基于SRAP标记的百合部分种及品种遗传结构分析

 筛选了15对SRAP（Sequence-related Amplified Polymorphism）标记引物,对80个百合种及品种组成的样本进行标记,以所获的144个多态性位点和杂交试验获得的胚数,采用Pritchard分类方法对80个样本进行遗传结构分群分析。将试验样本划分为4个群,群体S1以亚洲百合杂种系的品种及原生种为主,群体S2以铁炮百合系的品种为主,群体S3以东方百合系的品种及原生种为主,群体S4则以OT杂交品种及原生种（S4）为主组成群,分群结果与传统百合杂种系的分类有一定的一致性;以S3群内部分样本杂交获得的胚数量作为亲和性指标与双亲群组分差异相关分析显示：群内双亲群组分差异绝对值与杂交获得胚的数量呈显著相关,表明分群及其组分能够比传统分类更好地体现出各样本间的主成分组成和遗传关系。据此,在百合杂交育种中可将分群以及组分作为亲本选配参考。     

八仙花萼片有色原生质体游离及应用

为建立八仙花（Hydrangea macrophylla）有色原生质体游离体系,以八仙花萼片为试验材料,分别对材料的预处理方式、酶液组分、酶解时间、纯化离心力等影响酶解的关键因素进行研究。结果表明, 预处理方式选择分离花萼片上下表皮法,纤维素酶和离析酶水平分别为4%和0.4%（质量体积分数）,甘露醇0.6 mol·L^-1,酶解液加热冷却后加入 0.1%（质量体积分数）BSA和10 mmol·L^-1 CaCl₂,酶解2 h,低温离心机4 ℃、1 426 r·min^-1离心5 min,为最优的八仙花萼片原生质体游离条件。利用所建的原生质体游离体系对4个不同品种的八仙花萼片进行有色原生质体游离,200× 镜下单视野内可获得13~35个有色的原生质体;对有色原生质体进行液泡的H⁺流测定,发现蓝色液泡较粉色液泡H⁺流的外排趋势明显,说明同一八仙花品种蓝色液泡的pH高于粉色液泡。     

卷丹LlAGO1基因的克隆及表达分析

以卷丹（Lilium lancifolium）叶腋组织为研究材料,利用RT-PCR和RACE技术克隆得到AGO1基因的cDNA全长,命名为LlAGO1。其全长4 014 bp,开放阅读框长3 687 bp,编码1 228个氨基酸残基,其编码蛋白分子量为135.36 kD,理论等电点（pI）为9.57。氨基酸序列分析表明LlAGO1含有PAZ和Piwi两个AGO1典型的结构域;信号肽预测结果表明LlAGO1蛋白不存在信号肽,为非分泌蛋白;亚细胞定位预测其主要定位于细胞核;与相关同源蛋白高度相似,且与芦笋AGO1a蛋白（XP_020260210.1）亲缘关系最近。qRT-PCR分析结果表明：LlAGO1在卷丹叶腋、鳞片、根、叶等不同组织均有表达,其中在叶腋中的表达量最高,叶片和根中的表达较弱;腋生珠芽形成过程中,LlAGO1仅在可形成珠芽的上部叶腋表达,且在珠芽形成时表达量最高,而在不形成珠芽的下部叶腋几乎不表达,推测LlAGO1可能与卷丹珠芽的形成相关。     

百合基本营养成分和活性物质研究进展

百合是重要的食用、药用和观赏多用途植物,其营养成分丰富,并含有多种活性物质。本文综述了国内外百合基本营养成分及多糖、甾体皂苷、生物碱、酚类化合物、黄酮类化合物等活性物质的研究进展,提出食用和药用百合研发中存在的问题,并展望了未来的研究方向。     

利用免疫磁性分离–PCR检测安祖花细菌性枯萎病病原菌

 根据地毯草黄单胞菌花叶万年青致病变种（Xanthomonas axonopodis pv. dieffenbachiae）的RAPD序列设计特异性引物,并对羧基化磁珠的结合性能进行检验,从而建立和优化了免疫磁性分离–PCR体系,对安祖花细菌性枯萎病进行早期检测。结果表明：1 mg磁珠对多克隆抗体最大吸附值为0.268 mg,进行免疫磁性捕获时免疫磁珠的最佳浓度是0.566 ~ 0.741 mg ?mL^-1。免疫磁性分离–PCR可以减少PCR反应中的抑制物质,对X. axonopodis pv. dieffenbachiae的检测灵敏度可以达到10 ~ 100 cfu ?mL^-1,比常规PCR检测灵敏至少100倍。     

