猪去核无透明带卵母细胞电融合参数的探讨

试验通过采用不同场强、电场时程和脉冲次数对去核的猪体外成熟卵母细胞电融合参数进行比较研究,观察细胞融合情况。结果表明,在电场时程30 μs、1次直流脉冲（DC）的情况下,电场强度0.8 kV/cm 时卵母细胞的融合率为94.7%,显著高于其他各组（P<0.05）;当电场强度为0.8 kV/cm、1次直流脉冲的情况下,电场时程60和90 μs时,卵母细胞融合率为86.5%和83.8%,差异不显著（P>0.05）,但显著低于30 μs时的电融合效率（P<0.05）;在电场强度为0.8 kV/cm,电场时程为30 μs的情况下,1次电脉冲激活卵母细胞的融合率（94.7%）和2次电脉冲的融合率（95.6%）无显著差异（P>0.05）,但两者显著高于3次电脉冲的融合率（81.7%）（P<0.05）。通过对各组进行比较,在电场强度为0.8 kV/cm、电场时程为30 μs、1次直流脉冲的电刺激可以对体外成熟的猪卵母细胞取得较好的融合效果。     

体细胞核移植生产转基因牛胚胎的研究

为了优化利用体细胞核移植生产转基因牛早期胚胎的体系,以携带绿色荧光蛋白-新霉抗性双标记基因的pMSCV质粒转染的胎牛耳成纤维细胞为供体,以体外成熟的牛卵母细胞为受体构建克隆胚,研究供体细胞的传代次数对转基因胚的影响和重构胚在不同电场条件下（电场强度、直流电脉冲次数）融合效率及其在不同体外培养系统中的发育效果。结果表明：传代5次的细胞做核供体较有利于转基因胚的发育;在电场条件为电场强度1.6 kV/cm、直流脉冲1次的融合率最高;负压单层细胞共培养体系中的转基因囊胚发育率较好,与未转基因体细胞核移植胚的发育相比无显著差异（P〉0.05）。     

牛卵母细胞的孤雌激活研究

本文探讨了透明质酸酶(HYA)的浓度和作用时间对牛体外成熟卵母细胞脱卵丘的影响,不同强度电脉冲 乙醇 6-DMAP对牛体外成熟卵母细胞的孤雌激活作用以及和乙醇 6-DMAP激活的比较。对电融合脉冲强度、脉冲次数进行了优化。结果表明:卵母细胞成熟培养22h,用0.20%HYA作用10min或0.50%HYA作用5min效果较好。在激活电压1.6kV/cm、20μs/次、间隔1s,脉冲次数为1次的条件下的激活效果较好,在此条件下与乙醇 6-DMAP激活相比较,孤雌激活胚胎的囊胚率分别为19.6%和26.9%,差异不显著。     

对牛卵母细胞孤雌激活条件优化的研究

本文探讨了HYA（透明质酸酶）的浓度和作用时间对牛体外成熟卵母细胞脱卵丘的影响,不同强度电脉冲＋乙醇＋6-DMAP对牛体外成熟卵母细胞的孤雌激活作用以及和乙醇＋6-DMAP激活的比较。对电融合脉冲强度和脉冲次数进行了优化。结果表明：卵母细胞成熟培养22h,用0．20％HYA作用10min或0．50％HYA作用5min效果较好。在激活电压1．6kV/cm、20μs／次、间隔1s,脉冲次数为1次的条件下的激活效果较好,在此条件下与乙醇＋6-DMAP激活相比较,孤雌激活胚胎的囊胚率分别为19．6％和26．9％,差异不显著。     

绵羊卵母细胞的孤雌激活

本文探讨了不同激活方法对绵羊卵母细胞的孤雌激活和其后的发育。结果表明 ,电激活可以激活绵羊卵母细胞孤雌发育到囊胚 ;Ca2 + 载体A2 3187和CHX组合 ,Ionomycin和 6 DMAP组合可以激活绵羊卵母细胞 ,其卵裂率与电激活相比差异显著。 7%乙醇激活绵羊卵母细胞 7min效果较好。不同场强、不同脉冲次数对绵羊卵母细胞激活都有影响 ,以 1.2kV/cm ,间隔 30 μs和 3次脉冲效果较好。而电激活与化学激活联合可以更好的激活绵羊卵母细胞     

