外Sandhu等还对鸭肝炎I型变 异株感染雏鸭作组织病理学观察。本文报道了对珠江三角洲有变异倾向的鸭肝炎I型自然病例和6株野毒人工发病病例的组织病理学观察结果，观察包括肝、脾、胰、脑、心、肺、肾、、腺胃、小肠、法氏囊等10种脏器，并对各器官的病变进行具体描述与统计。为国内外研究DHVI型变异株感染的组织病理学研究提供了更丰富详实的资料。     

高龄大熊猫多器官衰竭的病理学观察

本文观察了1只38岁高龄的大熊猫多器官衰竭的病理学变化。病理剖检显示，该熊猫主要表现为实质器官充血、水肿和出血性变化；组织病理学检查发现，全身实质器官（除心、肺、脑外）均发生明显萎缩，胃、肠、肝、胰、肾等发生水肿变性或出血；此外，还观察到心肌纤维坏死后的瘢痕形成。结果表明，老龄大熊猫的多器官衰竭的病理学变化与其他动物相似；高龄大熊猫也易患心血管系统疾病，且具有较经的组织修复能力。     

五指山猪与长白猪65 d胎儿组织MRFs家族基因的表达研究

 
以五指山猪和长白猪妊娠65 d胎儿腿部骨骼肌、背部骨骼肌、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠、胃、脑10种组织为材料,采用qPCR技术,检测和研究MRFs基因家族成员（包括MyoD1、Myf4、Myf5和Mfy6基因）在以上10种组织中的mRNA表达水平及差异。结果表明：（1）MRFs家族成员除肝、肾、肠组织以外,在五指山猪65 d猪胎儿组织中mRNA表达水平均高于长白猪相应组织中的表达水平（P<0.05）;（2）MRFs家族成员表达水平在腿肌和背肌中的表达普遍偏高,其他组织中表达较低（P<0.05）;（3）2个猪种在以上10种组织中MRFs家族mRNA表达水平的高低分布基本一致,其相对表达量顺序为：腿部骨骼肌＞背部骨骼肌＞肝＞肺＞胃＞脾＞脑＞肾＞肠＞心。     

草原红牛不同组织雄激素受体基因表达量检测及比较研究

采用实时荧光定量RT-PCR技术检测雄激素受体基因(Androgen receptor gene,AR)在草原红牛公牛和母牛多种组织中的表达情况,探讨该基因在草原红牛公牛和母牛不同组织中的表达差异.结果表明,AR基因在所检测的公牛和母牛的心、肝、脾、肺、肾、肠、胃及睾丸(卵巢)等8种组织中均有表达,且肝脏中的表达量高于其他组织;草原红牛公牛和母牛相同组织闻比较结果显示:AR基因在草原红牛公牛肝脏中表达量与母牛相比较差异不显著,其他不同组织间表达量均有显著差异(P<0.05),且公牛各组织中的表达量均高于母牛.本试验为深入研究AR基因的生物学功能及了解该基因对不同性别个体肉质性状的形成的作用机制奠定了基础.     

番鸭呼肠孤病毒弱毒株在免疫番鸭体内的分布及排毒规律

番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,DRV)B37弱毒株经肌内免疫1日龄雏鸭,应用RT-PCR检测病毒核酸,以阐明病毒在体内分布及排毒规律。结果表明,B37株免疫雏鸭后4h,即可在血液、心、肝、脾组织中检出DRV RNA;接种后8h,血液、心、肝、脾、肺、肾、胰腺均可检测到DRV RNA;接种后3d,喉头和泄殖腔棉拭子可检出DRV RNA;接种后14d,喉头和泄殖腔棉拭子已不能检出DRV RNA;接种后28d,肺、肾和胰腺均已不能检出DRV RNA;接种后42d,血和心脏已不能检出DRV RNA;接种后49d,所有组织均已不能检出DRV RNA。因此,DRV弱毒在血液、心脏中分布时间为接种后4h～35d,在肝、脾组织中分布时间为4h～42d;肺、肾和胰腺的分布时间为8h～25d;向外界排毒时间为3～14d。     

Differential expression of peroxisome proliferator-activated receptors alpha and gamma gene in various chicken tissues

The peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) are the members of superfamily of nuclear hormone receptors. A great number of studies in rodent and human have shown that PPARs were involved in the lipids metabolism. The goal of the current study was to investigate the expression pattern of PPAR genes in various tissues of chicken. The tissue samples (heart, liver, spleen, lung, kidney, stomach, intestine, brain, breast muscle and adipose) were collected from six Arber Acres broilers (8 weeks old, male and female birds are half and half). Semi-quantitative RT-PCR and Northern blot were used to characterize the expression of PPAR-alpha and PPAR-gamma genes in the above tissues. By semi-quantitative RT-PCR, the results showed the expression level of PPAR-alpha gene was higher in brain, lung, kidney, heart and intestine, medium in stomach, liver and adipose than in spleen, and it did not express in breast muscle. The expression level of PPAR-gamma gene was higher in adipose, medium in brain and kidney than in spleen, heart, lung, stomach and intestine, but it did not express in liver and breast muscle. Northern blot results showed that PPAR-alpha gene expressed in heart, liver, kidney and stomach, and the intensity of hybridization signal was the stronger in liver and kidney than in other tissues, however, PPAR-gamma gene only expressed in adipose and kidney tissues. The results of this study showed the profile of PPAR gene expression in the chicken was similar to that in rodent, human and pig. However the expression profile of chicken also have its own specific trait, i.e. compared with mammals, PPAR-alpha gene can not be detected in skeletal muscle and PPAR-gamma gene can be stronger expressed in kidney tissues. This work will provide some basic data for the PPAR genes expression and lipids metabolism of birds.