百合部分种及品种系统进化关系的EST-SSR 标记分析

 从新开发的百合EST-SSR标记引物中筛选了19对多态性较高的引物,对百合22个原生种和74个品种进行了标记分析,依据各样品间的Jaccard’s遗传距离,用MEGA 5.05构建系统树,并用主坐标分析对试验样品进行类群划分。系统树显示：原产中国的原生种首先分化为两个类群：类群Ⅰ包括卷丹（Lilium lancifolium）、渥丹（L. concolor）、毛百合（L. dauricum）、川百合（L. davidii）、大花卷丹（L. leichtlinii var. maximowiczii）、大花百合（L. concolor var. megalanthum）、淡黄花百合（L. sulphureum）、山丹（L. pumilum）、百合（L. brownii var. viridulum）、兰州百合（L. davidi var. unicdor）等,其中一些为亚洲百合杂种系的起源亲本及麝香百合杂种系的亲本,推测由这些种杂交衍生出亚洲百合杂种系、麝香百合杂种系及LA系;类群Ⅱ包括宜昌百合（L. leucanthum）、湖北百合（L. henryi）、岷江百合（L. regale）等喇叭百合杂种系及东方百合杂种系的亲本,分别衍生出喇叭百合杂种系、东方百合杂种系及OT系,与已有文献记载基本相符。用NTSYS-pc 2.11a作主坐标分析,结果将供试材料分为亚洲百合杂种系、东方百合杂种系、OT系、LA系、原生种等类群,与已知分类关系基本相符。     

岷江百合悬浮细胞系的建立及植株再生

 以岷江百合（Lilium regale Wils.）颗粒细小、结构松散的乳白色愈伤组织为起始材料,接种在MS（NH4NO3含量减半）+ 2.0 mg · L-1 picloram + 30 g · L-1蔗糖液体培养基上,在25 ℃黑暗条件下振荡（100 r · min-1）培养10 ~ 20 d,建立分散性好、均匀、生长迅速的悬浮细胞系。在悬浮细胞系培养过程中研究了不同参数对其生长的影响,结果表明：在40 mL培养液中接种量为0.5 g（鲜样质量）,18 d继代1次,继代时保留1/3体积的旧培养液有利于其细胞增殖。将悬浮细胞转移到1/2MS + 30 g · L-1蔗糖的再生培养基上成功获得再生植株。     

青花菜相同亲本的DH与F2群体遗传多样性的比较

以表型差异明显的两个青花菜(Brassica oleracea var.italica)高代自交系为材料杂交获得F1,通过游离小孢子培养技术和人工自交方法,分别构建了由176个DH系组成的DH群体和由176个单株组成的F2群体。采用性状分离分析和群体遗传多样性分析方法,对两个群体13个主要农艺性状的平均值、变异系数及性状分离区间等遗传表现进行分析。结果表明:13个主要农艺性状均是受多基因控制的数量性状,在DH群体和F2群体中均发现了正向和负向两个方向的超亲基因型,两群体的平均变异系数和遗传多样性指数相近。可见,通过DH技术育种不仅可以加快亲本的纯化进程,而且可获得广泛分离的育种资源,从而提高育种效率。     

百合肌动蛋白基因lilyActin 的克隆与表达分析

 为了在百合功能基因表达研究中选择一个理想内参基因,依据岷江百合cDNA 文库所获得的百合肌动蛋白（Actin）基因的EST 序列,采用RACE 技术进行该基因cDNA 全长克隆,并利用实时荧光定量PCR 分析其在不同组织中的表达模式,获得百合肌动蛋白基因cDNA 全长序列（GenBank 登录号：JX826390）,命名为lilyActin。该基因cDNA 全长1 367 bp,其中,5′非编码区91 bp,3′非编码区233 bp,开放读码框1 134 bp,编码377 个氨基酸。序列比对发现,该基因与其它15 种植物肌动蛋白核苷酸序列的相似性均在80%以上,氨基酸序列的相似性达98%。进化分析显示,百合肌动蛋白与郁金香肌动蛋白的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR 结果显示,该基因在百合的花蕾、叶片和鳞片组织中恒定表达,表明相对于其他物种的内参基因,lilyActin 更适宜作为百合属植物的内参基因。