牛卵母细胞体外成熟的影响因素

卵母细胞的体外成熟受多种因素的干扰和制约,不同种类、不同因素、不同的实验室条件等对卵母细胞的生长发育影响均很大。随着卵母细胞体外成熟技术的不断改进和完善,提高牛卵母细胞体外成熟的数量和质量以及充分利用良种资源等的研究就具有十分重要的意义。从体外成熟的作用机制、卵母细胞的获取、激素、成熟时间及人为操作等因素对牛卵母细胞体外成熟的影响进行了综述。     

GDNF、LIF和SCF对山羊卵母细胞体外成熟的影响

卵母细胞体外成熟(IVM)不仅是胚胎体外生产的关键一环,还可以为体细胞核移植提供受体卵母细胞.卵母细胞的成熟是一个复杂的动态过程,影响卵母细胞体外成熟的因素众多,成熟率通常为40%～80%,优化培养条件是提高体外培养卵母细胞成熟率及体外成熟卵母细胞质量的关键,大量的研究者通过在培养液中添加细胞因子来促进卵母细胞成熟[1].文献报道将胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、白血病抑制因子(LIF)、干细胞因子(SCF)用于小鼠、绵羊和人的细胞培养中取得了较理想效果[2],但未见将三种成分用于山羊的报道.本试验研究比较了不同浓度GDNF、LIF、SCF及其不同组合对山羊体外培养卵母细胞成熟率的影响,拟优化培养条件,提高卵母细胞的成熟率.     

不同浓度半胱氨酸对延边黄牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响

近年来,随着卵母细胞体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)以及细胞核移植技术的不断发展,牛胚胎的体外生产已经在几个不同的培养体系中获得了成功.但是,卵母细胞生长发育是一个非常复杂的过程,受多种因素的影响,有些因素的作用对于同种类动物的卵母细胞或体外/体内培养条件下的卵母细胞有着较大的差别.要找出各种动物卵母细胞体外培养的最佳方案以提高卵母细胞体外成熟率,尚有许多工作需要做.研究以延边黄牛卵母细胞为试验材料,试图探明不同浓度的半胱氨酸对延边黄牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响,现报道如下.     

不同浓度CO2对牛卵母细胞体外成熟和受精的影响

对牛卵巢卵泡内卵母细胞在不同浓度的CO2培养箱内体外成熟、体外受精后的卵裂率及胚胎体外发育进行了研究。结果显示,含5%小牛血清(CS)的TCM-199内的卵母细胞在2%CO2条件下培养20h后,达到第二次减数分裂期(MⅡ期)的卵子数明显高于在5%CO2条件下培养的卵母细胞数(P<0.05)。两种浓度的CO2条件下培养的牛卵母细胞体外受精后的卵裂率无明显差异,2%CO2浓度下培养的卵母细胞的囊胚发育率高于5%CO2浓度下培养的卵母细胞。     

不同激活条件和培养基对兔卵母细胞孤雌激活和胚胎发育的影响

对新西兰兔成熟卵母细胞在不同方式激活后的发育潜能和孤雌胚胎在不同培养体系中的发育进行了研究。结果发现电击激活和化学激活单独使用不能很好的激活兔卵母细胞,两次电击和化学激活配合使用能够较好的激活兔卵母细胞。通过比较发现B2培养基支持兔孤雌胚胎发育的能力显著高于其他培养基。试验建立了和体内受精时间过程相似的卵母细胞活化和培养系统,为兔的核移植技术优化了条件。     

法氏囊活性肽对新城疫弱毒疫苗免疫效果影响的研究

本研究通过给鸡两次注射法氏囊活性肽后,接种新城疫弱毒疫苗,观察法氏囊活性肽对新城疫弱毒疫苗免疫效果的影响,结果表明：纯化的法氏囊活性肽能够提高新城疫弱毒疫苗所诱导产生的血清抗体水平,试验组比对照组平均高１～２个滴度;使血清母源新城疫抗体水平维持较高水平;促进法氏囊的生长发育,对抗传染性法氏囊弱毒疫苗（ＩＢＤ）对法氏囊的损伤,和（或）促进损伤后的法氏囊的修复,对脾脏的生长发育没有影响。     

加快优良牧草种子基地建设实现生态建设与农业产业结构调整的双赢

国家西部大开发战略的实施，为包头市带来了良好的发展机遇，本文阐述了加快优良牧草种子基地建设与生态建设和农业产业结构调整二者的相互关系，并提出相关规划及措施，只有通过加快优良牧草种子基地建设将我市生态建设与农业产业结构调整有机的统一和协调发展，才能获得我市在实施西部大开发战略中生态建设与农业产业结构调整的双赢。     

