山羊TNNT3基因可变剪切及其对骨骼肌细胞分化的作用

【目的】快速骨骼肌肌钙蛋白T（fast skeletal troponin T3,TNNT3）作为肌钙蛋白(troponin, Tn)家族成员,调节横纹肌收缩、参与骨骼肌的生长发育并影响家畜肉质性状。通过获得山羊TNNT3基因的可变剪切体,分析山羊TNNT3基因可变剪切的表达模式及其在肌细胞分化中的作用,深入解析TNNT3基因在山羊骨骼肌生长发育过程中的作用机制。【方法】基于NCBI已公布山羊TNNT3基因（NM_001314210.1）和牛TNNT3基因（XM_010821200）mRNA序列,使用软件Primer Premier 6.0设计引物,以简州大耳羊胚胎期和出生后7个阶段骨骼肌为试验材料,克隆测序获得山羊TNNT3基因的CDS区可变剪切体,利用软件ORF Finder、EditSeq、DNAMAN、ClustalW和MEGA_X_10.1.8等对序列进行生物信息学分析;进一步设计实时荧光定量（real-time PCR,RT-qPCR）及半定量引物,研究TNNT3基因剪切体在7个不同组织（背最长肌（longissimus dorsi muscle,LD）、半膜肌（semimembranosus muscle,SM）、心、肝、脾、肺、肾）和7个发育阶段（胚胎期E75、E90、E105和出生后B3、B45、B150、B300）肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中表达模式;此外,对转录本TNNT3_3进行体外编码能力检测确定其具有编码蛋白的能力,并在山羊骨骼肌卫星细胞（skeletal muscle satellite cells,MuSCs）中过表达,观察细胞形态变化以及检测标志基因的表达变化,研究其对山羊MuSCs分化的作用。【结果】①TNNT3（NM_001314210.1）CDS区全序列主要含有18个外显子,其中外显子16/17相互排斥,转录后单一表达。克隆发现山羊TNNT3基因 5个新转录本（TNNT3_1—5）,其外显子数分别是15、15、20、16、14。②生物信息学分析结果显示山羊TNNT3基因核苷酸序列和氨基酸序列与绵羊、牛、猪等哺乳动物具有很高的一致性,而与鱼类和爬行类动物的一致性较低,说明TNNT3基因序列在哺乳动物高度保守。③TNNT3 mRNA在背最长肌、半膜肌、心、肝、脾、肺、肾7个组织中都有表达,其中在骨骼肌中高度富集(P < 0.01),心脏及肺次之,其余组织中较低;TNNT3 mRNA在背最长肌和半膜肌中的表达始终处于一个动态变化中,胚胎期TNNT3在半膜肌的表达量高于背最长肌（P<0.05）;出生后则背最长肌中高于半膜肌（P<0.05）。④山羊TNNT3基因转录本TNNT3_3重复出现保守的外显子9—11（138bp）,体外翻译实验显示其可编码蛋白且蛋白大小与预期基本相符（37 kD）;相较于对照组,在山羊MuSCs中过表达该转录本使肌分化标志基因Myomaker、MyoG和MyH4 mRNA极显著升高(P < 0.01)。【结论】获得了山羊TNNT3基因具有完整CDS区5个新可变剪切体,TNNT3主要在肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中高表达,在哺乳动物中高度保守且促进成肌分化。初步表明TNNT3基因在动物肌肉生长发育中具有重要的生物学功能。     

发酵棕榈叶对山羊养分摄入量、瘤胃发酵及氮代谢的影响

文章旨在探讨全混合日粮中发酵棕榈叶的水平对山羊养分摄入量、瘤胃发酵指标及氮代谢的影响。试验将平均体重为（35.67±1.23）kg的168头山羊随机分为3组，每组4个重复，每个重复14头。T1组山羊饲喂20%棕榈叶的全混合日粮，T2和T3组山羊饲喂10%和20%发酵棕榈叶的全混合日粮（分别用50%和100%发酵棕榈叶替代棕榈叶），试验为期6周。结果：10%发酵棕榈叶组山羊有机物、粗蛋白质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维摄入量均显著高于0%和20%发酵棕榈叶组（P＜0.05），同时干物质摄入量显著高于0%发酵棕榈叶组（P＜0.05）。10%和20%发酵棕榈叶组山羊粗蛋白质、有机物、干物质及纤维（中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维）表观消化率均显著高于对照组（P＜0.05）。T1组山羊瘤胃乙酸、丁酸、甲烷浓度及乙酸与丙酸比值均显著高于T2和T3组（P＜0.05）。T3组瘤胃氨氮浓度显著高于T1组（P＜0.05），同时T2和T3组瘤胃挥发性脂肪酸和丙酸浓度均显著高于T1组（P＜0.05）。各组山羊氮摄入量和尿氮排泄量均无显著差异（P＞0.05）。T1组粪氮排泄量显著高于T2和T3组（P＜0.05），而T2组氮沉积量显著高于T1组（P＜0.05）。结论：在本试验条件下，综合考虑山羊采食量、养分消化、氮沉积及瘤胃发酵性能，发酵棕榈叶的适宜添加水平为10%。 [关键词]棕榈叶|山羊|养分摄入量|瘤胃发酵|氮代谢     

