果蔗不同器官在不同生育期的同工酶聚类相关分析

为了解过氧化物酶(POD)和酯酶(EST)同工酶在果蔗生长中的变化规律,本研究选择不同的取样时期和植株不同器官，对8个果蔗品种利用垂直平板聚丙烯酰胺电泳得出的叶片、根组织不同生育时期POD、EST同工酶酶谱进行聚类分析，并检测其相关性。结果表明：（1）不同品种间同工酶谱的遗传相似系数存在差异，特别是外引黑皮果蔗(Badila)与中国地方品种之间存在着一定的遗传差异；（2）不同生育时期叶片或根部的POD同工酶和EST同工酶酶谱的聚类图都存在着差异；（3）叶片中的POD、EST酶谱在各个生育时期均达到极显著相关。说明叶片是这两种酶基因表达的最重要活性部位，因此叶片可以作为同工酶分析较为稳定和适宜的采样部位。     

马蓝基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

以马蓝为研究材料,对马蓝基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化.结果表明,在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质,采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类,可以得到高质量的马蓝基因组DNA.电泳检测结果表明,所获得的DNA完整,无降解,完全可以满足RAPD等分子标记分析的需要.同时对马蓝RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化,建立了适合马蓝RAPD分子标记的最佳反应体系,即20 μl反应体系中含有1.25 U TaqDNA聚合酶,0.25 mmol/LdNTP,2.5mmol/L Mg2+,50 ng模板DNA,1.0 μmol/L引物;反应程序中最佳退火温度为38℃.     

早晚熟油菜的RAPD分析及特异片段的克隆

以油菜晚熟植株(RG-8)及其早熟突变株系(RG-8M)叶片为材料,利用优化的RAPD反应体系对145条10 bp的随机引物进行了筛选,其中S265扩增得到1条RG-8特异性片段.将这条差异片段回收、克隆及测序,获得686 bp的序列.序列分析结果表明,这个片段与白菜型油菜和萝卜中的部分核苷酸序列同源性较高,均达到80%以上.由这个序列推导出的氨基酸序列与拟南芥中的shikimate kinase(莽草酸激酶)具有66%的同源性.该RAPD标记可以用来作为区分早晚熟油菜的-个指标.     

福建山药种质资源遗传多样性的RAPD分析

山药（Dioscorea polystachya Turcz．），又名薯蓣，为一年生或多年生缠绕性藤本植物，原产我国福建、广东、台湾等省以及东南亚一带，是重要的药食两用植物资源。《本草纲目》将其功效概括为”益肾气，健脾胃，止泄痢，代痰涎”。但长期以来，生产上和市场上存在同名异种或同种异名的现象，严重干扰了山药种质资源的推广与开发。福建省作为山药的原产地之一，研究福建山药资源遗传多样性对山药的引种育种、     

睾丸酮丛毛单胞菌teiR基因载体构建及在大肠杆菌中的表达

提取睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)基因组DNA,利用PCR扩增teiR基因,将扩增产物克隆到pKtac2(含强启动子tac)和pK18中,构建重组质粒pKtac2-teiR和pKteiR100。将重组质粒分别转化大肠杆菌(Escherichia coli)HB101, 提取细菌总蛋白,ELISA测定细菌总蛋白中teiR基因的表达量,结果表明: 含tac强启动子的pKtac2-teiR重组质粒具有更高的转录活性；将p6(含3a-HSD/CR基因)分别和重组质粒(pKtac2-teiR和pKteiR100)共转化大肠杆菌(Escherichia coli)HB101, 测定细菌总蛋白中3a-HSD/CR 和teiR基因的表达量,结果表明: 在大肠杆菌中teiR可以明显促进3a-HSD/CR 的表达, pKtac2-teiR与p6共转化后teiR基因的表达量比pKteiR100与p6共转化后teiR基因的表达量高,但是pKtac2-teiR与p6共转化后的3a-HSD/CR的表达量低于pKteiR100与p6共转化后的3a-HSD/CR的表达量。     

品种多点试验中最优地点数和重复次数的确定

本文给出几个确定品种多点试验中最优地点数和每一地点内各参试品种最优重复小区数的公式，还给出实例．     

我国南方稻区早灿品种产量及农艺性状的演变

本文分析了我国南方稻区不同年代育成并大面积推广的23个早籼品种产量及农艺性状的演变趋势。结果表明：在早籼品种更替中，单株产量、每穗粒数、结实率显著提高；生育期延长、植株增高；单株有效穗数、主穗长、千粒重和叶片长宽趋于稳定。决定早籼品种单株产量的主要因素是每穗粒数。育种上，应主攻穗粒数，适当增加株高和穗长，在增加株高的同时，重点对基部节间的有效选择，以增强抗倒性。     

一个大豆孢囊线虫抗性相关基因RGA的克隆

大豆是主要的油料作物,起源于中国,在我国种质资源十分丰富。大豆孢囊线虫(SCN)(HeteroderoglycinesIchinohe)是一种土传的定居性内寄生线虫,不易防治,常引起大豆黄萎病等病害,是大豆生产上危害最大的病害之一。大豆孢囊线虫病生理小种多达十几种,在我国,大豆孢囊线虫病病原主要为3、4号生理小种。大豆抗孢囊线虫的研究一直是世界上大豆抗病育种研究的热点之一。在本课题的前期研究中,根据已克隆的植物抗孢囊线虫病基因的保守序列设计引物,对经常规鉴定为抗(感)孢囊线虫3号生理小种的15个大豆品种基因组DNA进行PCR扩增,在大豆抗病品种中获得一条大豆抗孢囊线虫的特异条带。本研究在此基础上利用该对引物,对高抗孢囊线虫3号小种的北京小黑豆基因组DNA进行扩增,并克隆了特异扩增片段,命名为RSCN3,经测序及BLAST分析,发现其DNA序列与GenBank、EMBL、DDBJ、PDB中的大豆似受体激酶RHG4、水稻TMK(leucinerichprotein,receptor-likekinase)基因等均有80%以上的同源性。根据该DNA序列推测其氨基酸序列,在其序列中共找到21个亮氨酸,将该序列与蛋白质序列同源性进行比较,结果发现与植物中的受体激酶、富含亮氨酸重复的蛋白激酶有较高的同源性。因此推测RSCN3克隆片断为一个与受体激酶有类似作用的抗病相关基因的RGA,并将该序列登录到GenBank中,登录号为:AY580161。     

马蓝基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

摘 要：以马蓝为研究材料，对马蓝基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化。结果表明，在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质，采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类，可以得到高质量的马蓝基因组DNA。电泳检测结果表明，所获得的DNA完整，无降解，完全可以满足RAPD等分子标记分析的需要。同时对马蓝RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化，建立了适合马蓝RAPD分子标记的最佳反应体系，即20μl反应体系中含有1.25UTaqDNA聚合酶，0.25mmol/LdNTP，2.5mmol/LMg2+，50ng模板DNA，1.0μmol/L引物；反应程序中最佳退火温度为38℃。