猪带绦虫六钩蚴cDNA文库的构建及免疫原基因的筛选与克隆

研究避开庞大的猪带绦虫基因组DNA,以构建六钩蚴发育阶段的cDNA表达文库为策略,利用pSPORT1质粒表达载体首次成功构建了表达文库。经库容量、重组率和代表性测定,库容量达5.0×106,重组率100%,用特异性引物能扩增出六钩蚴发育阶段10ku基因、18ku基因和45W基因家族的A型、B型、C型转录本,说明文库质量高,代表性强。应用快速筛选质粒表达文库和克隆免疫原基因的技术,成功地筛选和克隆到TsO1基因,其完整阅读框架(ORF)为393bp。将其登录到GenBank(AY327451),经BLAST分析,证实是猪带绦虫六钩蚴发育阶段的1个新免疫原基因。     

固始鸡蛋壳质量性状分析

实验对56个固始鸡鸡蛋的蛋壳颜色、蛋壳重占总蛋重的比例和蛋不同部位蛋壳厚度进行测定。结果表明,浅褐色和灰色蛋壳颜色占绝大多数,没有灰白色和白色;蛋壳重占总蛋重的比例平均为10.97%;平均蛋壳厚度0.339mm,大多数鸡蛋锐端蛋壳厚度比钝端和中间高。     

微小RNA功能与癌症形成的关联分析

微小RNA（microRNA,miRNA）是长度约16~29 nt的非编码RNA。其功能是通过特异性基因沉默导致靶mRNA降解,抑制蛋白质的合成或在细胞分化、发育和凋亡等关键时期调控转录后的基因表达水平。大量研究结果表明,miRNA既可作为诱癌基因参与恶性肿瘤发生和发育过程,又可作为抑癌基因参与控制恶性肿瘤的形成。迄今,试图以治疗癌症为宗旨进行miRNA的功能与癌症形成的关联性研究已成为国内外的热点课题之一。因此,作者就miRNA产生机制、miRNA的生物学功能、与癌症相关的主要miRNA和癌症治疗的展望等问题进行了概括性的论述,其目的在于为从事miRNA的功能与癌症形成关联性研究的同行提供重要的参考资料,促进该项研究取得新进展。     

细胞永生化技术研究进展

细胞永生化作为细胞生物学研究的热点,在细胞实验中发挥很大的作用,使目的细胞永生化,建立永生化细胞系,可以更好地开展细胞实验。细胞永生化技术的成功应用,不仅为生物实验研究提供了有力的工具,也为有效准确地诊断疾病提供了新道路。本文在细胞永生化基本机制的基础上,就细胞永生化技术方法、检测方法以及存在的问题等方面研究进展进行概述。     

我国母猪生产现状及酵母培养物对母猪生产性能的影响

作者通过应用酵母培养物饲料添加剂饲喂哺乳母猪的试验研究,结果发现酵母培养物能够改善母猪窝产活仔数、仔猪断奶重、哺乳期间仔猪成活率等生产性能,同时与前人的研究报告做了对比,其试验结果具有相似之处。因此,本试验具有指导生产实践,提高母猪生产效率及猪场经济效益的作用。     

生态脆弱带沙化地流失规律研究

实验测定了我国生态脆弱带中4个地区沙样的土壤物理参数:土壤粒径、粒度分布和堆积密度,通过对实验数据的分析,指出了风沙的来源,并根据挟沙风的理论提出了防止风沙集成的办法。     

河西地区农户耕地流转现状及对策——以武威市凉州区为例

从河西地区农地流转这一视角出发，以武威凉州区38个乡镇、101个农村土地流转示范点为主要调研样本点，在深入调研及广泛收集、整理相关调研资料和调查问卷的基础上，借鉴国内外相关研究成果，归纳和总结了凉州区农地流转的发展现状，较为详细地分析了凉州区农地流转存在的问题，并结合凉州区的实际情况提出了相关对策。     

2020年世界生猪产业发展情况及2021年趋势

2020年世界猪肉总产量有较大幅度下降,为9788万吨,比2019年下降了4.02%,世界猪肉产量下降的主要原因是中国的生猪产能下滑。中国是世界上最大的猪肉生产国与进口国,2020年中国猪肉进口量为480万吨,比2019年上升了95.84%;占全球进口总量的46.31%,比2019年占比上升近17.30个百分点。预计2021年下半年中国生猪出栏量将呈持续增加的态势,年底生猪产能将达到非洲猪瘟疫情之前的水平。中国生猪产能的恢复将带动2021年世界猪肉产量的上升。