甘薯抗疮痂病多胺与吲哚乙酸代谢的研究

研究不同抗性甘薯品种受疮痂病菌侵染前后多胺和吲哚乙酸代谢变化结果表明 ,感染疮痂病菌后抗病与感病品种甘薯叶片中吲哚乙酸含量和多胺氧化酶活性降低 ,多胺总量及腐胺含量增加 ,腐胺 / (精胺 亚精胺 )比值升高 ,感病品种变化幅度高于抗病品种。疮痂病菌侵入后感病品种甘薯叶片中绿原酸含量下降 ,吲哚乙酸氧化酶和过氧化物酶活性升高 ,而抗病品种则相反。     

干旱胁迫对巨菌草幼苗水分状况和渗透调节物质的影响

为明确巨菌草幼苗对干旱胁迫的适应性,在盆栽控水条件下,对巨菌草幼苗的水分状况和渗透调节进行了干旱胁迫响应研究。结果表明,干旱胁迫后土壤含水量呈下降趋势,且各期间(胁迫4~5 d除外)差异显著(P0.05)。干旱胁迫过程中巨菌草幼苗的含水量、相对含水量和水势均呈下降的趋势,可溶性蛋白含量呈现先升高后降低趋势,而游离氨基酸和脯氨酸含量则表现显著上升趋势。这些指标反映出巨菌草幼苗对干旱环境的适应性变化,是其抵御逆境的一种积极调节机制。     

早晚熟油菜的RAPD分析及特异片段的克隆

以油菜晚熟植株(RG-8)及其早熟突变株系(RG-8M)叶片为材料,利用优化的RAPD反应体系对145条10 bp的随机引物进行了筛选,其中S265扩增得到1条RG-8特异性片段.将这条差异片段回收、克隆及测序,获得686 bp的序列.序列分析结果表明,这个片段与白菜型油菜和萝卜中的部分核苷酸序列同源性较高,均达到80%以上.由这个序列推导出的氨基酸序列与拟南芥中的shikimate kinase(莽草酸激酶)具有66%的同源性.该RAPD标记可以用来作为区分早晚熟油菜的-个指标.     

不同抗性甘薯品种感染疮痂病后光合机理的研究

研究了田间栽培条件下感病薯种“金山1255”和抗病薯种“广薯88-70”染甘薯疮痂病后的光合机理。结果表明,染病后感、抗病品种叶绿素均被降解,叶片膜不饱和脂肪酸含量、不饱和指数、叶绿体膜流动性均降低,叶绿体Ca2 -ATP酶和Mg2 -ATP酶活性均下降,气孔导度、净光合效率、蒸腾速率均下降,但感病品种下降幅度比抗病品种大;胞间CO2浓度在抗病品种中下降,而在感病品种中略有上升;感、抗病品种的叶绿体超微结构都发生了变化,但感病品种受到的伤害程度远大于抗病品种。     

TeiR融合蛋白分离及多克隆抗体的制备

提取睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)基因组DNA,PCR扩增teiR基因,将扩增产物克隆到pET28a中,经酶切验证后获得teiR基因表达载体pET28a-teiR.将重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,添加终浓度为1 mmol.L-1的IPTG进行诱导,提取细菌总蛋白进行蛋白的SDS-PAGE电泳.并根据融合蛋白特性,利用Ni-NTA Spin Column对TeiR融合蛋白进行分离纯化,经分离纯化后的重组蛋白在SDS-PAGE上呈现出单一条带.进一步以获得的TeiR融合蛋白为抗原,制备兔抗TeiR多克隆抗体,经ELISA测定该抗体的效价为1∶10000,该抗体与睾丸酮丛毛单胞菌天然TeiR蛋白反应良好,说明该抗体特异性良好.     

不同抗性甘薯品种感染疮痂病后的细胞超微结构

在甘薯疮痂病胁迫下,抗病性不同的甘薯品种金山1255(感病)和广薯8870(抗病)染病后,叶片细胞的超微结构都发生了变化,最敏感的部位均是细胞膜;活性氧产生的两个主要部位(叶绿体和线粒体)也受到了不同程度的攻击;感病品种的叶绿体和线粒体外膜外突成致密的小球,产生了大量的吞噬体,抗病品种则产生了大量用于修复细胞膜的高尔基小泡.     

疮痂病对甘薯叶片蛋白质及核酸代谢的影响

利用具有不同抗病性的甘薯品种研究了接种疮痂病菌前后甘薯叶片氮代谢生理指标方面的变化.结果表明:感染疮痂病菌后,感病品种叶片中的核酸总量及RNA含量降低,核糖核酸酶(RNase)活性增强,游离氨基酸(FAA)总量增加,蛋白酶活性升高,而抗病品种则相反.另外,抗、感病品种叶片中的可溶性蛋白含量和硝酸还原酶(NR)活性都降低,且感病品种的变化幅度大于抗病品种.上述结果可作为鉴别品种抗性的生理指标.     

盐胁迫对发芽水稻种子质膜透性及物质转化的影响

盐（NaCl）胁迫下水稻发芽种子的细胞膜透性增加，细胞伤害率加大，胞内K^ 、Na^ 外渗量增加：淀粉酶活性下降，尤其是α-淀粉酶活性迅速降低，使淀粉水解速率减慢，可溶性糖含量降低，淀粉贮藏组织中淀粉粒形象较密致；同时蛋白酶活性降低，蛋白质转化速率下降，糊粉层胞质中蛋白质残留量增多，干物质消耗减少。耐盐品种“119”水解酶活性受抑程度小于不耐盐品种“78130”，而贮存物质转化速率高于不耐盐品种“78130”，这表明水稻品种耐盐性与上述指标有密切相关关系。     

甘薯抗疮痂病的活性氧代谢研究

采用田间栽培，研究抗疮痂病不同的两个甘薯品种金山1255(感病品种)和湘薯88—70(抗病品种)染病后活性氧代谢变化。研究表明，在甘薯疮痂病胁迫下，甘薯叶片过氧化氢、超氧阴离子自由基等活性氧积累，且感病品种的积累量高于抗病品种。清除活性氧的酶系统，包括超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和抗坏血酸过氧化物酶活性有不同程度下降，其中以感病品种的变化幅度较大。但是过氧化物酶的活性在感病品种中大幅度上升。在感病过程中，保护性非酶物质抗坏血酸含量、类胡萝卜素含量呈先升高后下降趋势；谷胱甘肽含量在感病品种中呈下降趋势而在抗病品种中呈先下降后上升趋势。叶片膜脂过氧化水平加剧，丙二醛含量增加，质膜透性增大。     

植物线粒体和质体双定位蛋白质的带电特性分析

蛋白质亚细胞定位分析是揭示蛋白质功能的关键步骤。1个蛋白质分子能被定位到2个亚细胞位置,这一现象被称为蛋白质的"双定位"。本研究首先从Uniprot、MitoP2、MGI、TAIR、DBMLoc等蛋白质数据库及已发表文献中收集双定位于线粒体与质体的植物蛋白质数据,共获得703个双定位蛋白质,组成测试数据集。再从Uniprot数据库中选取唯一定位于线粒体的829个和唯一定位于质体的6 376个植物蛋白质,组成参照数据集,分析双定位于线粒体与质体的植物蛋白质的带电特征。结果表明,与单定位于线粒体或质体的植物蛋白质相比,双定位线粒体与质体的植物蛋白质具有更低的净电荷量;此外,双定位蛋白质电荷分布较为集中对称,线粒体蛋白质次之,质体蛋白质最为分散。本文研究结果将为揭示植物蛋白质双定位的分子机制奠定理论基础。