武陵山区山羊粪利用与思考——以湖南省龙山县为例

为研究武陵山区羊粪处理利用情况,笔者对湖南省龙山县山区羊粪处理利用情况进行调查与分析,并从政府引导、建厂加工、适度养殖、还田处理、行业监管和力量投入等方面展开思考与探讨,以期为武陵山区羊粪的处理利用提供参考。     

光照和温度在大空间尺度下与山羊BMI的关系

为了明确环境因素与山羊体质指数(BMI)的关系,分析环境因素对不同性别山羊影响的差异,为山羊养殖过程中环境控制提供参考,该研究收集了中国70个山羊产地的气象数据以及各产地不同性别山羊的体重、体长等数据;计算BMI,进行了逐步多元回归分析。结果显示,日照时数对公羊BMI有显著影响(P0.05);极端最低温度对母羊BMI有极显著影响(P0.01),即母羊对极端低温的耐受力比公羊差。     

葡萄籽原花青素对山羊精液低温保存效果的影响

为提高精液低温保存质量,在山羊精液低温保存基础稀释液中分别添加浓度为0、10、30、50、70 mg/L葡萄籽原花青素,检测精液保存过程中各组之间的精子活率、顶体完整性、质膜完整性、线粒体活性、T-AOC、MDA等精子质量评定指标,探讨葡萄籽原花青素对山羊精液低温保存效果的影响及最适添加浓度。结果表明:一定浓度葡萄籽原花青素可提高精液保存质量,且最适添加浓度30 mg/L。在30 mg/L处理组中,精液各项指标(MDA除外)在保存期间均最高,且5 d时精子活率、顶体完整率.、线粒体活性、T-AOC显著高于其他组(P0.05),其精子活率为51.46%,顶体完整率为67.55%,质膜完整率为50.97%,线粒体活性为50.78%。     

一例山羊传染性脓疱的诊治

羊传染性脓疱主要引起人和动物的接触传染性皮炎。该病传染性强、发病率高,呈世界性流行,给养羊业带来巨大的经济损失,并对人类健康构成威胁,具有一定的公共卫生学意义。ORFV不同毒株抗原性的差异及被感染动物表现出临床症状的不同,给该病的诊断和防治造成了困难。对近年来国内外学者在病毒基因组的组成、病毒编码的主要功能蛋白、免疫特性、致病机理及诊断与防治等方面取得的进展作一综述,以期为ORFV的预防与控制提供科学依据。     

一例山羊肝片吸虫病的诊治与思考

羊肝片吸虫病为重要的寄生虫病,其病原属片形科,为重要人畜共患性寄生虫,对人畜健康危害极大。其虫体可从山羊胆管移动到消化道,对患畜脏器造成机械性损伤,继而引发贫血、肝硬化等症状,甚至导致死亡。本文对一例山羊肝片吸虫病的诊断与治疗过程进行详细介绍,以供参考。     

不同日龄阶段肉用仔鸡饲养管理技术

肉用仔鸡从出生到8周龄出栏这一阶段的饲养管理,是肉鸡养殖业生产的重要环节之一,其目的是要求生长速度快,肉质细嫩、味美,耗料少,成活率高,经济收益大。为此,我们要在其不同日龄阶段应当采取不同的饲养管理措施,搞好肉用仔鸡的饲养。     

肉用母牛妊娠期和哺乳期的饲养技术

饲养肉牛,母牛妊娠期和哺乳期的饲养技术是关键,但是多数养殖户在饲养过程中缺乏系统的技术指导和精细化管理措施,致使肉用母牛的繁殖率和饲料转化率不高,养殖效益不理想.为此,本文针对农区、牧区不同地区的自然条件和环境因素,对繁殖母牛受胎率和犊牛断奶等技术环节进行论述,以期为提高养牛经济效益提供技术参考.     

不同蛋白质水平精料对广丰山羊生长性能、屠宰性能和血清生化指标的影响

本试验旨在研究不同蛋白质水平精料对广丰山羊生长性能、屠宰性能和血清生化指标的影响。选择健康且体重相近的3月龄左右广丰山羊30只,随机分为3组,每组10只(公母各占1/2)。3组山羊分别饲喂高(22.87%,H组)、中(19.07%,M组)和低(15.23%,L组)蛋白质水平的精料,粗料均为野生芒草鲜草,精粗比50∶50。试验期为84 d,其中预试期为14 d,正试期为70 d。结果显示:1)正试期第35天,L组的体高显著低于其他2组(P<0.05),而料重比则相反,其他生长性能指标各组间无显著差异(P>0.05)。2)正试期第14天,H组血清尿素氮含量极显著高于其他2组(P<0.01),其中M组最低;正试期第35天,L组血清尿素氮含量显著高于M组(P<0.05);正试期第70天,H组和L组血清尿素氮含量极显著高于M组(P<0.01)。3)H组的眼肌面积显著高于M组(P<0.05),其他屠宰性能指标各组间无显著差异(P>0.05);M组的瓣胃重量和指数以及皱胃重量均显著低于L组(P<0.05),而肺脏指数则显著高于L组(P<0.05);H组的心脏重量和指数均显著低于L组(P<0.05)。综上所述,在本试验条件下,蛋白质水平为19.07%的精料可以满足广丰山羊的育肥需求。